二氢丹参酮通过抑制Akt信号通路激活来增强索拉非尼对肝细胞癌的抗癌作用

目的索拉非尼是唯一被批准用于治疗晚期肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的一线药物。然而索拉非尼的耐药性使得治疗效果并不理想。尽管索拉非尼耐药性的机制尚不清楚,但在HCC中的耐药性可能通过Akt信号通路的激活而发生。二氢丹参酮(dihydrotanshinone,DHT)是中药丹参的亲脂性成分,具有多种抗肿瘤活性并可抑制Akt活化。DHT联合索拉非尼治疗HCC的作用机制尚未明确。本文旨在研究DHT是否可增强索拉非尼对HCC的抗癌活性。方法采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞仪检测索拉非尼和DHT对HCC细胞Huh7和HepG2细胞活力、细胞凋亡和药物敏感性的影响。通过蛋白质印迹分析Akt、P-Akt、Caspase3、GSK-3β、P-GSK3-β、核糖体蛋白S6激酶(S6K)、P-S6K、细胞周期蛋白D1、Bcl-xl、Bcl-2和Bax的表达水平。使用单因素方差分析(analysis of variance,ANOVA)和Dunnett检验对所有数据进行统计学比较。采用SPSS 20.0统计软件进行统计分析。结果DHT通过减少Akt的激活来抑制HCC细胞的增殖和促进细胞凋亡。DHT抑制Akt下游因子的表达和激活,包括GSK-3β和S6K,这些因子调节细胞凋亡反应,并被索拉非尼激活和上调。索拉非尼和DHT均下调细胞周期蛋白D1的表达,DHT上调Bax的表达并下调Bcl-2和Bcl-xl的表达。索拉非尼对Bcl-2家族蛋白质表达的影响不大。结论DHT可能通过抑制Akt信号通路的激活来增强索拉非尼的HCC细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用。

三维可视化联合模拟手术在研究生肝脏外科临床教学中的应用

目的探讨三维可视化联合模拟手术在研究生肝脏外科临床教学中的应用价值。方法选取哈尔滨医科大学附属第四医院2019年9月~2021年9月入学的外科学研究生40人,随机分为试验组和对照组,每组各20人。对照组采用常规教学方法,而试验组在常规教学方法基础上加用三维可视化、模拟肝切除手术及残肝体积测量等教学方法。两组均在进行24学时的教学后,采用客观标准化试卷、主观问卷调查两种形式考核教学效果及学生满意度。结果两组研究生培训前基本情况及考核成绩比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。培训结束后,试验组研究生在基础理论(83.70±5.84分)、影像学(78.15±5.15分)及外科学(82.45±4.94分)3个方面的考核成绩均明显高于对照组(分别为79.00±5.83、68.60±6.14、73.10±7.01分),差异均有统计学意义(t值分别为2.547、5.327、4.87;P值分别为0.015、0.001、0.001)。问卷调查结果显示,三维可视化联合模拟手术的试验组教学方法有利于研究生对肝脏解剖学、影像学、术式评估的学习,可有效提高学生学习兴趣,调动积极性,并使知识易于掌握且记忆持久。试验组研究生对教学满意度评分显著高于对照组(4.15±0.59分vs 3.50±0.95分),差异有统计学意义(t=2.611,P=0.014)。结论三维可视化联合模拟手术应用于研究生肝脏外科教学,可提升教学成绩和教学效果,具有较好的满意率,值得作为新的教学方法进一步实施探讨。

ALPPS在肝内胆管细胞癌中的应用(附1例报告)

目的：探讨联合肝脏离断和门静脉结扎二步肝切除术（ALPPS）治疗肝内胆管细胞癌的安全性与有效性.方法：对201 4年4月1 6日哈尔滨医科大学附属第四医院肝胆外科收治的1例累及右三叶的肝内胆管细胞癌患者施行ALPPS治疗,并对围手术期指标及随访资料进行分析.第一阶段离断肝周韧带,裸化肝十二指肠韧带,结扎门静脉右支及肝短血管,标记肝右静脉后离断左外叶与左内叶间肝组织.术后第8日,切除右三叶.结果：术前残肝体积（左外叶）为769.28 mL,占标准肝脏体积的26.5％;第一阶段术后6d残肝明显增大达1157.84mL,占标准肝脏体积的37.1％,增加50％.第一阶段手术历时300 min,出血200 mL;第二阶段手术历时150 min,出血600 mL.第一阶段手术后出现胆漏,辅助肝（右半及第Ⅳ段肝脏）每日引出250～700 mL胆汁.第二阶段手术后恢复顺利.结论：ALPPS为剩余肝脏体积不足的肝内胆管细胞癌提供了新的治疗选择.

