微卫星标记定位紫粒小麦色素基因

通过对紫粒小麦漯珍1号×白粒小麦8901杂交后代遗传分析表明,紫粒小麦漯珍1号的粒色性状受2对独立的显性基因控制;采用SSR技术结合BSA方法,筛选到了2个与色素基因相连锁的微卫星标记——2A染色体短臂上的Xgwm47和3A染色体长臂上的Xgwm155.

羟基红花黄色素A通过影响PCNA表达和MEK-ERK1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的探讨羟基红花黄色素A(HYSA)影响增殖细胞核抗原(PCNA)表达和MEK-ERK1/2信号通路抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的分子机制。方法采用贴块法培养大鼠血管平滑肌细胞,用血小板源生长因子(PDGF)诱导其增殖,采用MTT法检测HYSA对平滑肌细胞增殖的抑制作用;采用Western blot和免疫组织化学方法检测HYSA对PCNA表达及对MEK-ERK1/2信号通路的影响。结果HYSA浓度依赖性地抑制PDGF诱导的VSMC增殖,降低PCNA的表达,阻断PDGF受体的激活和MEK/ERK信号通路的活化,但不影响JNK和p38MAPK的活性。结论 HYSA通过降低PCNA表达和阻断MEK-ERK1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖。

黄芪多糖对阿霉素诱导的心力衰竭模型大鼠的保护作用

目的探讨黄芪多糖对大鼠阿霉素性心衰的保护作用。方法取雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、心衰模型组和黄芪多糖组,每组10只。黄芪多糖组连续14d黄芪多糖水溶液灌胃[3g/(kg·d)],正常对照组和心衰模型组灌胃等量蒸馏水。心衰模型组和黄芪多糖组分4次静脉注射阿霉素[10.4mg/(kg·2d)]复制心衰模型。给药全部结束后,检测大鼠心肌重构、细胞凋亡和抗氧化性等指标。结果阿霉素导致心肌纤维化,肌原纤维溶解断裂,线粒体肿胀变性,应用黄芩多糖能明显改善心衰症状。血流动力学和TUNEL染色进一步证实黄芪多糖能缓解阿霉素对心脏的损伤,这一作用可能是通过降低丙二醛(MDA)含量和Bax的表达,同时增加超氧化物歧化酶(SOD)活性和Bcl-2的表达来实现的。结论黄芪多糖对阿霉素性心衰有较好的保护作用。

黄芪多糖对甲流HA2蛋白真核表达载体免疫效果影响的研究

目的:检验不同剂量黄芪多糖对甲流HA2蛋白真核表达质粒免疫大鼠效果的影响。方法:首先,将编码HA2的质粒p HA2/EGFP转染CHO细胞,通过PT-PCR和荧光检验其在真核细胞中的表达效果。然后将60只大鼠随机分为6组,分别注射p EGFP-N1、生理盐水和p HA2/EGFP加不同浓度的黄芪多糖,注射前收集大鼠血清作为对照,据最后一次注射后第36天处死各组大鼠收集各组大鼠的血清,测量血清中细胞因子IFN-γ、IL-4和血清中Ig G对不同流感毒株血凝素的反应情况。结果:p HA2/EGFP+中等剂量APS组的IFN-γ、IL-4和血清中Ig G对血凝素的反应情况均与低剂量组和阴性对照组有显著性差异(P<0.05)。p HA2/EGFP+中等剂量APS组的细胞因子水平和对血凝素反应与高剂量组无显著性差别(P>0.05)。结论:中等剂量的黄芪多糖能增强甲流HA2蛋白真核表达质粒的免疫效果。

