KSHV包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A和gL的克隆及真核表达

目的:克隆并在293T细胞中表达卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)包膜糖蛋白编码基因K8.1、K8.1A与gL。方法:以BCBL-1细胞总DNA为模板,用PCR方法扩增出K8.1和gL基因;以BCBL-1细胞的总RNA为模板,通过RT-PCR的方法扩增出K8.1A基因。将PCR产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,分别构建含K8.1、K8.1A和gL基因的重组真核表达质粒。重组质粒转染293T细胞,用Westernblot的方法检测K8.1和K8.1A在293T细胞中的表达;RT-PCR方法检测gL基因在293T细胞中的转录。结果:核酸序列分析的结果表明,克隆的K8.1、K8.1A和gL基因与GenBank中已登记的KSHVK8.1、K8.1A和gL基因序列100%同源。Westernblot结果显示,在约35ku位置有目的条带,与预期的重组K8.1和K8.1A蛋白大小一致。RT-PCR结果显示约在500bp位置检测到特异性条带。结论:KSHVK8.1、K8.1A和gL编码基因在293T细胞中获得正确表达。

钻井液中硫化氢的危害及其控制

分析了含硫化氢油气井的钻井、修井和井下维护等作业中硫化氢的来源、危害及其控制方法。对除硫剂的选择原则、几种常用除硫剂产品、除硫剂的加入方法进行了介绍。提出了控制硫化氢的几种可行方法。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C在儿童早期肾病诊断中的应用

目的比较血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C（CYC）和血清肌酐（SCr）、尿素在儿童早期肾病诊断中的检测灵敏度，并研究健康儿童血CYC水平变化规律。方法采用微粒子免疫增强比浊法测定64例肾脏病患儿血清CYC浓度，同时用酶法平行测定血清SCr和尿素浓度，比较三者检测的敏感性差异。测定106例0～14岁正常儿童（包括23例脐带血）血清CYC浓度以确定儿童的参考值范围。结果肾脏病患儿CYC的阳性率为59．4％（38／64）；SCr的阳性率为25．0％（16／64），血清尿素的阳性率为12．5％（8／64），CYC与SCr和尿素间存在显著性差异（P〈0．01）。结论CYC检测在儿童早期肾病诊断中比血清SCr和尿素灵敏。

气体钻井完井中气基流体氮气的应用技术

氮气钻井技术是在空气钻井技术发展的基础上发展起来的。在空气钻井过程中,钻遇天然气时容易引起井下燃爆,于是开展了气基流体氮气、气体型流体充氮气以及氮气泡沫流体的研究与应用工作。介绍了氮气钻井完井作业的实施条件、现场制氮的方法及技术要求、气基流体氮气的循环系统以及氮气用于提高机械钻速、保护油气层的应用效果。氮气钻井技术在辽河、四川、吐哈等油田的应用取得了明显的经济效益。

增菌及增菌时间对药敏结果的影响

临床检验操作规程要求做细菌药敏前须经增菌4～6 h,然后再做药敏鉴定,平时很多细菌工作者由于标本多,工作忙或为节省时间不太重视此环节,从而导致药敏结果的误差,本次对葡萄球菌、大肠肝菌、绿脓杆菌3株菌株,分别观察不增菌与增菌2、4 h对药敏结果的影响.现报道如下.

Ghrelin与儿童肥胖关系

目的探讨新发现的促生长激素释放多肽ghrelin与儿童肥胖的关系。方法采用ELISA方法测定肥胖组8例儿童和正常对照组12例儿童的血清ghrelin水平,同时测定各组儿童的血清胆固醇、甘油三酯,研究其相关性。结果肥胖组儿童ghrelin(39.55±21.42)ng/ml,正常对照组儿童为(10.80±5.98)ng/ml(P<0.01);肥胖组ghrelin水平与甘油三酯呈负相关(P<0.05)。结论肥胖儿童空腹血清ghrelin水平显著升高,ghrelin可能与儿童肥胖的发生有关。

