螺吉山种畜场绵羊进行性肺炎的防治

四川省凉山州螺吉山种畜场是承担国家“七五”攻关项目—培育48～50支纱半细毛羊新品种的基地。该场现有种羊1286只,品种为“边区菜斯特”(简称边莱羊)、美利奴、林肯以及它们的杂交后代羊。长期以来,在边莱羊及其杂交后代羊中发生一种“烂肺子病,”治疗无效,死亡甚多。有两群引进的纯种边莱羊共108只,在1986～1987两年中。

驴胎LP-1细胞株的建立及其生物学特性的研究

LP-1细胞株取自健康驴三月龄胎儿的皮肤,体外共传48代,其生长动态符合二倍体细胞株的有限生命期特性,染色体稳定,达到二倍体水平。未发现外源因子污染,致肿瘤活性试验阴性。对猪伪狂犬病毒、马传贫病毒、绵羊梅地-维斯纳病毒敏感。LP-1细胞株易于培养,不仅可作为制备马传贫弱毒疫苗和抗原的优良焙养基质,还为马传贫强、弱毒结构蛋白、基因分析等基础理论、生物技术研究提供了条件。

山羊抗犬瘟热-细小病毒二联高免血清的研制

采用犬瘟热-细小病毒二联活苗结合它们的强毒组织灭活苗,经不同途径交替免疫成年山羊4次后,抗犬瘟热病毒血清中和抗体效价可达1:1024,抗犬细小病毒血凝抑制(HI)效价达1:2048。用该血清制剂对临床感染犬瘟热和病毒性肠炎的犬、貉、狐336余病例进行跟踪治疗,总有效率可达85％,治愈率为68％。本血清具有安全性好、特异性强、治疗效果可靠等优点。

绵羊进行性肺炎病毒对驴胎皮肤细胞的感染试验

绵羊进行性肺炎病毒(OPPv)在驴胎皮肤细胞(D细胞)上连续传代培养至60代。随着代次的增加,以多核巨细胞为特征的细胞病变可提前至接毒后2～3天出现.至5～6天时大部分贴壁细胞脱落,病毒滴度达到高峰(7.25TC1D_(59)/0.1ml)。高代次的传代细胞毒经电镜超薄切片观察,病毒粒子呈球形.直径80～120nm,大多散在或以聚堆的形式分布在细胞外,环境在胞浆膜可以见到出芽增殖的病毒粒子.以绵羊进行性肺炎驴胎皮肤细胞毒(OPPDV)接种绵羊,可产生沉淀抗体。

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅳ.马传贫弱毒LP继代细胞疫苗使用代次的研究

用马传贫驴白细胞123代弱毒通过 LP 继代细胞传代获得的 LP 继代毒制备了6、8、10、13及15代 LP 继代细胞疫苗,然后分别用10倍稀释及原液疫苗2 ml/匹皮下接种马进行效力试验。结果,在10倍稀释疫苗免疫组中,6代疫苗及15代疫苗保护率均为50%,10代疫苗保护率为100%;在原液疫苗免疫组中,6代疫苗保护率为50%,8、10、13及15代疫苗保护率均在90%以上。为此,该疫苗使用最佳代次为8～13代。

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究 Ⅲ.马传贫弱毒LP继代细胞冻干疫苗保存期及对马免疫期试验

马传贫弱毒LP继代细胞疫苗冻干后置于-40℃及冷库保存18个月,其毒价为10^(-7)/ml,与冻干前湿苗的毒价一样。用冻干疫苗免疫的马其免疫期可达25个月。

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究——Ⅰ.马传贫弱毒对三株继代细胞的感染、增殖和免疫试验

将马传贫弱毒在LP、LL和LX继代细胞上培养传代,获得三株传代毒——LPV、LLV和LXV。传代毒对继代细胞能有规律地引起细胞病变;在电镜下,可见大量的典型马传贫病毒粒子以出芽方式成熟;经用补体结合(CF)反应、免疫扩散(ID)反应、免疫荧光(IF)抗体及ELISA等方法检测,传代毒随传代次数的增加,其对细胞的感染性也规律的增强;第5代和第10代传代毒对驴白细胞的TCID_(60)分别为5.5和6.5。将LPV、LLV和LXV传代毒接种健康马,临床观察293天,未见异常;接种后21天,感染马100％出现CF和ID抗体;攻击马传贫强毒后,分别保护4/4、3/4和2/4。

马传贫弱毒继代细胞疫苗的研究——Ⅱ.马传贫弱毒LP继代细胞疫苗及其免疫效力的研究

将马传贫弱毒通过LP继代细胞传代研制成LP继代细胞疫苗,接种马匹,血清阳转率可达80％以上;用L系传贫血清强毒攻击,可保护75％以上;免疫持续期至少16个月。该苗10^(-4)1ml接种马,保护75％;10^(-5)1ml接种驴,保护50％。按1:1加入牛驴清制成的冻干疫苗,与湿苗一样对马有较好的免疫力。用异源传贫强毒(Wyoming株及云南株)攻击疫苗接种马,表现有交叉免疫性。疫苗现地区域试验的结果,与试验室结果一样,对马具有较好的安全性及免疫性。

马传贫琼脂扩散无色透明冻干抗原的研究 Ⅰ.马传贫琼脂扩散无色透明冻干抗原的研制

按现行《规程》加以改良制备的马传贫琼脂扩散无色抗原的物理性状与美国、日本同类产品一样,呈无色、透明液体,检出率略高于现行《规程》制备的抗原、改良法制备的液体抗原,加保护剂冻干,可在37℃保存79天,在室温保存210天,便于长途运输及边远地区使用。改良法制备抗原的工艺流程简便,免除国外法需多次超速离心及特殊滤过的复杂程序,适于批量生产。