为了研究LINC(Linker of nucleoskeleton and cytoskeleton)复合体相关基因KASH(Klarsicht/Anc/Syne-1)和SUN(Sad1/UNC84)在海鞘(Ciona robusta)细胞核位置决定中的角色和作用,本研究鉴定并分别克隆了海鞘LINC复合体中编码2种Cr_KASH蛋...为了研究LINC(Linker of nucleoskeleton and cytoskeleton)复合体相关基因KASH(Klarsicht/Anc/Syne-1)和SUN(Sad1/UNC84)在海鞘(Ciona robusta)细胞核位置决定中的角色和作用,本研究鉴定并分别克隆了海鞘LINC复合体中编码2种Cr_KASH蛋白和2种Cr_SUN蛋白的基因。荧光定量PCR方法分析了上述4个基因在海鞘胚胎各个时期的表达量,发现在胚胎发育的尾芽延伸期,几种基因的表达量均有不同程度的提高。原位杂交方法揭示Cr_KASH1、Cr_SUN1和Cr_SUN2特异表达在海鞘胚胎的脊索组织中,而Cr_KASH2则特异表达在肌肉组织。在NIH/3T3细胞中的亚细胞定位分析证实,上述LINC复合体蛋白与不同的细胞骨架交联。通过破坏细胞骨架微丝和微管蛋白的聚合发现会影响KASH和SUN在细胞中的定位和结构,暗示海鞘LINC复合体成分和细胞质骨架蛋白协同作用调控细胞核的形态和位置。本文研究结果表明,在海鞘不同胚胎发育阶段和不同组织中,细胞核骨架或许通过不同LINC蛋白组分与细胞骨架结合影响细胞核的行为。展开更多
文摘为了研究LINC(Linker of nucleoskeleton and cytoskeleton)复合体相关基因KASH(Klarsicht/Anc/Syne-1)和SUN(Sad1/UNC84)在海鞘(Ciona robusta)细胞核位置决定中的角色和作用,本研究鉴定并分别克隆了海鞘LINC复合体中编码2种Cr_KASH蛋白和2种Cr_SUN蛋白的基因。荧光定量PCR方法分析了上述4个基因在海鞘胚胎各个时期的表达量,发现在胚胎发育的尾芽延伸期,几种基因的表达量均有不同程度的提高。原位杂交方法揭示Cr_KASH1、Cr_SUN1和Cr_SUN2特异表达在海鞘胚胎的脊索组织中,而Cr_KASH2则特异表达在肌肉组织。在NIH/3T3细胞中的亚细胞定位分析证实,上述LINC复合体蛋白与不同的细胞骨架交联。通过破坏细胞骨架微丝和微管蛋白的聚合发现会影响KASH和SUN在细胞中的定位和结构,暗示海鞘LINC复合体成分和细胞质骨架蛋白协同作用调控细胞核的形态和位置。本文研究结果表明,在海鞘不同胚胎发育阶段和不同组织中,细胞核骨架或许通过不同LINC蛋白组分与细胞骨架结合影响细胞核的行为。
