射频凝固电极在肝癌切除或消融治疗中的应用

目的评价射频凝固电极消融技术在肝切除术中应用的可行性、安全性及疗效。方法采用射频凝固电极射频消融技术进行肝癌切除手术共16例,其中腹腔镜下射频消融后肝切除术9例,腔镜下射频消融6例(共13个瘤体,平均最大肿瘤直径3.0±1.0cm),小切口腹腔镜辅助右肝Ⅴ、Ⅷ段肝癌切除1例。观察术后并发症情况,肿瘤复发情况。结果 16例均顺利完成肝癌切除或消融治疗。未出现严重并发症。肝癌消融灶完全坏死率为92.3%。随访8～20个月(平均14个月),于术后3、6个月各发现1例肝脏出现新病灶,1例消融部位肿瘤残留。肝癌切除患者未出现新病灶。死亡1例。结论腹腔镜下手术或开腹术中射频凝固电极消融技术在肝癌切除或消融治疗中应用安全可行,效果好。选择远离肝门区肿瘤进行治疗时效果更佳。

顺铂联合低分子柑橘果胶对肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨顺铂联合低分子柑橘果胶(LCP)对人肺癌细胞的增殖及凋亡通路的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐法检测各浓度顺铂单药(单药组)、顺铂联合LCP(联合组)对人肺癌细胞A549增殖的影响,用流式细胞仪检测半抑制浓度顺铂单药及联合用药处理A549细胞的凋亡比例,采用Western blot分析凋亡相关蛋白procaspase-3、8、9的变化。结果顺铂单药与联合LCP用药对A549细胞生长均有抑制作用,其效应呈时间和浓度依赖性;联合组对A549细胞的生长抑制作用更为显著(P<0.01)。单药与联合用药均能使A549细胞凋亡比例增加,联合组较单药组细胞凋亡更加显著。单药组与联合组A549细胞的凋亡相关蛋白procaspase-3、8、9蛋白的表达均下调,联合组较单药组procaspase-3、9蛋白表达下调更为显著,但两组procaspase-8蛋白表达无明显差异。结论 LCP能增加顺铂的细胞增殖抑制和诱导凋亡能力,该效应可能与活化线粒体凋亡途径有关。

大清生物纸在直肠癌Dixon术中的应用

目的:分析大清生物纸(可吸收止血膜)在直肠癌根治Dixon术中的应用效果。方法:前瞻性研究2010年2月至2011年8月在我院进行直肠癌根治Dixon术的患者52例,随机分为治疗组27例(大清生物纸覆盖盆腔、骶前等手术创面)与对照组25例(不用止血材料)。比较两组术后引流量以及近期并发症的发生率情况。结果:两组盆腔引流液量差异有统计学意义(P<0.05),近期并发症发生率差异无显著性(P>0.05)。结论:直肠癌Dixon术中,大清生物纸具有良好手术创面止血、减少渗液的作用,使用安全、方便,且对预防肠粘连、肠梗阻、减少直肠吻合口瘘可能有一定的帮助作用,值得临床推广应用。

免气腹小切口腹腔镜辅助结直肠癌根治术的临床分析

目的探讨免气腹小切口腹腔镜辅助结、直肠癌手术的临床意义。方法回顾性分析21例结、直肠癌免气腹小切口腹腔镜辅助下手术的临床资料。结果 21例患者采用免气腹腹腔镜辅助结、直肠癌手术,其中乙状结肠癌16例,直肠癌5例。手术均获成功,无吻合口瘘、无切口感染等并发症发生,无手术死亡者。结论免气腹腹腔镜辅助结、直肠癌手术是1种安全、有效、微创的手术方法,值得进一步探讨。

大清生物纸在直肠癌Dixon术中的应用

目的 分析大清生物纸（可吸收止血膜）在直肠癌根治Dixon术中的应用效果.方法 前瞻性研究2010年2月至2011年8月在我院进行直肠癌根治Dixon术的患者52例,随机分为治疗组27例（大清生物纸覆盖盆腔、骶前等手术创面）与对照组25例（不用止血材料）.比较两组术后引流量以及近期并发症的发生率情况.结果 两组盆腔引流液量差异有统计学意义（P＜0.05）,近期并发症发生率差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 直肠癌Dixon术中,大清生物纸具有良好手术创面止血、减少渗液的作用,使用安全、方便.且对预防肠粘连、肠梗阻、减少直肠吻合口瘘可能有一定的帮助作用,值得临床推广应用.

