蚯蚓粪对水稻生长及根际和非根际土壤养分的影响

[目的]通过把灭菌蚯蚓粪和未灭菌蚯蚓粪施入水田作基肥,探究蚯蚓粪中微生物对水稻产量的影响。[方法]把灭菌蚯蚓粪和未灭菌蚯蚓粪通过氮、磷含量换算替代30%化肥作为基肥,设置4个处理(灭菌蚯蚓粪30%替代化肥+70%化肥、未灭菌蚯蚓粪30%替代化肥+70%化肥、100%化肥、不施肥),分析灭菌蚯蚓粪替代30%化肥对水稻产量及根际、非根际土壤有机质、pH、有效磷、硝态氮和铵态氮的影响。[结果]施用未灭菌蚯蚓粪替代30%化肥处理的水稻秸秆产量最大为(87.99±2.21) kg/hm^(2);施用蚯蚓粪替代部分化肥整体上可以改良酸性土壤的pH,施用化肥会加强酸性土壤的酸性,根际土的pH略低于非根际土;施用蚯蚓粪可以提高土壤全氮、全磷、全钾含量,其中根际土养分含量高于非根际土;蚯蚓粪+70%化肥增加有机质最多,根际土有机质含量比非根际土有机质含量多。[结论]施用蚯蚓粪替代30%可以提高水稻产量,提高根际土和非根际土的全氮、全磷、全钾含量,改善土壤pH,提高土壤有机质含量,蚯蚓粪中的微生物对水稻生长和产量具有促进作用。

乙草胺对玉米根际和非根际可培养微生物的影响

为探明土壤-植物系统中,田间施用量的乙草胺对玉米根际和非根际微生物数量的影响,采用田间试验及室内测试方法,在玉米苗期不同阶段测定了土壤中微生物量碳的变化,并进一步用平板稀释培养法研究了玉米根际和非根际土壤中细菌和真菌数量的变化。结果表明,乙草胺施用对玉米根际和非根际的土壤微生物群落均具有一定影响。可培养的根际细菌和真菌均呈现先抑制后刺激的变化,但与真菌不同,细菌受到的抑制作用时间较短,刺激作用时间较长;而本体土壤中可培养细菌和真菌则主要受到抑制作用,但是抑制作用的强度和持续时间差别很大。乙草胺对根际土壤微生物量碳可产生一定刺激作用,但影响并不显著;由于乙草胺施用对非根际土壤细菌和真菌的影响不同步并存在群落结构的补偿作用,从而维持了非根际土壤总体微生物生物量碳的基本稳定。

有机替代化肥对作物生长及土壤养分的影响

为明确化肥减量配施有机肥对水稻产量品质和土壤肥力的影响,进行了田间试验,设置不施肥对照(CK)、常规化肥(CF)、测土配方施肥(CT)、有机肥替代15%N肥(有机+85N%)、有机肥替代30%N肥(有机+70N%)等5个处理,选取粤西地区水稻主栽品种进行田间肥效试验。田间肥效试验结果表明,化肥减量30%N配施有机肥有利于作物提质增产、土壤改土增效,可为水稻施肥提供数据参考。

日本血吸虫不同方式感染宿主的免疫病理研究

目的建立等量血吸虫尾蚴单次感染和多次感染的动物模型,比较这两种不同感染方式对家兔肝脏的损害程度。方法制作肝脏病理切片,测量单个虫卵肉芽肿的体积;放免法检测家兔血清中透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN);RT-PCR-ELISA半定量测定肝组织中的TGF-β1mRNA。结果单次感染组家兔急性期肉芽肿反应最明显,慢性期和晚期肉芽肿体积逐渐缩小,而多次感染组肉芽肿缩小不明显;血清中HA和LN、肝组织中的TGF-β1mRNA量,在感染各组均高于正常对照,但多次感染组升高更明显。结论等量的尾蚴,多次感染比单次感染的危害引起的肝纤维化更为严重。

