溃疡性结肠炎的肠道免疫研究进展

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因尚不十分明确的结肠和直肠慢性非特异性疾病。UC与肠道免疫关系密切,肠相关淋巴组织以及固有层含有丰富的免疫细胞,对于维持肠道免疫稳态具有重要作用。辅助性T细胞(T helper cell, Th)17/调节性T细胞(T regulatory cell, Treg)失衡与UC肠道免疫稳态息息相关,而Th17/Treg细胞的分化和功能受到细胞代谢重编程的影响。本文主要从与UC相关的肠相关淋巴组织以及固有层内多种免疫因素、Th17/Treg细胞代谢重编程以及中药免疫调节治疗UC现状3个方面进行综述,以期为UC相关研究提供参考。

温胆汤加减方改善心血管代谢性疾病的应用及制剂开发进展

随着全球老龄化进程加剧,慢性病共病尤其是心血管代谢性疾病(cardiometabolic multimorbidity,CMM)因代谢危险因素的累积而成为全球卫生领域的重大全球挑战。这类疾病涉及多种代谢状态共存,如糖代谢失调、脂代谢异常及非酒精性脂肪肝伴随心血管疾病,目前全球CMM发病率呈上升趋势,患者逐渐年轻化,死亡风险加剧。中医认为,CMM的病机主要是由于脾虚导致的气血运行障碍以及水湿痰浊内生。温胆汤作为中医经典方剂,广泛用于治疗与痰湿相关的疾病,具有调理气血、清热化痰的功效。经过长期临床应用,温胆汤的安全性和疗效得到了验证,并被纳入国家中医药管理局经典名方目录。随着温胆汤的广泛应用,其加减变化方在改善和治疗CMM方面也展现出积极的疗效。本文在归纳温胆汤及其衍生方在CMM治疗中的应用与研究的基础上,进一步对其生产工艺和质量控制等方面的研究进展进行总结,以期为该经典名方在现代医疗中的进一步开发提供参考。

闽楠天然次生林林分空间结构研究

以闽楠天然次生林为研究对象,通过12块标准地调查获取数据,运用混交度、大小比数和角尺度分析林分空间结构特征,并采用林分空间结构评价指数将其划分为5个评价等级。结果表明：（1）林分平均混交度为0.525,林木为强度混交;平均大小比数为0.506,林木分化属于中庸向劣态过渡状态;平均角尺度为0.518,林木呈聚集分布。（2）林分空间结构评价指数值为0.08～0.89,与理想的空间结构差距较大;仅5号标准地评价等级最高（Ⅴ级）,其表现为林木混交程度高,林木大小分化不明显,分布格局为随机分布,闽楠为主要优势树种,在林木竞争上占有优势地位,是较理想的空间结构模式。研究结果可为优化闽楠天然次生林空间结构经营措施的制定提供参考。

基于含水量和单双酯型生物碱含量探究栽培和野生附子去皮的差异

目的:基于含水量和单双酯型生物碱含量,探究栽培附子(江油附子)和野生附子(南阳附子)去皮的差异。方法:测定江油附子和张仲景使用的南阳附子去皮前后含水量,采用药典法测定附子去皮前后单双酯型生物碱的含量。结果:江油附子皮含水量显著高于南阳附子,南阳附子皮占整个附子的重量比例显著高于江油附子,江油附子去皮前含水量显著高于去皮后,南阳附子去皮后含水量显著高于去皮前。南阳附子皮单双酯型生物碱含量均显著高于江油附子。江油和南阳附子去皮前和去皮后单酯型生物碱含量均无显著差异,但江油附子双酯型生物碱含量去皮前显著高于去皮后,南阳附子双酯型生物碱含量去皮前显著低于去皮后。结论:江油附子去皮原因可能与附子皮中含有较高的双酯型生物碱和含水量有关,张仲景使用南阳附子去皮可能与其占比高,含有较高的双酯型生物碱,去皮后能降低毒性且便于生物碱溶出有关。