两种肝囊肿开窗术式前瞻对照研究

目的比较腹腔镜与开腹开窗术治疗肝囊肿的疗效。方法采用前瞻性病例对照研究,其中开腹肝囊肿开窗术32例(开腹组),腹腔镜肝囊肿开窗术31例(腔镜组),比较2组患者的手术时间、术中出血量、胃肠功能恢复时间、离床活动时间、术后住院时间。结果腔镜组与开腹组在手术时间[(44±11)min vs(72±12)min]、术中出血量[(15±5)mL vs(56±10)mL)]、胃肠功能恢复时间[(12±9)h vs(46±8)h)]、术后离床活动时间[(1.1±0.7)d vs(2.5±1.2)d]及住院时间[(4.1±1.9)d vs(7.4±2.3)d]等方面比较差异有统计学意义(P<0.05);并发症发生率两组无明显差异(P>0.05)。两组随访6个月彩超复查囊肿无复发。结论腹腔镜肝囊肿开窗术具有手术时间短、出血少、恢复快、住院时间短等优点。

门奇断流术对肝硬变门脉高压症患者门脉系统血流动力学影响的研究

目的 观察健康人与肝硬变门静脉高压症患者胃左静脉 (LGV)血液的流速和流向变化的差异。探讨其与肝硬变门脉高压食管静脉曲张发生、发展及转归的关系。并观察断流术对门静脉高压症肝血流动力学变化的影响 ,并进一步探讨其内在的相互关系。方法 应用彩色多普勒超声分别检测 30例健康人及 2 5例门静脉高压症患者的LGV血液的流速和流向。并检测 2 5例门静脉高压症患者手术前后门静脉血流量 (portalvenousflow ,PVF) ,肠系膜上静脉血流量 (superiormesentericveinflow ,SMVF) ,脾静脉血流量 (splenicveinflow ,SVF)的变化 ,采用水柱法测量自由静脉压力 (freeportalpresure,FPP)的变化。结果 ①LGV血流方向 :全部健康人为向肝型 ,相反 ,门静脉高压症患者 80 % (2 0 / 2 5 )血流方向是离肝型。②LGV血流速度 :健康人为 (7 6± 2 5 )cm/s,门静脉高压症患者呈向肝型时流速为 (7 8± 2 1)cm/s,而血流呈离肝型时为 (12 3± 2 5 )cm/s。随着静脉曲张程度增大 ,离肝血流速度平行增加。③门静脉高压症患者PVF由术前的 (84 9± 2 4 1)mL/min减少至术后 (6 70± 132 )mL/min ;SMVF由术前的 (44 8± 112 )mL/min增加至术后 (5 91± 4 8)mL/min。FPP由术前的 (2 5 2 7± 4 73)mmHg降至术后 (2 2 5±5 4 8)

胰腺损伤性胰瘘35例临床分析

目的:探讨胰腺损伤性胰瘘的防治原则与措施。方法:回顾性分析131例胰腺外伤患者的临床资料,对术后35例并发胰瘘患者行"损伤控制性"手术(damage control surgery,DCS)并实施围手术期综合治疗方案。结果:35例胰瘘患者中3例经引流管造影显示形成内瘘自愈,9例术后形成胰腺假性囊肿行Roux-en-Y囊肿空肠内引流术,2例因MODS、腹腔感染死亡,其余患者均治愈。随访3个月～5年,出院患者无因胰瘘并发症等相关因素死亡者。结论:胰腺损伤性胰瘘的防治需全方位考虑实施DCS及围手术期综合治疗方案,既要有效控制原发损伤,又要积极预防并发症。

谈精准微创外科时代的心理微创观

当今,我们已身处精准微创外科时代,但与生理创伤相比,心理微创尚未受到足够重视.医疗过程中的一言一行都会对患者产生一定的心理影响与心理创伤,这种心理影响有些是积极地,有些是消极的,心理微创即是将消极心理创伤转变为积极心理影响的理念与方法.医患沟通、切口处理、心理疏导、术后镇痛等诸多问题都是心理微创需要关注的问题.心理微创观念的提出使得我们将视野放大至围手术期全程,有助于实现微创全程化与无缝化.但患者有益原则仍是心理微创观的基石,应避免以心理微创为托词,盲目、不加选择的一味追求微创技术,造成巨创.