不可缓解梗阻性结肠癌的治疗体会

目的:探讨不可缓解梗阻性结肠癌的治疗方式。方法:选取2015年7月至2016年7月广州医科大学附属肿瘤医院收治的23例不可缓解梗阻性结肠癌患者,对患者采取肠道减压、灌洗后施行根治性手术,行Ⅰ期吻合及预防性回肠末端造瘘,腹部伤口负压吸引,回顾性分析患者术中及术后并发症的发生情况。结果:23例患者均手术成功,无死亡;发生吻合口瘘1例(直肠上段),保守治疗1周后愈合;未发生腹腔感染;无伤口感染。结论:对于不可缓解梗阻性结肠癌肠道减压灌洗后可行根治性手术,Ⅰ期吻合后预防性回肠造瘘、腹腔冲洗、伤口负压吸引系统可有效降低术后并发症,可能是一种安全有效的手术方式。

LncRNA CCAT1通过调控MYC蛋白的表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为

目的:探讨lncRNA CCAT1通过调控瘤细胞病毒癌基因(MYC)蛋白的表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为及机制。方法:q PCR检测lncRNA CCAT1在胃癌组织和不同胃癌细胞株中的表达情况;q PCR检测MYC在胃癌组织中的表达和lncRNA CCAT1的关系,双荧光素酶报告基因检测lncRNA CCAT1和MYC之间的相互作用;流式细胞术实验检测lncRNA CCAT1对胃癌细胞的凋亡行为和细胞周期的影响;划痕愈合试验和Transwell侵袭实验检测lncRNA CCAT1对胃癌细胞的迁移和侵袭行为的变化情况;Western blot实验检测lncRNA CCAT1对MAPK通路相关蛋白表达情况的影响。结果:与正常胃组织相比,胃癌组织中lncRNA CCAT1的表达水平相对上调,与其他细胞株相比,HCG-27细胞中lncRNA CCAT1表达最高;MYC表达与相对lncRNA CCAT1的表达呈负相关关系;双荧光素酶实验证实lncRNA CCAT1能与MYC的3'UTR特异性结合,可以调控MYC的表达与活性;抑制lncRNA CCAT1的表达可以诱导G0/G1期的细胞周期停滞并促进细胞凋亡;抑制lncRNA CCAT1的表达后可以抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力;抑制lncRNA CCAT1后下游MAPK通路蛋白表达水平相应下调。结论:LncRNA CCAT1通过调控MYC蛋白表达激活MAPK信号通路影响胃癌细胞的生物学行为。

MiR-107靶向Notch2促进胃癌细胞迁移和侵袭

目的检测微小RNA-107(miR-107)在胃癌细胞中的表达,探讨其调控胃癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法采用Real-time PCR检测miR-107和Notch2在人胃癌细胞MKN45和人胃黏膜上皮细胞GES-1中的表达。转染miR-107 inhibitors至MKN45细胞,采用Transwell法检测MKN45细胞迁移和侵袭。转染Notch2过表达载体至MKN45细胞,采用Transwell、Real-time PCR、Weatern blot分别检测细胞迁移、侵袭和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达。Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和Notch2的靶向关系。Transwell实验检测抑制miR-107并沉默Notch2后MKN45细胞迁移和侵袭。结果与GES-1细胞比较,MKN45细胞中miR-107表达上调(P<0.01),而Notch2表达下调(P<0.01)。抑制miR-107或过表达Notch2,则MKN45细胞迁移和侵袭数减少(P<0.01),过表达Notch2能促进MMP-9 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。Targetscan在线预测和双荧光素酶报告基因实验结果表明:Notch2是miR-107的潜在靶基因,抑制miR-107可促进Notch2表达(P<0.01)。在MKN45细胞中沉默Notch2,可逆转miR-107抑制剂对细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-107在胃癌细胞中表达上调,可通过靶向Notch2促进MMP-9表达,促进胃癌细胞迁移和侵袭。