基于张仲景学术思想的炮附子4种炮制方法的比较研究

目的:采用综合评分法比较基于张仲景炮制思想的4种炮附子饮片质量,为炮附子的现代炮制方法提供依据。方法:利用CM-5分光测色计、TMS-Pro质构仪等客观量化检测仪器,以颜色、质地、3种单酯型生物碱含量、麻舌感结合3种双酯型生物碱含量、7种水溶性生物碱含量以及操作简便性为指标,以药典法炮附片为参照,采用综合评分法从古代干热法、现代烘烤法、清炒法和砂烫法中筛选质量较优的炮附子饮片。结果:各指标综合评分结果为:现代烘烤法≈砂烫法>清炒法>古代干热法>药典法。现代烘烤法和砂烫法所制备的炮附子均可达到内外皆黄、质地酥脆的传统质量要求。与生附片比较,3种双酯型生物碱含量降低88.9%~90.5%,3种单酯型生物碱含量增加255.2%~385.6%;与药典炮附片比较,3种单酯型生物碱和7种水溶性生物碱含量均显著增加。结论:现代烘烤法和砂烫法炮附子毒性成分含量低,有效成分含量高,且无胆巴液浸泡工序、操作简便易行、生产周期短。做为秉承张仲景学术思想且便于现代操作的炮附子炮制方法,值得挖掘与传承。

基于气质联用技术的乳香醋炙前后挥发油成分变化分析

目的比较乳香炮制前后挥发油中主要成分组成及含量的差异,研究不同炮制条件对挥发油成分的影响。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,控制炮制温度和时间得到不同炮制条件醋乳香。利用气相色谱质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析乳香醋炙前后挥发油,通过质谱数据库检索和对照品对照确定化学成分结构,采用色谱峰峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果乳香与醋乳香的主要成分均为乙酸辛酯、正辛醇、α-蒎烯、柠檬烯,乳香中主要成分的相对含量范围分别为51.92%~79.59%、2.09%~13.50%、0.16%~3.73%、0.10%~1.82%,醋乳香中主要成分的相对含量范围分别为66.72%~80.94%、4.33%~12.2%、0.39%~2.43%、0.25%~4.15%。萜类成分含量随醋炙温度的升高及醋炙时间的延长而增加,醇类及有机酸酯类成分随醋炙温度的升高及醋炙时间的延长而减少,大部分成分随醋炙程度加深而含量增加,而己酸乙酯、α-蒎烯等在乳香中含量较少且炮制后含量减少。结论乳香挥发油含量较醋乳香高,各挥发油成分含量在炮制后发生改变。

高速逆流色谱技术在中药及天然产物中的应用研究

开展中医复方药效物质基础研究,对揭示方药配伍规律具有重大意义。而复方中种类繁多、含量悬殊的化学成分使得研究极具挑战,因此采用必要的分离手段至关重要。高速逆流色谱(high-speed counter-current chromatography,HSCCC)具有分离速度快、成分不变性且无损失的特点,为单体成分的分离、化学组分的分析以及活性成分的发现提供了有力的技术保障。本文针对近些年HSCCC技术在溶剂体系、洗脱方式、检测技术以及其他提取技术联合应用的相关报道进行综述,同时归纳了HSCCC技术在中药及天然产物化学成分研究中的应用实例,以期为中医复方药效物质基础研究提供参考。虽然HSCCC的广泛应用仍然受到制约,但相信随着中药及天然产物物质基础研究的逐步深入,HSCCC将为中医复方药效物质基础研究提供更加完备的技术支撑。