脾切除门奇静脉断流术对门静脉高压症患者肝脏血液动力学的影响

目的 观察脾切除门奇静脉断流术 (断流术 )对门静脉高压症肝血液动力学变化的影响。方法 应用超声多普勒分别检测 2 5例门静脉高压症患者手术前后门静脉血流量 (PVF)、肠系膜上静脉血流量 (SMVF)、脾静脉血流量 (SVF)的变化 ,采用水柱法测量自由静脉压力 (FPP)的变化。结果 PVF由术前的 (84 9± 2 4 1)ml/min减少至术后 (6 70± 132 )ml/min ;SMVF由术前的 (44 8± 112 )ml/min增加至术后 (5 91± 4 8)ml/min。FPP由术前的 (3 37± 0 6 3)kPa降至术后 (3 0 0± 0 73)kPa。结论 断流术有效地缓解了门静脉系统的高动力循环状态。但断流术后门静脉入肝血流更加减少 。

肝外胆管癌相关基因的研究进展

肝外胆管癌是一种恶性程度较高的肿瘤,早期诊断困难,预后较差。随着现代分子生物学的发展,人们不断发现与肝外胆管癌相关的癌基因、抑癌基因以及各种细胞因子和蛋白,并对其有了较为深入的了解,为肝外胆管癌的早期诊断和治疗提供了有利条件。

不同器械经脐单切口与三孔腹腔镜胆囊切除术的前瞻性随机对照研究

目的比较不同器械经脐单切口与三孔腹腔镜胆囊切除术的安全性、手术效果。方法选取2011年9月～2012年6月胆囊切除术150例，随机分为3组：A组行经脐单切口腹腔镜胆囊切除术（可转腕器械）；B组行经脐单切口腹腔镜胆囊切除术（普通器械）；C组行三孔腹腔镜胆囊切除术。比较手术时间、术中出血量、术后疼痛、满意程度、C反应蛋白、免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群等损伤指标。结果中位手术时间A组40min和B组37．5min显著长于C组25min（X2=25．165，P=0．000；X2=16．184，P=0．000），但A、B2组无统计学差异（X2=0．987，P=0．610）。中位术中出血量A组10．0ml和B组10．0ml显著多于C组7．5ml（X2=12．571，P=0．002；X2=13．619，P=0．001），但A、B2组无统计学差异（X2=0．021，P=0．989）。3组术后疼痛评分、满意程度、创伤及对免疫系统影响均无差异（P〉0，05）。发生并发症4例，其中胆漏3例（B组1例，C组2例），术中胆道损伤l例（B组），A组未发生并发症。结论SILC是一种兼顾安全与美观的胆囊切除术式，可转腕器械使SILC更具安全性。

PI3K/Akt通路与肝癌对索拉非尼获得性耐药机制的实验研究

目的:探讨PI3K/Akt通路与肝癌对索拉非尼获得性耐药机制的关系。方法:采用浓度梯度递增法建立肝癌细胞系Hep G2和Huh7耐药细胞株Hep G2-SR和Huh7-SR,并采用CCK-8法检测细胞活力,验证细胞耐药特性。Western blot检测p-Akt、Akt和β-actin蛋白表达水平。以哌立福辛抑制p-Akt,采用CCK-8法检测细胞活力,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡,探讨哌立福辛与索拉非尼的协同作用及对耐药的逆转作用。结果:索拉非尼对Huh7及Hep G2细胞抑制细胞活力的作用明显强于Huh7-SR、Hep G2-SR细胞(P<0.05)。耐药细胞株中Akt磷酸化蛋白p-Akt的表达水平明显高于亲本细胞株(P<0.05),而Akt表达在耐药株与亲本细胞株中无明显差异(P>0.05)。哌立福辛可协同索拉非尼抑制Huh7-SR、Hep G2-SR细胞活力,促进凋亡。结论:索拉非尼持续作用导致PI3K/Akt通路的激活导致肝癌对索拉非尼获得性耐药,其机制是通过调节发生在翻译后水平的Akt磷酸化而非Akt转录或翻译。抑制Akt可逆转肝癌对索拉非尼耐药。

