TIPE2在T细胞介导的心脏移植急性排斥反应中的潜在作用

目的探讨作为免疫负调控因子的肿瘤诱导坏死因子-α-诱导蛋白8样因子-2(TIPE2)在T细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中的潜在作用。方法通过苏木素-伊红(HE)染色和流式细胞术确定心脏移植物中的主要免疫排斥细胞,免疫荧光染色确定TIPE2与脾细胞间的关系,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测心脏移植物TIPE2及细胞因子表达量。结果小鼠心脏移植7天后心脏组织出现明显免疫细胞浸润及心肌组织的破坏,流式细胞术检测心脏移植物中CD4^+和CD8^+T细胞增高,免疫荧光显示移植小鼠脾细胞中的CD4^+和CD8^+T细胞表达TIPE2,而心脏移植物在第7天时TIPE2和细胞因子表达量均明显增高。结论 TIPE2与在T细胞介导的小鼠心脏移植急性排斥反应中可能发挥着潜在作用。

对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良

[目的]将流式细胞术染色方法进行改良用于T细胞膜质蛋白共定位的共聚焦显微镜检测,在共定位表达于细胞膜上的CD4和细胞质内表达的TIPE2蛋白较常规镜检免疫荧光染色法可提高实验效率。[方法]取小鼠脾脏T细胞,用流式细胞术的染色方法代替实验室常规免疫染色法,对细胞膜上的CD4与细胞质内的TIPE2蛋白进行染色,制片并在激光共聚焦显微镜下观察。[结果]小鼠脾脏CD4+T细胞上出现了TIPE2蛋白的共表达,符合实验预期,同时实验效率从原有10%提高到90%。[结论]采用该染色方法后突破了常规免疫荧光染色必须要在载玻片上进行的局限,简化了操作,保证了实验的有效性,提高实验效率。