乳香与醋乳香对2型糖尿病大鼠改善作用的对比研究

目的:探讨中药乳香醋炙前后对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高脂饲料诱导2型糖尿病大鼠的改善作用,为扩展中医药的应用和阐明炮制增效机理奠定基础。方法:除正常组外将24只2型糖尿病模型大鼠随机分为模型组、乳香组、醋乳香组及阳性药组,以腹腔注射STZ的方法辅以高脂饲料诱导糖尿病模型。正常组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC-Na),阳性药组给予盐酸二甲双胍的0.5%CMC-Na混悬液,乳香组和醋乳香组分别给予临床等效剂量乳香及醋乳香的0.5%CMC-Na混悬液进行灌胃给药,共给药2周,给药期间每周进行体质量及空腹血糖的监测。末次给药后,采用ELISA法测定血中胰岛素、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,GHb)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和内皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平并比较胰腺病理切片。结果:与模型组比较,乳香和醋乳香在给药2周后,体质量和胰岛素水平显著提升(P<0.05或P<0.01),而空腹血糖值、GHb、NO及ET-1水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。胰腺病理切片显示,醋乳香组糖尿病大鼠胰岛萎缩和胰泡细胞变性程度较乳香组降低,且醋乳香的改善作用优于乳香。结论:乳香醋炙后对糖尿病大鼠的改善作用增强。

多种统计方法比较黄连姜制工序中影响生物碱含量的因素

目的:测定黄连不同姜制品中6种生物碱的含量,采用多种统计方法对数据进行分析,找出姜制工序中影响姜黄连质量的因素。方法:采用高效液相色谱法测定黄连不同姜制品中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。运用主成分分析、聚类分析、LSD(Least-Significant Difference)检验、独立t检验对结果进行分析。结果:黄连经姜炙后,表小檗碱、黄连碱含量略有上升,药根碱、非洲防己碱、巴马汀、小檗碱含量略有下降,传统姜炙品中各成分含量均高于烘制品。聚类分析发现榨汁组和煮汁组可以聚为一类;烘法和炙法具有明显不同的聚类,对黄连姜制品中的6种生物碱之和进行LSD检验,亦表明烘法与炙法具有显著性差异。对榨汁组进行独立t检验,结果表明姜汁与黄连饮片拌匀或闷润至透心在6种生物碱上无显著性差异,LSD与独立t检验的结果与聚类分析的结果一致。结论:采用同一批次黄连炮制所得的姜制品中,姜的来源、不同方法制备的姜汁及闷润过程对6种生物碱影响不大,加热方式可能是影响姜黄连质量的因素。考虑到润至透心需加入大量水稀释姜汁,炒干所需工时较长,故辅料姜汁与黄连饮片拌匀吸尽即可。

生川乌片炮制过程中5-HMF含量随炮制时间的变化规律研究

目的:考察生川乌片炮制过程中5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量随炮制时间的变化规律。方法:按照2015版《中华人民共和国药典》(一部)制川乌项下的蒸与煮法,分别制备不同炮制时间的制川乌片,采用HPLC法测定川乌各炮制品中5-HMF的含量。结果:生川乌片中5-HMF含量为4.45μg/g;煮制品及蒸制品在6 h之内,5-HMF的含量变化规律基本一致,均随加热时间延长呈非线性增加。在相同的时间点,蒸制品含量显著高于煮制品。结论:首次建立了HPLC法测定川乌中5-HMF含量的方法,该法稳定、可靠;生川乌片在蒸、煮两种加热方式下5-HMF含量的变化规律与加热时间有关,该结果对川乌饮片中5-HMF的检测及其质量控制提供参考。

炮附片HPLC特征图谱及炮制前后比较研究

目的建立炮附片HPLC特征图谱,分析炮附片炮制前后物质基础差异。方法AgilentExtend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈(A)-40 mM乙酸铵缓冲液(氨水调PH为10.5)(B),梯度洗脱,检测波长为240 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果建立了炮附片HPLC特征图谱。生附子经炮制成为黑顺片后,11个峰的峰面积显著减小,3种单酯型生物碱含量降低,3种双酯型生物碱基本检测不到。黑顺片经砂炒制成炮附片后,3种单酯型生物碱含量进一步降低,且无新成分峰出现。结论生附子经炮制成为炮附片后,可使生附子的成分发生量变和质变。炮附片与黑顺片特征图谱基本一致,含量略有差别。