大剂量黄芪多糖增强甲型流感病毒NS蛋白表达的研究

目的:研究大剂量的黄芪多糖对构建有甲型流感A/PR/8/34株NS1基因的质粒pNS1/EGFP的在组织内表达的影响。方法:构建含甲流A/PR/8/34 NS1的质粒pNS1/EGFP。将60只昆明小鼠随机分为三组,每组20只,分别肌肉注射p EGFP-N1,pNS1/EGFP和pNS1/EGFP+腹腔注射黄芪多糖,间隔三周注射2次。最后一次注射后14 d和28 d分别取肌肉和血清标本。ELISA法测量血清IL-4和IFN-γ水平;Western blot法测量肌肉中NS1蛋白和Caspase-3的表达水平。结果:在最后一次注射后第14天,各组IL-4水平差别不大,而pNS1/EGFP+黄芪多糖组的IFN-γ水平与其他组有显著性差异,但caspase-3表达水平各组无显著性差异,而RT-PCR结果显示pNS1/EGFP+黄芪多糖组NS1蛋白水平与pNS1/EGFP无显著性差异。在第28天pNS1/EGFP+黄芪多糖组的IFN-γ水平和IL-4水平均与其他组有显著性差异,pNS1/EGFP+黄芪多糖组caspase-3表达与pNS1/EGFP组有显著性差异,而pNS1/EGFP+黄芪多糖组NS1的表达水平也与pNS1/EGFP组有显著性差异。结论:大剂量的黄芪多糖能够延长pNS1/EGFP表达,这种作用与炎症减轻和凋亡减少有关。

小鼠药理性月经模型中孕酮撤退激活NF-κB状态研究

目的:研究在小鼠药理性月经样模型中,阻断孕酮作用后子宫内膜组织崩解过程中核转录因子NF-κB激活状态。方法:切除卵巢后小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮处理模拟月经样出血,取部分子宫组织采用免疫组织化学、蛋白质印迹方法检测米非司酮处理(即孕酮撤退)后不同时期NF-κB激活及NF-κB上游信号分子的表达。结果:免疫组化结果显示,阻断孕酮作用后NF-κBp65显著入核,p50入核不明显。蛋白印迹实验显示,p50和p65蛋白发生了核浆转移,在孕酮撤退12h后核蛋白中表达量最高。NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β、磷酸化IκB-α在阻断孕酮作用后的各个时期都有表达,且各时相表达均有差异。结论:孕酮撤退可能通过NF-κB诱导性激酶、磷酸化IKK-β,继而磷酸化IκB-α通路激活NF-κB。

肿瘤坏死因子在小鼠药理性孕酮撤退月经样模型中的定位和表达

目的在药理性撤退小鼠月经样模型中,观察孕酮撤退后,肿瘤坏死因子(TNF-α)的定位和表达情况。方法卵巢切除的小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮即通过拮抗孕酮受体的方法(药理性撤退),导致孕酮撤退,并用免疫组化的方法观察米非司酮处理的不同时相,TNF-α在小鼠子宫内膜的定位;用实时PCR的方法观察TNF-α表达情况。结果免疫组化结果显示米非司酮处理后0～8 h,TNF-α主要存在于腔周围的血管内皮细胞;12～16 h,主要存在于内流的白细胞;24～48 h,主要存在于崩解组织边缘的间质细胞区域和修复好腺上皮细胞周围的间质细胞。实时PCR结果显示TNF-αmRNA在孕酮撤退后24 h内都有表达,并且TNF-α表达量逐渐增高,在12 h、16 h达到峰值。结论在此小鼠月经样模型中,米非司酮处理即孕酮撤退后TNF-α在此模型子宫中定位呈区域性分布,并诱导TNF-α表达升高,可能参与了子宫内膜的崩解。

高等中医药院校生物化学实验教学的思考与改革

生物化学是一门理论和实践相结合的学科。实验教学是不可缺少的重要组成部分。针对我校生物化学实验教学中存在的不足,从中医药专业学生的实验操作技能和学校实验室实际条件出发,认真探索适合中医药专业学生的生物化学实验内容、教学方法等。优化实验教学内容,完善实验教学体系,建立新的实验教学评价体系。通过实验教学既让学生掌握了实验基本原理、技能和方法,又培养了学生系统的科研思路,为以后从事科学研究打下坚实基础。

羟基红花黄色素A抑制PDGF促大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用

羟基红花黄色素A是从活血化瘀中草药红花中分离出来的黄酮类化合物,研究发现其对心血管疾病具有很好的治疗作用,但该化合物对血管增生性疾病的防治机理还不清楚。该研究通过采用大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)培养、MTT分析、Western blot、免疫组织化学等方法研究羟基红花黄色素A对VSMCs增殖的影响及其作用机制。实验结果表明,羟基红花黄色素A浓度依赖性地抑制血小板源生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导的VSMCs增殖,降低增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,阻断PDGF受体的激活和MEK/ERK信号通路的活化。该研究证实,羟基红花黄色素A通过降低PCNA表达和阻断MEK/ERK1/2信号通路抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖。

