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诱导多潜能干细胞(iPSCs)的研究与应用进展
被引量:
4
1
作者
付玉华
周秀梅
+1 位作者
徐凤青
钱其军
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期101-112,共12页
诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是体细胞在外源因子作用下,经直接细胞核程序重整而重新获得多潜能的干细胞.iPSCs在疾病的模型建立与机理研究、细胞治疗、药物的发现与评价等方面有着巨大的潜在应用价值.在过...
诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是体细胞在外源因子作用下,经直接细胞核程序重整而重新获得多潜能的干细胞.iPSCs在疾病的模型建立与机理研究、细胞治疗、药物的发现与评价等方面有着巨大的潜在应用价值.在过去几年中,科学家们致力于改进体细胞重编程技术并取得许多突破.然而,为实现其在临床上的应用,必须克服体细胞重编程效率低和iPSCs成瘤风险两大挑战,而且重编程机制有待进一步阐明.结合iPSCs最新研究成果,评述了有关领域国内外研究进展,重点讨论当前存在问题,并展望未来研究方向.
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关键词
体细胞重编程
诱导多潜能干细胞
疾病模型
细胞治疗
小分子
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职称材料
应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒
2
作者
范丽
徐增辉
+4 位作者
金华君
徐凤青
丁娜
严淋
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期134-138,共5页
目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观...
目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。
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关键词
杆状病毒系统
腺相关病毒
昆虫细胞
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职称材料
人Oct4与细胞穿膜肽融合蛋白的表达
3
作者
周承亮
徐凤青
+3 位作者
王春红
刘韬
彭新荣
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期489-493,共5页
目的通过原核表达获得人Oct4(hOct4)与细胞穿膜肽融合蛋白,优化其表达方法并观察其穿膜效果。方法通过基因工程手段构建了pET原核表达载体,利用BL21(DE3)和Rosetta2(DE3)蛋白表达菌表达蛋白。Ni亲和纯化方法纯化蛋白,蛋白质印迹分析检...
目的通过原核表达获得人Oct4(hOct4)与细胞穿膜肽融合蛋白,优化其表达方法并观察其穿膜效果。方法通过基因工程手段构建了pET原核表达载体,利用BL21(DE3)和Rosetta2(DE3)蛋白表达菌表达蛋白。Ni亲和纯化方法纯化蛋白,蛋白质印迹分析检测融合蛋白组成。将融合蛋白用罗丹明染色后加入人正常皮肤成纤维细胞株BJ观察其穿膜进入细胞情况。结果构建了pET21a(+)-hOct4-11R-His和pET21a(+)-EGFP-11R-His表达载体,转入大肠杆菌中后诱导获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,经蛋白质印迹分析检测表明融合蛋白正确。经BJ细胞测试,观察到融合蛋白进入细胞中。结论成功获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,且融合蛋白能够高效进入BJ细胞并聚集于细胞核周围。
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关键词
八聚体转录因子3
细胞穿膜肽
重组融合蛋白质类
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职称材料
题名
诱导多潜能干细胞(iPSCs)的研究与应用进展
被引量:
4
1
作者
付玉华
周秀梅
徐凤青
钱其军
机构
浙江理工大学生命科学学院
中国人民解放军第二军医大学
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期101-112,共12页
基金
国家杰出青年基金资助项目(30925037)~~
文摘
诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)是体细胞在外源因子作用下,经直接细胞核程序重整而重新获得多潜能的干细胞.iPSCs在疾病的模型建立与机理研究、细胞治疗、药物的发现与评价等方面有着巨大的潜在应用价值.在过去几年中,科学家们致力于改进体细胞重编程技术并取得许多突破.然而,为实现其在临床上的应用,必须克服体细胞重编程效率低和iPSCs成瘤风险两大挑战,而且重编程机制有待进一步阐明.结合iPSCs最新研究成果,评述了有关领域国内外研究进展,重点讨论当前存在问题,并展望未来研究方向.
关键词
体细胞重编程
诱导多潜能干细胞
疾病模型
细胞治疗
小分子
Keywords
somatic cell reprogramming, induced pluripotent stem cells (iPSCs), disease model, cell therapies,small molecules
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
Q75 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒
2
作者
范丽
徐增辉
金华君
徐凤青
丁娜
严淋
钱其军
机构
浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所
第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期134-138,共5页
基金
国家"十一五"新药创制重大专项(2009ZX09103-687)
国家自然科学基金(30772477)~~
文摘
目的建立应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的技术体系,并初步检测所制备病毒的感染活力。方法采用杆状病毒生产系统包装rAAV8-EGFP,经高效液相色谱法提取并纯化病毒,实时荧光定量PCR测定病毒滴度,通过观察绿色荧光蛋白的表达强度来检测rAAV8-EGFP对HEK-293细胞的感染活力。结果实时荧光定量PCR显示成功制备高滴度rAAV8-EGFP,滴度可达1.5×1012vg/ml,100ml摇瓶共得到1.5×1013vg rAAV8-EGFP病毒颗粒;感染后的HEK-293细胞具有较强的绿色荧光蛋白表达。结论应用杆状病毒系统成功制备高滴度、高活力的重组腺相关病毒,为后续研究奠定了基础。
关键词
杆状病毒系统
腺相关病毒
昆虫细胞
Keywords
baculovirus system
adeno-associated virus
insect cell
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人Oct4与细胞穿膜肽融合蛋白的表达
3
作者
周承亮
徐凤青
王春红
刘韬
彭新荣
钱其军
机构
浙江理工大学生命科学院新元医学与生物技术研究所
第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期489-493,共5页
基金
国家杰出青年科学基金(30925037)~~
文摘
目的通过原核表达获得人Oct4(hOct4)与细胞穿膜肽融合蛋白,优化其表达方法并观察其穿膜效果。方法通过基因工程手段构建了pET原核表达载体,利用BL21(DE3)和Rosetta2(DE3)蛋白表达菌表达蛋白。Ni亲和纯化方法纯化蛋白,蛋白质印迹分析检测融合蛋白组成。将融合蛋白用罗丹明染色后加入人正常皮肤成纤维细胞株BJ观察其穿膜进入细胞情况。结果构建了pET21a(+)-hOct4-11R-His和pET21a(+)-EGFP-11R-His表达载体,转入大肠杆菌中后诱导获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,经蛋白质印迹分析检测表明融合蛋白正确。经BJ细胞测试,观察到融合蛋白进入细胞中。结论成功获得了hOct4-11R-His和EGFP-11R-His融合蛋白,且融合蛋白能够高效进入BJ细胞并聚集于细胞核周围。
关键词
八聚体转录因子3
细胞穿膜肽
重组融合蛋白质类
Keywords
octamer transcription factor 3
cell penetrating peptides
recombinant fusion proteins
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
诱导多潜能干细胞(iPSCs)的研究与应用进展
付玉华
周秀梅
徐凤青
钱其军
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
下载PDF
职称材料
2
应用杆状病毒系统制备8型腺相关病毒
范丽
徐增辉
金华君
徐凤青
丁娜
严淋
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
0
下载PDF
职称材料
3
人Oct4与细胞穿膜肽融合蛋白的表达
周承亮
徐凤青
王春红
刘韬
彭新荣
钱其军
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
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职称材料
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