肝炎患者中TT病毒DNA及其IgG抗体的检测

目的 了解肝炎患者中 TTV的感染情况。方法 应用 Nested- PCR对 137份甲～庚型肝炎、31份非甲～庚型肝炎及 10 4份献血员进行 TTV DNA检测 ,同时用 EL ISA法检测抗 TTVIg G。结果 TTV基因检出率分别为甲～庚型肝炎 2 0 .4 4 %、非甲～庚型肝炎 2 9.0 3% ,献血员 13.4 6 % ;抗 TTV Ig G检出率分别为甲～庚型肝炎 2 7.74 %、非甲～庚型肝炎 35 .4 8% ,献血员 14 .4 2 % ;甲～庚型肝炎、非甲～庚型肝炎与献血组相比 TTV DNA及抗 TTV Ig G均存在显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论 肝病中存在 TTV感染 ,TTV存在健康携带状态。

重组人绒毛膜促性腺激素-β亚基的纯化及生物活性测定

目的构建人绒毛膜促性腺激素(HCGβ)原核表达载体PG5-HCGβ,使HCGβ在大肠杆菌中获得高效表达。建立一条简单、快速、高效的纯化复性路线,获得具有生物活性的高纯度rHCGβ。方法以本室克隆的PCRII/HCGβ为模板,构建PG5-HCGβ,转化大肠杆菌BL21表达HCGβ。表达蛋白顺次用凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化。结果酶切及序列结果显示,PG5-HCGβ构建正确,HCGβ表达约占菌体总蛋白的20%。经过凝胶过滤和离子交换层析两步分离纯化,获得rHCGβ纯度达95%以上。复性的rHCGβ具有促进小鼠子宫生长的生物学活性。结论构建的PG5-HCGβ表达载体在大肠杆菌中获得高效表达,纯化复性的rHCGβ蛋白具有较高的生物学活性,为今后的rHCGβ生产打下了良好的基础。

严重创伤后肠黏膜屏障损伤及生长激素治疗作用的临床研究

近年随着研究的深入，人们已经认识到严重创伤引起的全身应激反应与肠黏膜屏障破坏可引起肠道细菌移位和发生内毒素血症，失控性炎症反应可进一步诱发脓毒症和多器官功能障碍综合征，导致患者不良转归。动物实验已证实，生长激素能改善肠道缺血／再灌注（I／R）损伤，降低由肠道菌群移位引起的肠源性感染发生率。本研究将重组人生长激素（rhGH）用于治疗严重创伤，

酶联免疫法分析糖尿病患者血清人巨细胞病毒抗体水平

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与糖尿病的关系。方法利用酶联免疫法(捕获酶联法和间接酶联法)检测727例糖尿病(85例1型糖尿病,642例2型糖尿病)患者及230例健康体检者(正常对照组)血清HCMV-IgM、IgG、IgA水平,并比较不同性别、年龄、病程的糖尿病患者HCMV-IgM、IgA、IgG的阳性率。结果1型糖尿病患者HCMV-IgM、IgA及IgG阳性率分别为10.59%、11.76%、92.94%及2型糖尿病患者HCMV-IgM、IgA及IgG阳性率分别为11.21%、11.68%、92.83%与正常对照组分别为0.87%、1.30%、77.39%比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。年龄<30岁及病程<1年的糖尿病患者,血清HCMV-IgG阳性率与其他年龄组、病程组的患者比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HCMV感染在糖尿病进展中起着重要作用,年龄小或病程短的糖尿病患者既往感染者少。

检验不合格标本的原因分析及改进措施

目的总结检验分析前不合格标本产生的原因,对不合格标本产生的原因进行分析并提出改进措施,提高分析前质量水平。方法对2007年度不合格标本进行分析统计,针对不合格标本产生的原因制定相应的措施后对2008年度不合格标本再进行统计。结果2007年度总的标本数量85579例,不合格1374例,占1.61%,改进措施后,2008年度总的标本数量100038例,不合格标本623例,占0.62%,改进措施后不合格标本率显著低于改进措施前,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论通过一系列改进措施,不合格标本率明显减少,提高了分析前质量控制水平。

糖尿病患者外周血白细胞HCMV pp65基因表达状态研究

目的建立检测人巨细胞病毒(HCMV)感染的聚合酶链反应/逆转录—聚合酶链反应(PCR/RT-PCR)方法,并探讨糖尿病与HCMV感染的关系。方法在HCMV 65 kD低基质磷蛋白基因(pp65)内设计一对引物,建立PCR/RT-PCR法检测727例糖尿病患者及230名健康体检人员(对照组)外周血白细胞HCMV pp65 DNA及其mRNA转录水平,同时应用间接免疫荧光法分析外周血白细胞HCMV PP65抗原。结果糖尿病患者HCMVpp65 DNA,mRNA及PP65抗原阳性率分别为36.04%,16.64%和10.04%,与对照组4.78%,2.17%及1.30%相比,差异均有显著性(P<0.01)。发病年龄<30岁患者组中HCMV pp65 mRNA和PP65抗原阳性率明显高于其他年龄组(P<0.05)。病程<1年的糖尿病患者HCMV pp65 mRNA和PP65抗原阳性检出率最高,分别为27.54%与15.94%;而HCMV pp65 DNA则相反,其最高检出率分别是年龄≥60岁(42.19%)或病程≥15年患者(44.68%)。结论糖尿病患者易发生活动性HCMV感染,外周血白细胞pp65 DNA,mRNA及PP65抗原检测是临床快速诊断HCMV感染的有效手段,联合使用能更有效地提高诊断水平。