大学生择业剖析及应对

当前大学生的就业机会虽然在增多,但就业的难度也在不断加大,特别是在改革开放、经济发展及高校连续扩招等情况下,大学生形势更加严峻。大学生应明确自身的优势,摆正心态,把握机会,调整好理想与现实的差距,以利于尽快在就业市场上找到适合自己的位置。

流动聚焦型微流控体系中的液滴的图案化排列和转变模式

流体在微流通道中形成剪切流场（低雷诺数）．不同于宏观体系，由于剪切力和表面张力的竞争作用，产生的液滴在微尺度下的微流通道中形成特殊的排列现象---周期性类似“晶格”排列现象．设计了新型流动聚焦型微流控芯片，分析研究在微流体系中液滴周期性图案化排列和转变机理性，液滴排列模式受两方面因素影响：水油两相的流速比值和微通道尺寸．当微通道宽度为250或300 μm时，液滴形成单层分散，双层和单层挤压排列．当微通道宽度为350 μm 时，液滴会形成单层分散到三层排列到双层挤压最后到单层挤压排列．当出口通道宽度增加到400 μm时，甚至出现了液滴四层排列的现象．同时研究了各个液滴排列模式的“转变点”.

钻井液用降滤失润滑剂的研制与应用

以沥青磺化为基础,辅以表面活性剂和降滤失剂等材料,通过化学处理加工研制出了ZR-1钻井液用降滤失润滑剂。由于大多数润滑剂在使用过程中容易出现起泡现象,因此在研制ZR-1的过程中对乳化剂进行了优选,通过调整HLB值,达到了不起泡的效果。该产品不仅能显著改善钻井液的润滑性,而且降滤失的效果好,能使泥饼黏滞系数降低50%以上,高温高压滤失量降低20%以上;该产品无毒无害,不污染环境,储存、运输和使用均方便安全。对ZR-1的性能进行了室内试验评价,介绍了该处理剂在川渝地区的应用。

医学检验专业成人高等教育专升本学生科研思维培养和探索

目的:探索采用不同的教学策略对医学检验专业成人高等教育专升本学生进行科研思维培养的作用。方法:首先,通过压缩理论课学时,安排论文和科研标书讲解的教学方式,从2011年开始,每学期专业课在保证理论课授课完成的前提下,采用论文讲解的模式进行教学,同时,选择优秀论文作为范例进行讲解。其次,引入导师制,授课教师进行一对多的精准指导,许多老师都是高学历和高职称,具有丰富的带教经验。最后,通过本学系是研究生学科点的优势,安排学生与在读研究生进行见面交流。结果:经过多年的教学实践,本学系的科研培养策略和教学方法对提高了学生的科研思维能力和创新能力有一定帮助。结论:本学系使用的教学方法和教学策略对学生的科研思维能力和创新能力具有一定的意义,可以推广。

导师制教学模式在医学检验专业临床实习中的应用

医学学生专业理论水平、实验操作能力和科研创新素质的提高,与其临床实习经历密不可分。如何引导学生把在校所学的理论知识用于解决临床工作实际问题,从而为社会培养优秀的医学复合型人才,是医学高等院校必须探索的问题。在临床实习阶段施行导师制教学模式,就是要通过带教导师全方面、深层次的指导,以循序渐进的方式帮助学生运用临床思维方式,提高处理实际问题的综合能力,提升其在就业市场中的竞争力。

评价科研思维在医学检验技术本科生教育中提升学生创新能力的作用

目的医学检验技术是介于基础医学和临床医学之间的实验诊断医学专业,学生不仅要完善实验动手能力,更需要有一定的科研能力。随着我国医疗水平不断发展,社会对医学人才的要求在不断地提高,近年来尤其强调临床型人才的科研创新能力,对在校培养学生科研兴趣和激发其创新意识提出了更多要求。如何从理论与实验教学综合提高学生科研素养,激发学生学习热情,使其成为适应当前社会发展需要的复合型人才,值得进一步探讨。

