多巴胺预处理根管内壁对AH-plus糊剂粘接效果的影响

目的探讨用多巴胺预处理根管内壁对提高AH-plus糊剂与根管牙本质壁的粘接性能的效果。方法收集新鲜无龋坏、牙根无折裂、根管弯曲度<10°的单根管离体恒牙32颗,均使用旋转镍钛器械ProTaper预备至F2,分别使用1、2、3 mg/mL多巴胺溶液预处理根管24 h并分为4组(n=8):0 mg/mL多巴胺组(空白对照组)、1 mg/mL多巴胺组、2 mg/mL多巴胺组、3 mg/mL多巴胺组。用扫描电镜观察多巴胺与根管牙本质壁的结合状况;激光共聚焦扫描显微镜观察AH-plus糊剂渗透情况;以AH-plus糊剂与牙胶尖用冷牙胶侧方加压技术进行根管充填,在根中1/3及根尖1/3处切割根管,切片厚度1~2 mm,在万能试验机下进行根充物推出试验,比较各组间推出粘接强度。结果通过扫描电镜可以观察到对照组0 mg/mL多巴胺溶液处理24 h后,牙本质小管大部分呈现开放状态;1 mg/mL组,根管内壁牙本质小管表面有少量多巴胺颗粒分布疏松不均匀;2mg/mL组,可观察到大部分牙本质小管被多巴胺颗粒覆盖,且多巴胺层均匀致密;3 mg/mL组,牙本质小管管口沉积大量多巴胺颗粒,但不均匀分布。通过激光共聚焦扫描显微镜下可观察到多巴胺和AH-plus糊剂可以同时渗入牙本质小管。解剖部位与多巴胺浓度两因素交互作用对AH-plus糊剂粘接强度无显著差异(P>0.05);根管经2 mg/mL多巴胺处理后,与AH-plus糊剂粘接强度最高(P<0.05);分析不同解剖部位的糊剂粘接强度结果有显著差异(P<0.05);AH-plus糊剂粘接强度在根中1/3高于根尖1/3。结论不同多巴胺浓度处理根管内壁对AH-plus糊剂粘接效果有影响,2 mg/mL多巴胺溶液处理24 h后,AH-plus糊剂与根管内牙本质壁粘接效果较好。

脐静脉内皮细胞外泌体和内皮祖细胞外泌体对hDPSCs增殖及迁移能力的比较研究

目的将人脐静脉内皮细胞外泌体(human umbilical vein endothelial cells-derived exosome,HUVECs-exo)和内皮祖细胞外泌体(endothelial progenitor cells-derived exosome,EPCs-exo)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖和迁移能力的影响进行比较研究,以期为外泌体在牙髓再生中的应用积累经验。方法采用超速离心法分离提取外泌体,透射电镜观察外泌体形态,纳米粒子跟踪分析技术(nanoparticle tracking analysis,NTA)检测外泌体粒径大小,Western blot蛋白印迹检测外泌体标志蛋白CD9、CD63、TSG101的表达。将两种外泌体按照5、10、20μg/mL浓度梯度分别作用于hDPSCs,通过CCK-8实验检测hDPSCs增殖能力,细胞划痕实验和Transwell实验检测hDPSCs迁移能力。结果透射电镜下观察两种外泌体均呈圆盘状,粒径集中在30~150 nm,阳性表达CD9、CD63、TSG101三种标志蛋白。与对照组(Control组)相比,两种外泌体在不同浓度下均对hDPSCs增殖能力无显著促进作用,差异无统计学意义(P>0.05)。细胞划痕实验和Transwell实验表明,与对照组相比,两种外泌体均可促进hDPSCs迁移,差异有统计学意义(P<0.05),其中10μg/mL外泌体浓度作用效果最明显(P<0.01)。相同浓度的两种外泌体组间作用效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验成功分离提取到两种细胞来源的外泌体并进行鉴定,将不同浓度的两种细胞来源的外泌体作用于hDPSCs,发现对其增殖能力无明显促进作用,但可以促进其迁移,尤以10μg/mL外泌体浓度促进迁移效果最为明显。