基于militarine含量结合UPLC指纹图谱的不同产地白及饮片质量分析

[目的]采用超高效液相色谱法(UPLC)测定militarine(1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯)的含量,并建立不同产地白及饮片的UPLC指纹图谱,为白及饮片的质量控制提供参考依据。[方法]采用ACQUITY UPLC?誖BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),以乙腈-纯水为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长270 nm,柱温46℃,建立白及饮片的指纹图谱,进行相似度评价,在含量测定和指纹图谱基础上,采用聚类分析和主成分分析对不同产地白及饮片质量进行分析。[结果]24批次的白及饮片militarine含量在18.98~44.87 mg/g之间,指纹图谱分析共标定12个共有峰,相似度在0.812~0.976之间,其中22批白及饮片的相似度均大于0.9,表明市售白及饮片整体质量基本一致;聚类分析和主成分分析将militarine含量和指纹图谱中4个关键成分的总相对含量均较低的样品聚为一类,聚类结果与相似度高低关系不大。[结论]测定militarine含量结合UPLC指纹图谱评价白及饮片的质量,具有一定的科学性和可行性。

南阳野生乌头整株植物不同部位的生物碱和多糖含量比较研究

目的:比较野生南阳乌头整株植物不同部位的生物碱和多糖含量差异,探究南阳野生乌头地上部分和须根的药用价值。方法:采用HPLC法检测南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部位中3种单酯型生物碱、3种双酯型生物碱含量;采用蒽酮-浓硫酸法分光光度法检测南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部位中多糖含量。结果:南阳野生乌头整株植物4个部位中,3种单酯型生物碱含量由高到低依次为:南阳野生乌头>南阳野生附子>须根>地上部分(P <0.05),3种双酯型生物碱含量由高到低依次为:南阳野生附子>须根>南阳野生乌头>地上部分(P <0.05),总生物碱含量由高到低依次为:南阳野生附子>须根>南阳野生乌头>地上部分(P <0.05),多糖含量由高到低依次为:南阳野生附子>南阳野生乌头>地上部分>须根(P <0.05)。结论:本实验对南阳野生乌头、南阳野生附子、须根、地上部分生物碱和多糖成分进行检测,为须根和地上部分的药用价值提供了科学依据。

中药多糖含量测定方法研究

中药质量影响中医复方功效的发挥,而中药有效成分含量的高低是评价中药质量优劣的重要指标。多糖作为中药的有效成分之一,由于其结构和组成极为复杂,其含量测定一直是难点问题。《中华人民共和国药典》收载的中药多糖含量测定方法基本采用紫外-可见分光光度法(UV-Visible spectrophotometer,UV-Vis)存在一些问题,方法的准确性亟待提高。本文通过系统查阅国内外文献,归纳了目前测定中药多糖含量的常用方法,主要分为多糖的直接测定和多糖水解后单糖的测定。前者主要采用UV-Vis法、高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、近红外光谱法(near-infrared reflectance,NIR)和碘量法,后者主要采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、气相色谱法(gas chromatography,GC)、离子色谱法(ion chromatography,IC)。本文从对照品的选择、供试品溶液制备方法等方面对《中华人民共和国药典》收载的中药多糖含量测定方法进行了总结和讨论,通过归纳分析为中药多糖质量评价提供参考。