血浆Spetin9甲基化对结直肠癌的诊断和治疗监测作用

目的研究血浆Septin9甲基化对结直肠癌诊断和治疗监测的作用。方法收集入组结直肠癌病例和健康对照人群的血液样本进行血浆Septin9甲基化和血清癌胚抗原(CEA)检测,分析血浆Septin9甲基化与血清CEA对结直肠癌的诊断阳性率、治疗前后的动态变化以及两者与病例的临床病理因素之间的相关性。结果共收集35例结直肠癌病例和30例健康人群血液样本进行检测和分析。结直肠癌患者中血浆Septin9甲基化阳性率为74.3%,显著高于正常健康人群(P <0.001);经过手术切除或化疗后,血浆Septin9甲基化转阴率分别为75.0%、16.7%,两者比较差异有统计学意义(P=0.010);血浆Septin9甲基化与患者性别、年龄、肿瘤部位及TNM分期等临床因素无相关性(均P> 0.05)。血浆Septin9甲基化与CEA联合检测的阳性率为82.9%,明显高于单独检测血清CEA水平(P=0.034)。结论血浆Septin9甲基化可作为结直肠癌的诊断和监测的潜在指标,联合检测Septin9甲基化和血清CEA水平可显著提高结直肠癌的诊断阳性率。

ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性的影响及机制

目的研究ANXA2-siRNA转染对胃癌耐药细胞药物敏感性及信号通路激活的影响。方法采用ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞,通过RT-PCR和Western blot检测胃癌耐药细胞中耐药相关基因GST以及Bax的表达变化,应用MTT药敏实验检测胃癌耐药细胞对化疗药物敏感性的变化。采用Western blot检测ANXA2-siRNA转染SGC-7901/DDP胃癌耐药细胞后,MAPK及PI3K/Akt信号通路激活中P38、P38磷酸化水平、AKT以及AKT磷酸化水平的变化情况。结果 ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,无论在RNA水平还是蛋白水平上,耐药相关基因GST的表达水平显著降低,而Bax的表达水平明显上调。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞对化疗药物DDP和5-FU的IC50值显著降低,差异有统计学意义(P <0. 05)。与空白对照组和空白-siRNA组细胞相比,ANXA2-siRNA转染SGC7901/DDP细胞后,MAPK信号通路中,P38表达无明显变化,但P38磷酸化水平下降明显。在PI3K/Akt信号通路中,AKT表达无明显变化,但AKT磷酸化水平下降明显。结论 ANXA2-siRNA转染胃癌耐药细胞能够下调耐药相关基因的表达,降低胃癌细胞的耐药性,可能是通过影响MAPK及PI3K/Akt信号通路中P38和AKT磷酸化过程实现的。

DKK4增强结肠癌细胞5-FU耐药的作用和意义

目的:观察DKK4在结肠癌肝转移组织中的表达差异和DKK4基因对结肠癌细胞耐受5-FU的作用。方法:收集17例同时性结肠癌肝转移肿瘤组织,通过免疫组化分析原发灶和转移灶DKK4蛋白的表达差异。利用CRISPR-Cas9技术敲除人结肠癌SW480细胞DKK4基因,使用蛋白电泳和RT-PCR评估基因编辑效果,并分析DKK4表达对结肠癌细胞耐受5-FU杀伤的影响。结果:在17例结肠癌肝转移组织中,原发灶DKK4染色阳性率为20% (2/10),肝转移灶染色阳性率70% (7/10),提示肝转移灶DKK4蛋白表达明显高于结肠原发灶。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除人结肠癌SW480细胞DKK4基因,在含有5%、10% 5-FU的培养基中,WT-DKK4 SW480细胞可继续增殖,但DKK4-KO SW480细胞则随5-FU浓度增加而加速死亡。结论:结肠癌肝转移灶组织中DKK4表达更高,且DKK4表达水平对结肠癌细胞耐受5-FU杀伤有极为重要的影响,提示DKK4可能是影响肿瘤耐受5-FU化疗的重要因素和潜在治疗靶点。

构建光遗传学方法调控纹状体神经元活性的实验研究

目的 构建光遗传学方法特异性调控纹状体神经元活性的方法.方法 通过氯化钙转染方法包装慢病毒,通过慢病毒介导光敏感蛋白在小鼠脑内表达,利用免疫荧光的方法确定光敏感蛋白的定位,采用在体电生理记录系统确定光遗传方法的有效性.结果 免疫荧光显示慢病毒定位注射两周后能稳定将光敏感蛋白转入纹状体神经元内,不在其它细胞中表达,在体电生理显示激光能够显著的增加纹状体神经元的活性.结论 光遗传学方法能够有效的调节纹状体神经元的活性.