经皮经肝胆囊穿刺引流术在复杂胆道外科中的应用

目的:探讨经皮经肝胆囊穿刺引流术(PTGBD)在复杂胆道外科中的应用价值。方法:回顾分析2015年6月至2018年6月为50例患者行PTGBD减黄的临床资料。其中急性胆囊炎伴胆道梗阻20例,急性化脓性胆管炎伴胆囊扩张10例,胆管周围淋巴结肿大致胆总管梗阻伴胆囊扩张2例,胆道炎性狭窄导致胆总管梗阻伴胆囊扩张3例,胆源性胰腺炎伴胆总管梗阻6例,肿瘤引起的胆总管梗阻性黄疸9例。结果:50例患者均成功完成PTGBD,穿刺成功率为100%;与术前相比,PTGBD术后第3天患者腹痛、腹胀、呕吐、皮肤瘙痒等症状及白细胞计数、中性粒细胞比值、天门冬氨酸氨基转移酶水平、总胆红素水平及体温均好转。PTGBD术后2例患者因肿瘤进展,术后3个月加行经皮肝穿刺胆道引流术; 4例患者未行其他手术治疗;44例患者行下一阶段手术前胆红素水平降至正常或术前理想水平。住院3～27 d,平均(20.4±6.2) d;带管时间2～21周,平均(5.6±3.8)周。结论:PTGBD应用于胆道外科中减黄效果确切,具有安全、简便、创伤小及康复快的优点,符合胆道外科疾病微创化治疗的策略。

沉默PRMT5基因对人肝癌细胞生物学行为的影响

目的探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶5(Protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)对人肝癌细胞生物学行为的影响。方法应用免疫印迹法(Western blot)检测正常肝细胞LO2、肝癌细胞HepG2及Huh7中PRMT5的表达水平,应用siRNA技术将PRMT5基因敲减,流式细胞仪检测肝癌细胞HepG2及Huh7的凋亡情况。应用Western blot检测蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)及磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,P-AKT)的表达水平。结果与正常肝细胞LO2相比,PRMT5在肝癌细胞HepG2及Huh7中高表达(P<0.05)。抑制PRMT5的表达可以促进肝癌细胞凋亡。将PRMT5基因敲减后,肝癌细胞系中P-AKT的表达量降低(P<0.01)。结论PRMT5可能通过调控肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)中AKT通路从而促进肝癌细胞凋亡。因此,PRMT5可能是肝癌的潜在生物标志物和有希望的治疗靶标。

日间手术理念对腹腔镜胆囊切除术的影响

目的探讨日间手术理念的引入对腹腔镜胆囊切除术的影响。方法将2017年1～12月我科180例LC按照日间手术开展的时间顺序分为日间手术理念引入前(2017年1～4月)、日间腹腔镜胆囊切除术(ambulatory laparoscopic cholecystectomy,ALC)开展初期(2017年5～8月)、ALC开展成熟期(2017年9～12月),并相应分为A、B、C组,其中A组55例,B组65例,C组60例。比较3组术前等待时间、住院时间、术后并发症、日间手术完成率,并分析B、C 2组延迟出院的原因。结果 A、B、C组术前等待时间中位数分别为52 h(25～242 h)、7 h(3～53 h)、6. 5 h(3～60 h),有统计学差异(χ~2=101. 240,P=0. 000; P_(A-B)=0. 000,P_(A-C)=0. 000,P_(B-C)=1. 000);住院时间中位数分别为8 d(3～13 d)、3 d(1～9 d)、1 d(1～7 d),有统计学差异(χ~2=87. 005,P=0. 000; P_(A-B)=0. 000,P_(A-C)=0. 000,P_(B-C)=0. 002)。A、B、C组日间手术完成率分别为0. 0%(0/55)、33. 8%(22/65)、56. 7%(34/60),有统计学差异(χ~2=65. 546,P=0. 000); B、C组延迟出院率分别为66. 2%(43/65)、43. 3%(26/60),B组明显高于C组(χ~2=6. 570,P=0. 010),但因心理因素而延迟出院患者分别占延迟出院患者总数79. 1%(34/43)、80. 8%(21/26),无统计学差异(χ~2=0. 029,P=0. 865)。结论日间手术理念的引入可有效缩短术前等待时间、住院时间,提高日间手术完成率应注重患者心理因素的影响。