间质干细胞培养上清对日本血吸虫SEA诱导活化的巨噬细胞株RAW264.7的抑制作用

目的观察大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)培养上清对日本血吸虫可溶性虫卵抗原(soluble egg antigen,SEA)诱导活化的巨噬细胞的抑制作用。方法用5、10、20和40μg/ml SEA分别诱导巨噬细胞株RAW264.7 12 h,或用20μg/ml SEA分别诱导小鼠巨噬细胞株(RAW264.7)4、8、12和24 h后,用实时荧光定量PCR检测α肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA水平,选择SEA的最佳作用浓度和作用时间。将巨噬细胞分成5组,分别为阴性对照组、SEA组、SEA+MSC上清组(MSC组)、SEA+大鼠肾小管上皮细胞株(NRK-52E)上清组(NRK-52E组)和SEA+DMEM细胞培养基组(DMEM组)。除阴性对照组外,其他各组给予20μg/ml SEA诱导巨噬细胞活化12 h后,MSC组、NRK-52E组和DMEM组换液撤SEA,分别给予MSC培养上清、NRK-52E细胞培养上清和DMEM培养液,继续培养。显微镜观察细胞上清培养12 h后各组细胞形态。实时荧光定量PCR检测细胞上清培养12 h和24 h后TNF-αmRNA水平。蛋白质印迹(Western blotting)分析检测细胞上清培养12 h后转化生长因子β1(TGF-β1)的蛋白表达水平。噻唑蓝比色法(MTT法)测定细胞上清培养24 h和48 h后巨噬细胞增殖情况。结果 SEA活化巨噬细胞的最佳浓度和时间分别为20μg/ml和12 h。镜下观察显示,MSC上清培养12 h后,MSC组与SEA组、NRK-52E组和DMEM组相比,细胞变圆,体积明显较小,伪足较少。MSC上清作用12 h和24 h后,MSC组TNF-αmRNA水平分别为阴性对照组的(1.0±0.4)和(1.0±0.5)倍,显著低于NRK-52E组[分别为(10.4±3.9)和(16.5±5.0)倍(12 h:P<0.05;24 h:P<0.01)]和DMEM组[分别为(6.0±2.1)和(2.4±0.7)倍(均P<0.05)]。MSC上清作用12 h后,MSC组蛋白TGF-β1/GAPDH为0.31±0.10,显著低于NRK-52E组(0.88±0.10,P<0.01)和DMEM组(0.58±0.06,P<0.05)。MSC上清作用48 h后,MSC组吸光度(A490值)为0.22±0.05,与NRK-52E组(0.53±0.02)和DMEM组(0.31±0.03)比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 MSC培养上清能抑制SEA诱导的巨噬细胞株RAW264.7活化。

日本血吸虫多次感染宿主对治疗的反应性研究

[目的]建立等量血吸虫尾蚴单次感染和多次感染的动物模型,在感染的急性期、慢性期和晚期用吡喹酮治疗,比较这两种感染方式对治疗的反应性。[方法]测量单个虫卵肉芽肿的体积;放免法检测血清中透明质酸(HA);RT-PCR-ELISA半定量测定肝组织中的TGF-β1mRNA,比较两种感染方式治疗组和非治疗组以及治疗组间的差异。[结果]单次感染在急性期经吡喹酮治疗,肉芽肿及纤维化程度显著降低;而多次感染组经吡喹酮治疗后,肉芽肿及纤维化程度无明显改善。[结论]等量的尾蚴,单次感染的治疗效果明显优于多次感染;急性期的治疗效果显著优于慢性期和晚期。

《土壤肥料学》理论和实践教学中存在的主要问题及改革思考

《土壤肥料学》是农学及相关专业的一门重要专业基础课。笔者根据多年的教学经验,剖析了《土壤肥料学》理论及实践教学中存在的诸多问题,并针对问题提出了相应的改革措施,以期更好的指导教学实践,提高教学效果。

SPA-ELISA检测弓形虫感染者血清特异性抗体和循环抗原研究

目的 :检测弓形虫感染者血清中特异性抗和循环抗原 (CAg)。方法 :应用SPA ELISA检测血清标本 ,结果 :SPA ELISA检测特异性抗体和CAg的敏感性和特异性与常规ELISA相似 (P >0 .0 5 ) ,结论

对行气管切开术的喉癌患者进行综合护理的效果分析

目的 :探讨对行气管切开术的喉癌患者进行综合护理的临床效果。方法 :对2014年10月~2015年11月期间在我院接受气管切开术治疗的52例喉癌患者的临床资料进行回顾性研究。我院按照随机数表法将这些患者分为对照组和观察组,每组各有26例患者。我院对对照组患者进行常规护理,对观察组患者在进行常规护理的基础上进行综合护理,然后比较对两组患者进行护理的效果。结果 :两组患者在接受护理后,观察组患者的重度粘痰、刺激性咳嗽以及肺部感染的发生率均明显低于对照组患者,差异显著(P<0.05),具有统计学意义。观察组患者进行鼻饲的时间与住院的时间均明显短于对照组患者,差异显著(P<0.05),具有统计学意义。结论 :对行气管切开术的喉癌患者进行综合护理的临床效果显著,可有效地降低患者术后并发症的发生率,并缩短其住院的时间。此法值得在临床上推广应用。

