高效液相色谱在生物医药研究中的应用——第六讲 高效液相色谱分离光学异物体(下)

2.手性流动相法 手性流动相法亦称乒性添加剂法。优点是拆分化合物不需以手性试剂衍生,也不需要价格昂贵的CSP,而是将手性试剂加到流动相中,使用常规的正相或反相柱分离,由于方法简便,引起广泛的注意。作用原理有两种可能:(1)溶质在流动相中与手性试剂形成非对映络合物。

血清中美西律的柱前衍生化-液相色谱荧光检测

目的 建立血清中盐酸美西律的柱前衍生化 液相色谱荧光检测法。方法 血清样品用丙酮液直接沉淀蛋白后 ,定量加入荧光胺丙酮溶液 ,得盐酸美西律的荧光衍生物。采用AlltimaC1 8(15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为分析柱 ;流动相为甲醇 水 2 4mol·L- 1 二乙胺 磷酸缓冲液 (pH 4 0 ) (70∶2 8∶2 ) ;荧光检测激发波长 (Ex)为 392nm ,发射波长(Em)为 4 80nm。盐酸美西律的保留时间为 6 5min。结果 盐酸美西律在 0 10 0～ 6 4 0 0mg·L- 1 线性关系良好。本法的最低检测质量浓度为 5 μg·L- 1 ,(S N≥ 4 )。批内、批间精密度为 1 34%～ 5 31%。结论 本法操作简便、有良好的灵敏度和专一性 。

一种高灵敏度的小檗碱高效液相色谱分析方法

根据在卤代烃类溶剂中的小檗碱在紫外线的激发下可产生强烈的荧光这一特性，采用正相色谱－荧光检测的方法建立了小檗碱的高灵敏度检测方法。色谱柱为ＬｉｃｈｒｏｓｏｒｂＳＩ６０（５μ）２０ｃｍ×４．０ｍｍｉ．ｄ．。流动相为二氯甲烷－甲醇－二乙胺－冰醋酸（９０：９：０．４：０．５）。荧光检测波长Ｅｘ＝３６５ｎｍ，Ｅｍ＝５１０ｎｍ。方法的检测限为０．２ｎｇ（Ｓ／Ｎ≥２．５），在０．２ｎｇ～２０ｎｇ范围内具有良好的线性关系。

高效液相色谱－电化学检测法测定尿液中的多胺

在已报道的高效液相色谱－电化学检测多胺方法研究的基础上，又进一步探讨了该方法用于尿样本测定的各种条件，并测定了健康志愿者及肿瘤患者尿液中的多胺。结果显示肿瘤患者未水解及水解尿液中的腐胺、尸胺的平均值高于健康志愿者。

高效液相色谱手性固定相的研究Ⅲ.L-氨基酸-叔丁酰胺型固定相的制备及α-氨基酸衍生物和α-氨基-烃基膦酸酯对映体的拆分

在第Ⅱ报中(1)报告了L-缬氨酸-酰胺型固定相的氨基取代基的立体效应(E_s)和疏水参数(π)对分离因子的影响,发现了一些规律性的关系,其中以叔丁基的效果最佳。

甜菜苗期根系生育动态观察

甜菜苗期根系发育速度很快，到幼苗８片真叶展开时，主根已深达土层７５ｃｍ，侧根伸展３６ｃｍ以上，表面积达４０４ｃｍ２；７４．７％的根量集中在１０～３０ｃｍ土层中为主要的吸收层；苗期根、叶生长表现出明显的相关性；Ｐ、Ｎ对根、叶的作用因叶龄而异。甜菜苗期形成庞大的根系，是获得甜菜高产高糖的基础。

治疗全身性真菌感染药物的研究进展

介绍了近年来正在发展的9种抗真菌剂在化学、药理学等方面的研究进展情况,其中以1,2,4-三唑类抗菌剂发展得最为迅速。寡肽类抗菌剂以其毒性低的特点引起人们的注意。

MPTP对DA、GSH和LPO浓度的影响及Deprenyl的干预

运用高效液相色谱－电化学（ＨＰＬＣ－ＥＣ）法、二硫双硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）比色法和硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）反应法分别检测多巴胺（ＤＡ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）和丙二醛（ＭＤＡ）含量，研究神经毒素甲基－苯基－四氢吡啶（ＭＰＴＰ）对这些物质含量的影响，以及单胺氧化酶Ｂ抑制剂ｄｅｐｒｅｎｙｌ对ＭＰＴＰ的干预作用。结果表明，ＭＰＴＰ具有显著降低ＤＡ、ＧＳＨ含量，以及增加ＭＤＡ含量的作用，ｄｅｐｒｅｎｙｌ可完全抑制ＭＰＴＰ的上述作用。