类风湿关节炎与骨质疏松的相关性研究

目的探讨类风湿关节炎(RA)病情活动性与骨质疏松(OP)的相关性。方法采用双能X线骨密度仪测定217例RA患者和145例正常对照组股骨和腰椎部位骨密度(BMD),Sharp评分系统应用于每只手及腕的18个区域进行关节间隙狭窄评分,17个区域进行骨侵蚀评分。应用电化学发光法检测血清中Ⅰ型原胶原N-端前肽(s-PINP)和Ⅰ型胶原C端肽(s-CTX)。结果 (1)RA组各测定部位BMD均低于对照组(均<0.05)。(2)RA组外周血s-CTX水平、s-CTX/PINP比值高于正常对照组(均<0.05),s-PINP水平低于正常对照组(<0.05)。(3)RA患者轻、中度活动组57例和重度活动组160例,重度活动组仅外周血s-CTX水平高于轻中度活动组(<0.05)。结论类风湿关节炎患者骨密度与该病情活动性以及OP的相关性,其机制有待于更进一步研究。

常见性病患者血液套式PCR扩增HCMV-DNA的研究

目的 建立检测人巨细胞病毒 (HCMV)感染的套式 PCR方法并探讨常见性病患者 HCMV的感染情况。方法 在 HCMV IEA基因内自行设计两对引物 ,建立套式 PCR检测 688例常见性病患者及 1 38名健康献血员血液HCMV- DNA,同时应用捕获 ELISA检测 HCMV- Ig M。结果 性病患者 HCMV- Ig M及 DNA阳性率分别为 34.74%和39.53% ,与对照组 (8.0 0 %、1 0 .1 4 % )相比均有显著性差异 (P<0 .0 1 )。从性病类型来看 ,梅毒患者 HCMV感染率最高 ,其 HCMV- Ig M及 DNA阳性率分别达 46.80 %、51 .90 % ;从年龄分组看 2 6～ 35岁组为 HCMV感染高峰组 ,HCMV- Ig M及 DNA阳性率分别达 40 .2 0 %、46.62 %。结论 性病患者易发生活动性的 HCMV感染 ,性接触也是成年人之间 HCMV的重要传播途径之一。套式 PCR是一种临床检测 HCMV的快速有效手段 ,值得临床推广。

血浆D-二聚体进口、国产试剂相关性的比对及在骨科创伤患者中的应用

目的探讨血浆D-二聚体(进口、国产)试剂的相关性及在深静脉血栓(DVT)检测结果的分析。方法收集DVT患者168例,以同期检测的非DVT患者300例及正常健康人100例为对照,用国产胶乳增强免疫比浊法和进口荧光酶免法测定D-二聚体含量。结果国产与进口试剂检测正常组、DVT组及非DVT组D-二聚体差异均无统计学意义(均P>0.05),且具有较好的相关性(R2=0.9996);两种试剂在DVT组D-二聚体检测中高概率、中概率及低概率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论国产试剂与进口试剂相比具有良好的相关性,为进口原装试剂的国产化奠定了基础。

系统性红斑狼疮并发海蓝组织细胞增多症1例

患者女，21岁。因无明显诱因下出现反复腰背部酸痛、双上肢肿痛1个月人院。入院后查体：神志清，精神可，脉搏72次／min，呼吸18次／min，血压106／62mmHg．体温36．8℃。双上肢上举未见明显受限，活动可，双手肿胀，

系统性红斑狼疮并发海蓝组织细胞增多一例报道并文献复习

海蓝组织细胞增多症(sea-blue his tiocgtosis,SBH)是一种比较少见的类脂质代谢异常综合征,发病原因不明,本病分原发性和继发性,且以继发性多见[1]。海蓝组织细胞实际上是巨噬细胞吞噬大量不透明的蓝色颗粒而得名,而骨髓查到大量这类细胞是确诊SBH的关键依据。临床上继发于系统性红斑狼疮(SLE)的案例罕有报道,为进一步了解海蓝组织细胞增多症的临床特点。

斑点杂交法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mecA的临床研究

目的探讨斑点杂交技术检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因mec A的应用价值。方法设计mec A基因特异性引物,用地高辛标记;制备mec A基因探针,运用斑点杂交方法、聚合酶链反应(PCR)法检测mec A基因。结果 100例临床分离的金黄色葡萄球菌中共检出mec A基因阳性32例,阳性率为32%;PCR方法检出阳性36例,阳性率为36%。结论通过斑点杂交技术可以方便、特异地检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mec A基因。