日本血吸虫不同感染方式对肝脏病理损害程度的影响

目的 :研究血吸虫单次感染和多次感染两种方式对宿主肝纤维化的影响。方法 :分别应用单次感染 (一次性感染尾蚴 30 0条 )和多次感染 (每次感染尾蚴 10 0条 ,共感染 3次 )两种方式 ,建立血吸虫病动物模型 ;分别于急性期、慢性期和晚期取部分家兔的肝脏组织作连续病理切片 ,测定单个虫卵肉芽肿的平均大小 ,同时检测相应时期血清中的透明质酸 (HA)和层粘连蛋白 (LN)的水平。结果 :在急性期 ,两种感染方式所形成的虫卵肉芽肿大选及血清中透明质酸和层粘连蛋白水平没有差异 (P >0 0 5 ) ;而在慢性期和晚期 ,单次感染和等量多次感染所形成的虫卵肉芽肿大小及血清中透明质酸水平有显著性差异 (P <0 0 1) ,层粘连蛋白的含量在感染的晚期有差异 (P <0 0 5 )。结论 :在感染尾蚴总量相同的情况下 ,多次感染对肝脏的损害明显比单次感染严重 ,而且更容易诱发肝纤维化。

运用多媒体课件增强医学寄生虫学教学感知

教学手段与教学方法日新月异,其目的都是为了更好的提高教学效果。与传统的教学模式和教学方法比较,从理论教学和实验教学两个方面探讨多媒体在寄生虫学教学中的运用。

银杏酸、阿奇霉素和大蒜素抗弓形虫增殖效果研究

目的评价银杏酸、阿奇霉素和大蒜素体外和体内抗弓形虫增殖的效果。方法体外试验,培养HFF细胞做为弓形虫宿主细胞,采用MTT法检测3种药物的安全浓度和体外抗弓形虫增殖的效果。体内试验,以腹腔注射的方式给药,观察感染弓形虫小鼠的存活时间,比较3种药物的体内抗弓形虫增殖效果。结果银杏酸和阿奇霉素可显著抑制细胞内弓形虫的增殖,两者效果相近。银杏酸和阿奇霉素均可延长小鼠存活时间。大蒜素抗弓形虫效果微弱。结论银杏酸具有抗弓形虫作用。

基于风险等级的重金属污染耕地土壤修复技术集成体系研究

重金属单项控制技术在我国农田土壤修复中已有很多应用,但是面对复杂的土壤污染现状,缺乏基于不同风险等级的控制技术和治理体系,难以应对污染日益严重的不利局面,因此需要将各种单项修复技术进行合理的集成,形成污染耕地修复处理技术的筛选与集成方法体系。本研究基于适用于农田土壤修复的单项技术,包括植物修复技术、农艺修复技术、间套种技术、土壤淋洗技术和土壤钝化技术等,归纳和总结出不同类型技术的技术特性,形成土壤单项修复技术知识库,根据土壤污染风险等级、土壤理化性质、技术特性和人为因素等提出一种适宜的土壤修复技术筛选与集成的方法,为我国农田土壤修复/安全利用和可持续利用管理提供技术支撑。

绦虫永久染色标本的制作技术

目的制作绦虫玻片染色标本用于教学和科研。方法用墨汁染色法制作绦虫妊娠节片玻片标本,卡红染色法制作绦虫成熟节片、头节和囊尾蚴玻片标本。结果妊娠节片、成熟节片、头节和囊尾蚴经染色制片后特征结构明显可见。如妊娠节片染色标本清晰可见染成墨汁颜色的子宫主干和分支状的子宫侧支,节片一侧边缘中部可见突出的生殖腔;成熟节片染色标本均染成红色,内有着色更深的雌雄生殖系统各一套。结论墨汁染色和卡红染色制作带绦虫染色标本效果好,可永久保存。