含L-4-氧代赖氨酸和N^(3)-(4-甲氧基富马酰)-L-2,3-二氨基丙酸寡肽类似物的合成及其抗白念珠菌活性

运用“违法传递”概念，根据白念珠菌对寡肽的传送特点，设计并合成了８个含Ｌ４氧代赖氨酸（以下称Ｉ６７７）和Ｎ３（４甲氧基富马酰）Ｌ２，３二氨基丙酸（以下称ＦＭＤＰ）的寡肽类似物，均系新化合物。体外抗白念珠菌试验表明：Ｉ６７７ＦＭＤＰ肽（Ｉ６７７ＦＭＤＰ，Ｉ６７７ＡＡＦＭＤＰ，其中ＡＡ＝Ｎｖａ，Ｖａｌ，Ｌｅｕ，Ｐｈｅ，Ｐｒｏ，Ｄ，ＬｐＣｌＰｈｅ，ＤＰｇｌｙ）是Ｉ６７７单体摩尔活性的４０～７７０倍，是ＦＭＤＰ的６０～１１３０倍，其摩尔最低抑菌浓度为６５６×１０－９～３５×１０－１０ｍｏｌ·ｄｉｓｋ－１。羧肽酶Ａ存在时化合物Ｉ６７７ＦＭＤＰ体外抗菌试验表明，含ＦＭＤＰ的化合物Ｉ６７７ＦＭＤＰ能抵抗羧肽酶Ａ的酶解。

N-丁二酰羟亚胺基山梨酸酯的制备

Ｎ┐丁二酰羟亚胺基山梨酸酯的制备ＰＲＥＰＡＲＡＴＩＯＮＯＦＮ┐ＳＵＣＣＩＮＩＭＩＤＯＹＬＳＯＲＢＡＴＥ冯胜昔＊徐修容ａ（广州白云山制药股份有限公司合成药物研究所，广州５１０５１５；ａ中国科学院上海药物研究所，上海２０００３１）ＦＥＮＧＳｈｅｎｇ－Ｘｉ...

高效液相色谱测定经PT-系列氧化铝小柱预处理后狗血清中儿茶酚胺

氧化铝吸附法提取生物样本中的儿茶酚胺已被广泛地应用,但在操作上需反复洗涤、离心,比较麻烦,本文探讨了用国产PT-系列酸性氧化铝小柱进行预处理的条件,用内标法测定了肺动脉高压情况下的狗血清中去甲肾上腺素(NE)和肾上腺素(E)含量的变化,得到较为满意的结果。

3-甲基芬太尼衍生物构效关系及受体结合特征研究

对3-甲基芬太尼的1-苯乙基、4-N-丙酰基进行了结构改造、测定了所合成化合物的镇痛活性及部分化合物的镇痛作用持续时间、阿片受体亲和力和对阿片受体亚型的选择性。结果表明,大部分化合物均有较强的吗啡样镇痛活性,强度约为吗啡的2～180倍。所试化合物的镇痛作用持续时间比芬太尼延长6～10倍。化合物1～4的受体亲和力(IC_(50))约为10^(-7)～10^(-3)mol。化合物13对阿片μ-受体有较高的选择性,对大鼠脑膜的λ/δ比值大于700,对小鼠脑膜的μ/δ比值为1000。

高效液相色谱-电化学检测多胺的研究

多胺(polyamine)是指生物体内广泛存在的带有两个或两个以上氨基的脂肪胺的总称。主要有精脒(spermidine,SPD)腐胺(putrescine,PUT),精胺(spermine,SPM),和尸胺(cadaverine,CAD)。多胺在核酸,蛋白质代谢及细胞繁殖分化中起调节和控制作用,为人体生长,细胞代谢所必需。1971年Russell首先报道了癌症病人尿中多胺浓度增加。

