类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Sonic Hedgehog信号通路表达的初步研究

目的:初步探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和滑膜组织中SonicHedge-hog(Shh)信号通路相关因子表达及意义。方法:收集符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准、28个关节疾病活动度评分(DAS28)≥3.2,病情活动RA患者(35例)及年龄、性别相匹配的健康志愿者(35例)外周血2 mL,分离PBMCs,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Shh信号通路中信号肽Shh、膜受体Ptch1和核转录因子Gli1 mRNA的表达。收集10例病情中度活动(DAS28≥3.2)RA患者的滑膜组织,同时收集5例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达情况。结果:RA患者PBMCs中Shh和Gli1 mRNA的相对表达量分别为1.36±1.48和1.15±0.68,对照组上述信号分子的mRNA表达量分别为0.47±0.25和0.49±0.05,2组差异有统计学意义(P<0.05),Ptch1 mRNA表达在2组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化示Shh和Gli1蛋白表达的阳性细胞百分率均高于对照组(P<0.05),Ptch1蛋白表达阳性细胞百分率2组无显著差异(P>0.05)。结论:RA患者PBMCs与滑膜组织中检测到Shh通路相关信号分子Shh和Gli1的表达上调,提示RA患者中可能存在Shh信号通路的激活,其在RA发病机制中的作用值得进一步研究。

类风湿关节炎滑膜血管内皮细胞中Smoothened的表达及其意义

目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened(Smo)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义。方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况。采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理,West-ern blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D(actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显。EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调(P<0.05)。RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为(24.30±0.45)%,低于阴性对照组的(36.86±0.62)%(P<0.05),细胞凋亡率为(48.00±1.96)%,高于阴性对照组的(31.70±0.82)%(P<0.05)。结论:Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控。

类风湿关节炎患者骨质疏松及其相关因素的初步调查

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者中骨质疏松(OP)的发生情况及其相关危险因素。方法采用GE Insight/Achilles express高频率声波(超声波)检测右跟骨的骨质状态,测量90例RA患者和80名年龄、性别基本匹配的健康志愿者的跟骨骨密度(BMD),按WHO确定的诊断标准将RA患者和正常受试者各分为3组,即骨量正常、骨量减少和骨质疏松组。采用问卷形式调查患者的性别、年龄、体重、身高、吸烟史、钙剂摄入、骨折家族史、RA病程及糖皮质激素应用等因素,分析其与OP的相关风险。结果 RA患者骨量正常、骨量减少和骨质疏松组的构成比与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示RA患者中发生OP的概率较对照组发生更大。在年龄、性别无明显差异的情况下,RA病程、吸烟、激素、骨折家族史是增加OP的危险因素。多因素Logistic分析得到的回归模型:RA伴发骨质疏松=-0.530+0.164×病程+3.304×吸烟+1.783×骨折家族史。结论 RA患者较健康志愿者更易发生骨量减少和骨质疏松。RA患者BMD的降低和OP的发生是多因素的,其中RA病程是RA患者发生OP的独立危险因素,早期诊断与治疗对预防RA患者发生OP具有重要意义。

心宝丸对冠心病不稳定性心绞痛患者血液流变学及血脂的影响

目的分析心宝丸对冠心病不稳定性心绞痛患者的血液流变学及血脂的影响,为临床治疗提供依据。方法2018年1月—2019年1月,将广东省珠海市人民医院收治的80例冠心病不稳定性心绞痛患者作为研究对象。按随机数表法,分为对照组和观察组,各40例。对照组给予常规治疗,包括长期口服肠溶阿司匹林片及硝酸甘油片,观察组在对照组基础上加用心宝丸。治疗1个月后,分析比较两组患者在治疗效果、血液流变学、血脂水平、不良反应。结果观察组的总有效率(92.5%,37/40)与对照组(80.0%,32/40)相比明显提高,差异具有统计学意义(P <0.05)。治疗前,两组患者的纤维蛋白、血浆黏度、全血黏度无统计学意义(P> 0.05);治疗后,两组患者的上述血液流变学指标均呈下降趋势,且观察组的血液流变学指标均低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。治疗前,两组患者的血脂指标水平均无统计学意义(P> 0.05);治疗后,观察组的低密度脂蛋白(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平与对照组明显降低,而高密度脂蛋白(HDL-C)水平与对照组相比显著提高,差异具有统计学意义(P <0.05)。两组治疗前后凝血功能、血尿常规、肝肾功能等无显著变化,均未见明显不良反应。结论心宝丸对冠心病不稳定性心绞痛患者疗效显著,可明显改善患者血液流变学及血脂水平,值得在临床推广应用。