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型的比较研究

目的 比较用SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)模型的差异。 方法 选用SD大鼠和Wistar大鼠 ,随机分为实验组和对照组 ,免疫抑制诱导建立动物模型 ;收集肺组织和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,分别制成肺印片和BALF涂片 ,作Giemsa染色 ,镜检卡氏肺孢子虫滋养体和包囊。结果 共收集实验组SD大鼠和Wistar大鼠的肺组织及BALF标本各 2 8份 ,经Giemsa染色后 ,在肺印片中查见Pneumocystiscarinii(Pc)虫体的阳性率分别为 89.2 9%和10 0 % ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;BALF阳性率分别为 6 0 .71%和 78.5 7% ,两者之间亦无显著性差异 (P >0 .0 5 )。而同种大鼠的肺印片与BALF涂片 ,其阳性率之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,且肺印片的检出率均显著高于BALF涂片。同种大鼠不同肺叶的肺印片 ,其阳性率之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。

PCR检测大鼠卡氏肺孢子虫的研究

目的探讨PCR技术检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值。方法SD大鼠和Wistar大鼠均随机分成实验组和对照组,实验组每周两次皮下注射醋酸可的松,诱导产生卡氏肺孢子虫;8week后,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),用PCR技术检测卡氏肺孢子虫DNA,并与Giemsa染色法比较。结果实验组两种大鼠肺组织卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为9643%和100%,BALF阳性率亦分别为9643%和100%,它们之间均无显著性差异(P>005);BALF的PCR阳性检出率显著高于Giemsa病原染色法,肺组织的两种方法检出率无显著性差异。结论PCR是一种检出率较高的方法,可作为早期诊断PCP的常规方法,特别适用于BALF检测卡氏肺孢子虫DNA。

日本血吸虫成虫和虫卵可溶性抗原及其组分抗原的研究

目的:探讨日本血吸虫雄虫、雌虫、虫卵的可溶性抗原雄虫(AWA-m、雌虫AWA-f、虫卵SEA)及其组分抗原的特性。方法:用DE22纤维素层析柱对日本血吸虫AWA-m,AWA-f,SEA抗原进行纯化,得到相应组分抗原。分别以SDS-PAGE和W estern b lot对组分抗原进行全面分析,并与相应未经纯化的可溶性抗原作比较。结果:经DE22纤维素层析处理的AWA-m,AWA-f,SEA,均能获得含多种蛋白的组分抗原。SDS-PAGE结果表明,AWA-m见10条主带和9条次带,其中Mr37 000,28 000,25 000为特异性条带,出现8条免疫反应阳性带;而AWA-m组分抗原为9条蛋白带和6条免疫反应阳性带。AWA-f见15条蛋白带,其中Mr26 500为特异性条带,组分抗原为8条蛋白带。AWA-f粗抗原及其组分抗原均见9条反应带。SEA见8条主带和10条次带,13条为免疫反应阳性条带;SEA组分抗原见11条带,其中9条为免疫反应阳性带。结论:AWA-m,AWA-f,SEA经DE22纤维素层析纯化获得组分抗原,方法简单、可靠。该组分抗原含有粗抗原的主要免疫反应成分,去除了多种与日本血吸虫病免疫反应无关的蛋白。

PCR-ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA的研究

目的 建立卡氏肺孢子虫 (P .c )DNA的聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 (PCR ELISA)方法 ,并探讨其应用价值。 方法 实验组患卡氏肺孢子虫肺炎的SD大鼠和Wistar大鼠各 2 8只 ,采用PCR法扩增大鼠肺组织DNA和支气管肺泡灌洗液 (BALF)DNA ,用PCR ELISA检测其扩增产物。 2 8只患病大鼠分别制作肺组织印片及BALF涂片 ,姬姆萨 (Giemsa)染色镜检 10 0个视野中有无P .c包囊 (或滋养体 ) ,与PCR ELISA检测扩增产物结果比较。 结果 两种方法检测大鼠肺组织DNA阳性率及BALFDNA阳性率 ,结果相同 ,均分别为 96 4% (2 7/2 8)和10 0 % (2 8/2 8)。Giemsa染色镜检P .c包囊 (或滋养体 ) ,结果为阳性的大鼠 ,PCR ELISA检测扩增产物结果也均为阳性。阴性对照组 ,两种大鼠的肺组织和BALF各 10份标本 ,均有 1只大鼠阳性。 结论 PCR ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA ,敏感性较高 ,特异性较好 ,操作简便 ,具有实用价值。