新形势下检验医师培养的实践探索

为培养优秀的检验医师,在新的形势下通过大学的本科教育、研究生的临床培训、在职人员的学习提高,培养出具有基础医学、临床医学、医学检验等方面的基本理论知识和基本技能的,即能从事医学检验,也能从事医学类实验室工作的检验医师。在大量可靠的实验数据面前,为临床疾病诊断和治疗效果评估提供解释和咨询工作,使医学检验技术这一医学理论与实验技术结合的学科,成为连接基础医学与临床医学的桥梁。

小鼠STING基因启动子的克隆鉴定及功能初步分析

目的 :克隆小鼠干扰素基因刺激因子(STING)基因启动子,并对其启动子活性和转录调控机制进行初步探讨。方法 :利用PCR方法扩增小鼠STING基因5′上游1 005 bp(-927^+77)的片段,亚克隆至p GL3-basic质粒,然后通过步移缺失构建不同缺失片段的重组质粒。双荧光素酶报告活性分析检测重组质粒在NIH3T3中的活性,并利用生物信息学方法预测转录因子结合位点。结果:经酶切、测序鉴定,成功构建了小鼠STING启动子荧光素酶报告基因重组质粒。与p GL3-basic质粒相比,STING启动子重组质粒的相对荧光素酶活性增加(P<0.05)。通过生物信息学软件预测小鼠STING启动子区域(-177^-48)可能含有GATA、IK2、MZF1、SP1/SP3、STAT等转录因子结合位点。结论:成功构建小鼠STING不同缺失片段的启动子荧光素酶报告基因重组质粒。通过活性比较,推测小鼠STING的核心启动子区位于-177^+77区域,其中可能含有多个潜在的转录因子结合序列。

临床科研设计在医学检验专业实习带教中的实践探索

为了培养医学检验专业学生运用科研思维能力进行临床科研设计,以适应社会对人才的需求,在临床实习中通过导师制及导师团队的运用,提高学生对海量临床实验数据进行分析和处理的能力,通过查阅文献资料分析现象查找原因,在导师团队的帮助下解决临床实际工作中遇到的问题。学生在分析和解决问题的过程中,培养和锻炼了科研思维能力、科研设计能力和实践动手能力,并将书本知识与临床日常工作有机结合起来,拓展了自主学习和团队合作的能力,取得良好的教学效果。

miR-638对人肺腺癌细胞凋亡的影响

目的:探讨miR-638在肺腺癌中的表达及其与肺腺癌细胞凋亡的关系。方法:应用real-time RT-PCR的方法检测了miR-638在肺腺癌细胞株SPC-A1中的表达情况,并采用脂质体法将miR-638模拟物瞬时转染入SPC-A1。实验设置空白对照组、无关miRNA阴性对照组和miR-638转染组,转染后在荧光显微镜下观察转染效率,实时荧光定量RT-PCR检测miR-638的表达,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:与正常细胞相比,miR-638在肺腺癌细胞中低表达。SPC-A1细胞转染miR-638模拟物后,细胞凋亡率相对于空白组和阴性对照组显著升高(P<0.05)。结论:miR-638在肺腺癌中低表达,且能够促进肺腺癌细胞凋亡,可作为后续肺癌生物治疗的新分子靶标。

331 968例门诊及住院患者感染性指标检测的结果分析

目的：分析近5年来南京医科大学第一附属医院就诊患者感染性指标的检测结果，为相关传染病的预防控制提供科学依据。方法对2010年1月至2014年4月在南京医科大学第一附属医院检测感染性指标的患者临床资料进行回顾性分析。结果人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体的阳性率在0．043％～0．061％，丙型肝炎病毒（HCV）抗体的阳性率在1．07％～1．41％，梅毒抗体的阳性率在2．01％～2．17％。乙肝表面抗原（HBsAg）阳性率由2010年的8．36％下降至2014年的7．81％。乙肝表面抗体（HBsAb）的阳性率由2010年的35．36％上升至2014年的50．96％。结论有效地切断传播途径可以防止感染性疾病的进一步传播。