闽楠天然次生林树种间联结性分析

应用方差比率法、2×2列联表的χ2检验以及Spearman秩相关系数对闽楠天然次生林重要值较高的15个主要树种进行联结性分析,同时对目的树种闽楠不同生长期与其他乔木层树种进行关联性分析。结果表明:(1)物种间总体关联性检验表明15个树种总体种间呈不显著正关联,种间联结较为松散,树种的分布有一定的独立性;105个种对的正负关联比为0.91,检验显著率为9.52%。(2)林分中闽楠大树(20 cm≤DBH)、中树(10 cm≤DBH<20 cm)、小树(5 cm≤DBH<10 cm)与其他乔木层树种所形成的105个种对的正负关联比分别为0.86、0.76和0.69,其检验显著率分别为11.43%、8.57%和5.71%,均表现为大树>中树>小树,种间联结较为松散,群落处于不稳定发展阶段。

蕨类植物碳氮磷化学计量特征及其与土壤养分的关系

为探讨蕨类植物碳氮磷化学计量特征与土壤养分的关系,对福建省亚热带森林林下芒萁和乌毛蕨地上部分和地下部分的碳、氮、磷（C、N、P）含量和0-10 cm 和10-20 cm 两个土层的养分含量进行了测定.结果表明,无论是芒萁还是乌毛蕨,地上部分的N、P 含量均高于地下部分,而C 含量则无显著差异,导致地上部分的C∶N 和C∶P 均低于地下部分.与乌毛蕨相比,芒萁地上部分的N、P 含量更低,地上和地下部分的C 含量、C∶N和C∶P 以及 N、P 含量的变异系数和表型可塑性指数则更高,表明芒萁采取了较高的养分利用效率和“表现最大化”的策略,而乌毛蕨则选择了较低的养分利用效率和“表现维持”的方式.两种蕨类植物地上和地下部分的N 含量与土壤N 含量（0-20 cm） 均无显著相关.芒萁两个部位的P 含量则均与土壤P 含量（0-10 cm 和10-20 cm）呈显著正相关,乌毛蕨P 含量总体上与土壤P 含量的相关性不显著（除地下部分的P 含量与10-20 cm土层的P 含量呈弱的正相关外）.这表明芒萁具有作为亚热带森林土壤P 库指示植物的潜力.

乳香醋炙前后对血瘀模型大鼠改善作用的对比研究

目的:比较乳香醋炙前后对血瘀模型大鼠的活血作用。方法:采用全血血小板聚集试验进行体外评价,以二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)为诱导剂,2%氢氧化钾为对照组,阿司匹林为阳性药组,电阻法测定乳香和醋乳香供试品溶液对大鼠体外全血血小板聚合值的影响。体内评价采用30只清洁级SD大鼠,除正常组外以注射肾上腺素和冰水浴刺激的方法建立寒凝血瘀动物模型,将24只血瘀模型大鼠随机分为模型组、乳香组、醋乳香组及阳性药组每组各6只。正常组和模型组均给予0.5%羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC-Na),阳性药组给予阿司匹林0.5%CMC-Na混悬液,乳香组和醋乳香组分别给予临床等效剂量乳香及醋乳香的0.5%CMC-Na混悬液进行干预,末次给药后检测各组全血黏度、血浆黏度、凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)、血沉及红细胞压积水平。结果:体外实验结果表明,与对照组比较,醋乳香组和乳香组的全血血小板聚合值和斜率均显著降低(P<0.05,P<0.01),且醋乳香的抑制全血血小板聚集作用优于乳香。体内实验结果表明,与模型组比较,醋乳香组低切变率的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积及FIB显著下降,而TT和PT值显著提升(P<0.05,P<0.01);乳香组仅有红细胞压积明显下降(P<0.05),TT值显著上升(P<0.01)。结论:乳香和醋乳香均具有抑制全血血小板聚集、改善寒凝血瘀大鼠模型的血液流变学和抗凝血作用,且醋炙后的改善作用更好。