Salubrinal通过抑制内质网应激诱发的细胞凋亡改善心力衰竭大鼠心功能

目的探讨特异性真核翻译起始因子2α（eIF2α）去磷酸化抑制剂Salubrinal（Sal）对缺血诱发的心力衰竭（心衰）大鼠心功能的影响及其机制。方法8周龄雄性Sprague-Dawley（SD）清洁级大鼠，经冠状动脉结扎建立心肌梗死引起的心衰模型，然后对大鼠称重并进行编号，根据随机数字表分为4组，即假手术组（n=12）、心衰组（n=10）、溶剂对照组（DMSO组，n=12）和Sal处理组（Sal组，n=12）。分别于术后30min和8周采用超声心动图检测各组大鼠心功能指标，术后30rain超声心动图检查示左心室短轴缩短率（LVFS）〈30％标志模型建立成功。8周末处死大鼠后测定左心室质量指数，采用AnnexinV—PI染色流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，分别采用免疫组织化学法和实时逆转录聚合酶链反应检测心肌细胞内质网应激标志蛋白和mRNA的表达水平。结果（1）各组大鼠心功能的检测结果：药物干预8周后，心衰组大鼠左心室收缩末期内径（LVESD）和左心室舒张末期内径（LVEDD）均明显高于假手术组（P分别为0．032和0．021），左心室射血分数（LVEF）明显低于假手术组（P=0．028）。Sal组大鼠LVESD和LVEDD均明显低于心衰组和DMSO组（P分别为0．031和0．035），LVEF则明显高于心衰组和DMSO组（P分别为0．029和0．036）。（2）各组大鼠左心室质量指数的检测结果：药物干预8周后，心衰组大鼠左心室质量指数明显大于假手术组[（2．30±0．40）mg／g比（1．78±0．31）mg／g，P〈0．05]，Sal组则明显小于心衰组和DMSO组[（1．88±0．25）mg／g比（2．30±0．40）和（2．25±0．36）mg／g，P均〈0．05]。（3）各组大鼠心肌细胞凋亡的检测结果：药物干预8周后，心衰组大鼠心肌细胞凋亡率明显高于假手术组[（32．8±3．9）％比（5．5±0．6）％，P=0．041]，Sa1组明显低于心衰组和DMSO组[（10．3±1．2）％比（32．8±3．9）％和（30．4±3．1）％，P分别为0．029和0．045]。（4）各组大鼠心肌组织中内质网应激相关蛋白表达的检测结果：药物干预8周后，心衰组大鼠心肌细胞中B型利钠肽（BNP）、钙网蛋白（CRT）、磷酸化eIF2α（p-eIF2α）和半胱氨酸蛋白酶12（easpase-12）的蛋白表达水平均明显高于假手术组（P均〈0．05），Sal组均明显低于心衰组和DMSO组（P均〈0．05）。（5）各组大鼠心肌组织中内质网应激相关蛋白mRNA表达水平的检测结果：药物干预8周后，心衰组大鼠心肌细胞中BNP、CRT和caspase-12的mRNA表达水平均明显高于假手术组（P均〈0．05），Sal组均明显低于心衰组和DMSO组（P均〈0．05）。结论Sal可通过抑制内质网应激反应介导的凋亡信号通路分子caspase-12的表达抑制心肌细胞凋亡，从而改善心衰大鼠的心功能。

“一带一路”视域下高等中医院校传播中医药文化的探究——以思想政治教育为载体

"一带一路"战略构想为高等院校参与国际合作提供了新平台,开启了与沿线各国、各地区大学的校际交流和人才培养的机遇之窗。高等中医药院校应深度参与"一带一路"战略,发挥自身的专业特色和优势,传播中医药文化,履行文化传承与创新的责任和使命。高等中医药院校的学生更应肩负"一带一路"建设使命,实施"走出去"战略,主动参与中医药研究,提高中医药领域自主创新能力,推动中医药事业的创新发展。高校思想政治工作者应注重对学生进行"一带一路"教育,引导学生以传播中医药文化为己任。文章运用SWOT分析法,研究"一带一路"视域下中医药院校传播中医药文化的优势、劣势,以思想政治教育为载体,旨在提高中医药院校传播中医药文化的针对性与实效性。

加强企业安全文化建设为燃气工程建设保驾护航

介绍了开展安全文化建设的必要性，企业安全文化建设的主要途径和企业安全文化建设应注意的几个问题。