高效液相色谱手性固定相的研究V——二肽叔丁酰胺型手性固定相拆分α-氨基酸、二茂铁基氨基酸及二肽衍生物对映异构体

本文应用高效液相色谱(L,L)-二肽叔丁酰胺型键合硅胶手性固定相拆分N-乙酰基-α-氨基酸甲酯、N-乙酰基-β-二茂铁基丙氨酸乙酯及N-叔丁氧羰基亮氨酰亮氨酸甲酯等对映异构体、结果表明:部分固定相对氨基酸衍生物对映异构体有拆分效果;大部分固定相对二茂铁基丙氨酸衍生物对映异构体有较好拆分效果;所有固定相对由(D,D)-及(L,L)-亮氨酰亮氨酸衍生物构成的外消旋体均有良好的拆分效果,分离系数最高达1.79。本文对部分化合物对映异构体的拆分机制进行了初步探讨。

高效液相色谱手性固定相的研究 Ⅳ.(L,L)-二肽叔丁酰胺型手性固定相拆分α-氨基烃基膦酸衍生物对映异构体

本文制备了十种新型(L,L)-二肽叔丁酰胺型键合硅胶手性固定相,并将其用于高效液相色谱拆分外消旋α-氨基烃基膦酸衍生物。实验结果表明拆分效果良好。本文就固定相及α-氨基烃基膦酸衍生物的结构对拆分效果的影响进行了讨论,并对拆分机制进行了初步探讨。

健康人口服盐酸黄连素片剂后的尿药分析与药物代谢初步研究

本文以１３一甲基小檗碱为内标，用正相高效液相色谱一荧光检测的方法定量分析尿液中的小檗碱。考察了健康人一次口服０．２ｇ盐酸黄连素糖衣片后９６ｈ内小檗碱尿药排泄量变化，按矩量法求得其体内药物平均滞留时间（ＭＲＴ）为３２．６３ ±６． １５ ｈ，累积尿药排泄量为 ２７．４９ ± ４．７４ ｕ ｇ；首次检测到小檗碱在人体内有四个未知的代谢峰。

以DL-樟脑-10-磺酸为离子对试剂反相高效液相色谱测定血浆中小檗碱的含量

小檗碱(Berberine)属季铵型异喹啉类生物碱。系黄连、黄柏、三颗针等中草药的主要有效成分,具有抗菌消炎作用。近年来发现小檗碱具有抗心律失常和正性肌力等心血管药理作用。生物样品中小檗碱的测定方法有纸色谱法,纸色谱-分光光度法,同位素标记法,气相色谱-质谱法。DL-樟脑-10-磺酸(CSA)是一种手性离子对试剂,曾用于生物胺的测定取得了良好的结果。我们用CSA作离子对试剂,建立了血浆中小檗碱的反相离子对色谱测定方法,并对GSA的色谱行为及方法的优化作了探讨。

高效液相色谱法测定抗真菌化合物在小鼠血清中的降解水平

以反相高效液相色谱法测定了抗深部真菌化合物L-4-氧代赖氨酸-正缬氨酰-N3-4-甲氧基-富马酰-L-2，3-二氨基丙酸在小鼠血清中的降解水平，其半衰期t1／2为70min左右。并进行了乙睛、甲醇、三氯乙酸及高氯酸等试剂对血清去蛋白的试验。

高效液相色谱分离氨基酸和胺的非对映异构体

本文报道了使用三种不同类型十八烷基键合填充荆分离氨基酸及胺的非对映异构体,实验结果表明,我所自制的微粒型GYT-C_(18)填充剂分离效果较好,所试验的七种化合物中有六种达到基线分离。并发现化合物的构型同出峰的次序之间无规律性关系。

高效液相色谱法测定非天然氨基酸的光学纯度

以(1氟2,4二硝基苯基)5L缬氨酰胺为手性试剂、反相高效液相色谱法测定非天然氨基酸的光学纯度。梯度洗脱,流动相A:含体积分数为0.1%的三氟乙酸的乙腈,流动相B:体积分数为0.1%的三氟乙酸水溶液。L和D对映体得到良好分离。准确测定了25种非天然氨基酸L和D对映体的光学纯度。