病毒性肝炎患者血清Ⅳ型胶原含量及临床意义探讨

对161例病毒性肝炎患者血清Ⅳ型胶原(Ⅳ—C)含量进行了测定:随着病程的延长,Ⅳ—C 含量相应增高,>10年组与对照组差异显著(P<0.05);血清Ⅳ—C含量急肝组<慢肝组<肝硬化组<重肝组,除急肝组外,各型肝炎血清Ⅳ—C含量均比对照组增高(P<O.05);乙肝病毒单一感染组血清Ⅳ—C含量显著高于对照组(P<0.01),二重感染组与单一感染组相比Ⅳ—C含量增高不明显,但乙、丙重叠(混合)感染组Ⅳ—C含量显著高于对照组(P<0.05);三重感染组Ⅳ—C含量明显高于单一感染组,尤其是乙、丁、戊三重和乙、丙、戊三重感染的重型肝炎血清Ⅳ—C含量显著增高(P<0.01)。结果提示:血清Ⅳ—C含量测定对病毒性肝炎患者肝纤维化的早期诊断和重型肝炎的病情和预后判断具有一定临床意义。

绝经后女性血清性激素结合蛋白水平与骨质疏松症的相关性研究

为探讨性激素结合蛋白(Sex Hormone Binding Globulin, SHBG)与骨质疏松症(Osteoporosis,OP)患病风险之间的关系,用电化学发光法检测了237名绝经后女性血清SHBG和睾酮水平,并采用双能X线骨密度(BoneMineralDensity,BMD)测定仪测量了腰椎L2-4和股骨颈(Femoral Neck, FN)的BMD.结果发现SHBG与L2-4和FN的BMD均呈负相关(r=-0.356和-0.303, P<0.01),校正体重指数(Body Mass Index, BMI)和年龄后仍呈负相关(P<0.05). SHBG水平独立解释了2.0%的L2-4 BMD的变异和1.3%的FN BMD的变异.高SHBG组受试者OP患病率显著高于中SHBG组(OR=3.22,P=0.001)和低SHBG组(OR=4.22,P<0.001),校正BMI和游离睾酮后差异仍显著(OR=2.32,P=0.040和OR=3.23,P=0.018).因此,高SHBG水平是中国绝经后女性人群OP的独立风险因素,监测外周血SHBG水平可能有助于预测绝经后女性骨质丢失与OP的严重程度.

ROC曲线确定D-二聚体诊断骨科患者深静脉血栓的截断点

目的确定D-二聚体浓度的最佳截断点,应用于骨科创伤患者术前深静脉血栓(DVT)诊断,并评价其临床意义。方法按照DVT的诊断标准收集患者标本62例,以同期检测的非DVT患者312例及正常健康人60例为对照,荧光酶免法测定D-二聚体含量。根据结果绘制ROC曲线,并应用统计学软件进行分析。结果根据ROC曲线,荧光酶免法测定的D-二聚体用于骨科创伤患者术前DVT诊断的最佳截断点为1 575μg/L(敏感度为97.3%、特异性为48.7%、阳性似然比为1.90)。结论荧光酶免法定量测定D二聚体,以1 575μg/L作为诊断骨科创伤患者术前DVT的截断点较为合适,可提高其临床诊断的效率,降低诊断费用。

非糖尿病绝经后女性胰岛素抵抗与骨代谢的相关性研究

为探讨胰岛素抵抗与骨代谢之间的相互关系,采用双能X线吸收仪测量了262名非糖尿病绝经后女性腰椎L1-4和股骨颈(Femoral Neck,FN)的骨密度(Bone Mineral Density,BMD),并检测了其外周血骨转换标志物和糖代谢指标以及雌激素水平.结果发现胰岛素和稳态模型评估的胰岛素抵抗(Homeostasis Model Assessment of Insulin Resistance,HOMA-IR)指数与L1-4和FN BMD均呈正相关(P<0.01),但在控制体重指数(Body Mass Index,BMI)与游离雌二醇(Free Estradiol,FE2)水平后相关性均消失(P>0.05);高HOMA-IR组(OR=0.59,P=0.003)和中HOMA-IR组(OR=0.52,P=0.044)的骨质疏松症患病风险显著低于低HOMA-IR组,但校正BMI和FE2后差异消失(OR=0.81,P=0.263和OR=0.68,P=0.268);高HOMA-IR组骨钙素水平显著低于低HOMA-IR组(P=0.001),即使校正BMI和FE2后差异仍有统计学意义(P=0.027).因此,胰岛素抵抗不是非糖尿病绝经后女性骨质疏松症的独立保护或风险因素,而骨钙素可能通过影响外周组织胰岛素敏感性参与糖代谢.