鸭疫里氏杆菌LC1和CX1株的分离鉴定及致病性分析

旨在对福建莆田某养殖场疑似感染鸭传染性浆膜炎患病番鸭病料进行菌株的分离、纯化、鉴定和致病性分析。采集10日龄患病番鸭的脑、肝组织进行菌株分离纯化、16S rDNA PCR鉴定和血清型鉴定,并检测分离纯化菌株的致病性。结果得到2株11型鸭疫里氏杆菌,分别将其命名为LC1和CX1。对2株分离株进行16S rDNA序列测序,开展遗传进化分析和MLST分型,发现LC1和CX1分离株16S rDNA遗传进化上与鸭疫里氏杆菌福建分离株RAf115和上海分离株Yb2处在同一进化分支上,相似性为99.9%。测定其耐药性发现,分离株对β-内酰胺类、氯霉素类及四环素敏感,对大环内酯类和氨基糖苷类等抗菌素不敏感。进一步检测该分离株对雏番鸭致病性,结果发现两株菌株(1.3×10^(6)CFU·mL^(-1))的致死率为100%,且病死鸭表现典型心包炎、肝周炎、气囊炎和脾肿大的鸭疫里氏杆菌病。病理结果发现,致死鸭脾红白髓界线消失,呈现大量坏死灶。此外,两分离株致死鸭的心肌纤维呈撕裂状病变。综上,本研究分离并鉴定2株11型鸭疫里氏杆菌LC1和CX1,MLST分型分别为ST111、ST114,为鸭疫里氏杆菌病的防控及后续研究提供参考依据。

基底硬度与细胞因子TGF-β_1协同作用对肝细胞表型的影响

目的通过建立与肝组织生理和病理硬度相当的体外培养模型,探讨基底硬度和TGF-β1协同作用对肝细胞表型变化的影响。方法采用免疫荧光显微观测技术及Western Blotting等试验方法,研究肝细胞在不同硬度梯度的聚丙烯酰胺基底膜上的细胞形态调整、运动变化特征、骨架构象以及整合素、E-钙粘素、白蛋白和alpha-平滑肌动蛋白表达的差别,并通过图像分析软件对上述结果进行定量分析。结果 3.6 kPa基底膜上单个分散细胞运动变形活跃,但群体细胞极化变小,肌动蛋白沿皮质下呈环状排列,E-钙粘素和白蛋白表达高,整合素和alpha-平滑肌动蛋白的表达水平较低,加药组与对照组变化趋势一致;30 kPa基底膜上细胞运动变形欠活跃,加药组与对照组相比,E-钙粘素和白蛋白表达均下调,alpha-平滑肌动蛋白表达上调;30 kPa与3.6 kPa对照组相比、30 kPa与3.6 kPa加药组相比,E-钙粘素及白蛋白表达均下调(P<0.05),alpha-平滑肌肌动蛋白的表达上调(P<0.05)。10 kPa基底膜上对照组和加药组与30 kPa和3.6 kPa对照组和加药组相比,均无显著性差异。结论基底硬度增加可诱导肝细胞表型转化,并促进TGF-β1对肝细胞代谢行为的影响。

鸭疫里默氏杆菌PT-RA1的分离鉴定、遗传进化分析及致病性试验

【背景】鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)是一种主要引起以鸭的纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎为临床特征的传染病病原,其血清型众多,防治困难。【目的】了解莆田市鸭疫里默氏杆菌的遗传特征、耐药情况和致病力情况,为该菌的治疗和防控提供科学依据。【方法】对来自莆田某养殖场疑似感染鸭传染性浆膜炎15日龄患病番鸭的脑组织进行分离纯化、16S rRNA基因鉴定和血清型鉴定,对该分离株的16S rRNA基因序列进行测序及遗传进化分析,并进一步测定其耐药性和对雏番鸭的致病性。【结果】分离得到一株11型鸭疫里默氏杆菌,将其命名为PT-RA1。PT-RA1分离株16SrRNA基因遗传进化上与鸭疫里默氏杆菌参考株广州株GZ-RA12、北京株CZ-RA03和山东株SD-RA2018处在同一进化分支上,相似性为100%,提示鸭疫里默氏杆菌可能存在跨地区传播;分离株对链霉素、庆大霉素和卡那霉素等15种抗生素表现多重耐药,而对氨苄西林、阿莫西林、头孢唑林、头孢曲松、四环素、强力霉素、头孢克肟、头孢吡肟、氧氟沙星、氟苯尼考敏感;对该分离株进行雏番鸭致病性试验,死亡率80%,病死鸭出现纤维素性心包炎、肝周炎、气囊炎和脾脏肿大等典型的鸭疫里默氏杆菌病临床特征症状。【结论】分离并鉴定一株11型鸭疫里默氏杆菌PT-RA1,为鸭疫里默氏杆菌病的防控及后续研究提供参考依据。