Habib 4X射频止血切割器在肝恶性肿瘤患者肝切除术中的应用

目的 探讨Habib 4X射频止血切割器（Habib4X）在肝恶性肿瘤切除术中的应用价值。方法 回顾性研究2009年2月至2013年6月在广州医科大学附属肿瘤医院胃肠肿瘤外科应用Habib 4X行肝切除的75例肝恶性肿瘤患者临床资料。其中男55例，女20例；平均年龄（53±12）岁；原发性肝癌49例，继发性肝癌26例。所有患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。患者采用气管插管全身麻醉，在距离肿瘤2—3cm处采用Habib 4X沿肿瘤边缘消融后行肝切除术。观察患者术中出血、输血情况，手术时间，术后ALT、AST、TB变化，术后住院时间及并发症情况。出院后患者接受随访，观察肿瘤复发及死亡情况。结果75例肝癌患者均顺利完成手术。术中出血量为（318±89）ml，输血率为7％（5／75），手术时间中位数为104（17—191）min，术后住院时间为（11±4）d。术后1d，ALT、AST、TB升至高峰，随后进行性下降，至术后9d肝功能基本恢复正常。术后出现胆瘘2例，均经加强引流后治愈。原发性肝癌患者1、3年复发率分别为6％（3／49）、10％（5／49），继发性肝癌患者分别为23%（6／26）、27%（7／26）。随访期间原发性肝癌和继发性肝癌患者病死率分别为4%（2／49）、27%（7／26），原发性肝癌患者中2例死于术后肝性脑病，继发性肝癌患者中7例死于肿瘤广泛转移。结论 在肝恶性肿瘤患者肝切除术中应用Habib 4X是一种安全、有效的治疗方法，有可能降低术后肿瘤复发率。

信号传导与转录激活因子3小干扰RNA纳米脂质体逆转胃癌细胞株顺铂耐药的研究

目的探讨负载信号传导与转录激活因子3（STAT3）小干扰RNA（siRNA）阳离子纳米脂质体（STAT3／DOTAPC—Lip）逆转胃癌耐药细胞株sGc7901州顷铂（DDP）对DDP耐药的作用及其机制。方法通过DDP梯度诱导法构建耐药胃腺癌细胞株SGC7901／DDP，DDP浓度1．0-30．0mg／L；利用细胞增殖抑制实验测定其耐药指数（RI）；采用薄膜挤出法制备STAT3／DOTAP．Lip（400、200、80nm挤膜），并测定其各项纳米表征，包括粒径、电位、siRNA包封率等；采用体外转染实验以及荷瘤裸鼠体内实验评价药物的体内外抗肿瘤效果（siRNA给药浓度为0．5mg／kg）。结果构建胃癌耐药细胞株SGC7901／DDP，其耐药指数为7．35。所制备的STAT3／DOTAP—Lip粒径为（111．4±9．6）nm，siRNA包封率为90．1％。STAT3／DOTAP—Lip在对SGC7901／DDP细胞株的体外细胞增殖抑制实验与小鼠体内抑瘤实验的结果显示，STAT3／DOTAP—Lip极大的逆转了SGC7901／DDP的细胞耐药性。较其他对照组，DDP和STAT3／DOTAP-Lip能明显抑制肿瘤生长（P〈0．05）。结论STAT3／DOTAP—Lip可以逆转SGC7901胃腺癌细胞株的DDP耐药。

PAC-1,L-OHP单用及联合用药对人结肠癌细胞的抑制作用

目的观察体外单用及两者联合应用半胱天冬酶原活化复合物-1(PAC-1)和奥沙利铂(L-OHP)对人结肠腺癌细胞株HCT116、SW480、HT-29,SW116和SW620的生长抑制作用。方法 MTT法检测两药单用和合用前后对细胞增殖活性的影响。结果 PAC-1和L-OHP单用对5种人结肠癌细胞均有明显的诱导凋亡和增殖抑制作用,并呈时间和浓度依赖性;PAC-1对上述细胞的半数抑制浓度(IC50)之间无统计学差异(P>0.05),L-OHP对上述细胞的的IC50值有统计学意义(P<0.05)。PAC-1与L-OHP联用(同时给药)产生拮抗作用(CI(1)。结论 PAC-1与L-OHP单用均对人结肠腺癌细胞有抑制作用,但各细胞株对两药的敏感性不同,两者联合应用(同时给药)起拮抗作用。