黄精酒制前后多糖单糖组成及抗氧化活性对比研究

目的探讨黄精酒制前后多糖的单糖组成差异及抗氧化活性的变化。方法采用L9(34)正交表进行正交试验,确定黄精多糖的最佳水解条件,并对比高效液相色谱-蒸发光散射检测法(High Performance Liquid Chromatography-Evaporative Light Scattering Detection,HPLC-ELSD)、高效液相色谱-示差折光检测法(High Performance Liquid Chromatography-Refractive Index Detector,HPLC-RID)和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱仪-二极管阵列检测法(3-Methyl-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one-High Performance Liquid Chromatography-Diode Array Detector,PMP-HPLC-DAD)3种分析方法的检测效果,确定测定黄精多糖单糖组成的最佳检测方法,考察黄精酒制前后多糖的单糖组成变化,并运用主成分分析法(Principal Components Analysis,PCA)和正交偏最小二乘辨别分析法(Orthogonal Partial Least Squares-Discriminant Analysis,OPLS-DA)进行数据统计,寻找差异性成分。最后以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率大小为指标考察黄精酒制前后多糖的体外抗氧化活性。结果对比3种分析方法,HPLC-ELSD的检测效果最好,可检测到阿拉伯糖、果糖、甘露糖和葡萄糖4种单糖。PCA和OPLS-DA结果均显示黄精酒制前后单糖含量存在差异,可明显区分开,并筛选出3个差异性成分。此外,黄精酒制后对DPPH自由基的清除能力增强,半数抑制浓度(IC_(50))为0.57 mg/mL。结论采用HPLC-ELSD法的检测效果最好,该方法简单方便,重复性好。酒制对黄精多糖的单糖组成影响较大,黄精酒制后多糖发生水解及结构发生改变,其抗氧化活性增强。该研究可为黄精多糖的开发利用奠定一定的基础。

厚朴及其不同炮制品中挥发性成分GC-MS分析

目的 GC-MS法分析厚朴不同炮制品中挥发性成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,GC-MS法检测并鉴定生姜、厚朴生品及各炮制品中挥发性成分,归一化法测定其相对含有量。结果厚朴生品及各炮制品挥发油含有量由高到低依次为姜浸品>生品>姜炙品>姜煮品>清水煮品。生品、姜浸品、姜炙品、姜煮品、清水煮品分别鉴定出28、28、24、25、20种化合物,占挥发油总量的95.21%~97.99%。生制品共有成分20种,姜煮品与清水煮品相比新增生姜中的3种成分。结论该方法稳定可靠,可用于厚朴的质量控制。

中药多糖定性鉴别与糖谱的研究进展

中医复方疗效与中药质量密切相关,采用科学方法评价中药质量十分必要。定性鉴别与指纹图谱是评价中药质量的主要指标。中药多糖多为不同分子量分布范围的混合物,其生物活性与其单糖组成、分子量大小与分布等结构因素密切相关。目前《中华人民共和国药典》仅采用理化鉴别法对中药中的多糖进行定性鉴别,未收载中药多糖的糖谱分析方法,无法体现各中药多糖的真实状态。本文通过系统查阅文献,归纳国内外中药多糖定性鉴别与糖谱的最新研究内容,主要从多糖分子量分布和多糖的单糖组成两方面开展研究。其中,依据多糖分子量分布的定性鉴别主要采用高效凝胶渗透色谱法(high performance gel permeation chromatography,HPGPC)、质谱法(mass spectrum,MS)和黏度法,依据多糖单糖组成的定性鉴别主要采用气相色谱法(gas chromatography,GC)、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、离子色谱法(ion chromatography,IC)、薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)和高效凝胶电泳法(high performance capillary electrophoresis,HPCE)。糖谱是通过多批次样品分析而获取的共性信息建立的图谱,依据多糖整体结构特征的糖谱建立主要采用HPGPC法、红外光谱法(infrared ray,IR)和近红外光谱法(near infrared ray,NIR),依据多糖单糖组成的糖谱的建立主要采用HPLC法,通过归纳总结分析以期为科学合理地评价中药多糖质量,从而保障中医临床疗效提供依据。