不同剂量阿托伐他汀治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的疗效对比研究

目的观察并对比不同剂量阿托伐他汀治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的临床应用效果。方法将我院自2018年9月-2019年9月接收的60例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者选为观察对象,随机分为观察组(30例)与对照组(30例)两组。两组患者分别应用大剂量(40 mg)与小剂量(20 mg)的阿托伐他汀治疗。观察两组患者治疗前后的总胆固醇与三酰甘油(TG)水平,对比两组患者的不良反应发生率。结果两组患者治疗前,总胆固醇(TC)与三酰甘油(TG)水平无明显差异(P>0.05);观察组患者治疗后,TC与TG水平明显优于对照组(P<0.05)。观察组患者发生呕吐、过敏及疼痛不良反应患者6例,不良反应发生率20.0%,明显优于对照组的30.0%(9例)(P<0.05)。结论大剂量阿托伐他汀治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病效果明显,既改善了患者的TC与TG水平,又降低了患者的不良反应发生率。

Smoothened表达对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞RhoA/ROCK通路的影响

目的初步探讨Sonic Hedgehog(Shh)信号通路分子Smoothened(Smo)对类风湿关节炎(RA)成纤维滑膜细胞(FLS)RhoA/ROCK通路相关分子的影响。方法收集病情活动(DAS28≥3.2)RA患者关节镜手术或关节置换术切除的滑膜组织,组织块培养法培养RA-FLS作为细胞模型,流式细胞术检测CD55阳性率鉴定细胞,然后分别予Smo分子激动剂Purmorphamine或抑制剂KAAD-Cyclopamine处理,应用GST-pull down法检测RhoA活性,Western blot检测ROCK活性与Smo蛋白表达。结果与对照组相比,RA-FLS经Purmorphamine刺激后,活性RhoA蛋白、磷酸化MYPT1蛋白及Smo蛋白均上调(P<0.05);经KAAD-Cyclopamine处理后,活性RhoA蛋白、磷酸化MYPT1蛋白及Smo蛋白均下调(P<0.05)。结论 RA-FLS Smo表达可影响RhoA/ROCK信号的传导。Smo可能参与了RA-FLS中Shh信号通路非经典途径的调控。

Sonic Hedgehog信号通路对内皮细胞凋亡影响的初步研究

目的初步探讨类风湿关节炎（RA）滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白的表达，并观察肿瘤坏死因子（TNF）-α作用于人脐静脉内皮细胞系EA．hy926细胞后SonicHedgehog（Shh）信号通路相关分子的表达，及特异性抑制Smo对细胞凋亡的影响。方法收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织，同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组，免疫组织化学法检测滑膜组织血管内皮细胞Smo蛋白表达情况。予不同浓度TNF-α或联合不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测Shh、Ptchl、Smo、GlilmRNA表达。予不同浓度环巴胺处理EA．hy926细胞，加入TNF-α＋放线菌素D（ActD）诱导细胞凋亡，采用细胞增殖与毒性试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡情况。两样本均数比较采用t检验，多个样本均数比较采用单因素方差分析。结果RA患者滑膜血管内皮细胞Smo阳性表达率为（81±23）％，高于对照组阳性表达率（20±17）％（P〈0．05）。EA．hy926细胞经TNF-α刺激后，Shh、SmomRNA表达上调（P〈0．05），PtchlmRNA表达无明显变化（P〉0．05），GlilmRNA表达下调（P（0．05）。TNF．n与环巴胺共同作用后，Shh、Smo和GlilmRNA表达下调（P〈O．05）。不同浓度环巴胺（分别为2,4、8μmol／L）作用后的细胞存活率分别为（57±6）％、（44±8）％、（32±5）％，低于TNF-α ActD组细胞存活率（64±6）％（P〈0．05），细胞凋亡率分别为（12．4±3．3）％、（14．5±2．7）％、（15．7±2．4）％，高于TNF-αActD组细胞凋亡率（7．1±1．3）％（P〈0．05）。结论Shh信号通路在RA患者滑膜组织血管内皮细胞中存在激活。特异性抑制Shh信号通路，可以促进内皮细胞凋亡。Shh信号通路可能参与TNF-α作用于内皮细胞后的抗凋亡调控机制。

英夫利西单抗治疗类风湿关节炎病情缓解停药后复发再治疗1例报告

患者女，58岁，因“反复多关节肿痛3年，加重2个月”于2010—03—10入院。患者于3年前出现双腕关节、掌指关节和近端指间关节、膝关节肿痛，当地诊为类风湿关节炎（RA），长期服用中药及“特效药丸”治疗，关节症状时好时坏。人院前2个月关节肿痛加重，双膝关节肿痛明显。无发热和皮疹，无雷诺现象，无口眼干燥症状。查体：血压正常。轻度满月脸，跛行。双腕关节肿和压痛、活动受限，以右腕为重；双侧掌指关节、近端指间关节轻度肿和压痛；双膝关节肿胀、压痛、灼热，浮髌征阳性。