直接多肽结合试验组合人细胞系活化试验预测皮肤致敏物的探讨

目的建立直接多肽结合试验(DPRA)和人细胞系活化试验(h-CLAT)的皮肤致敏组合检测方法,对化学品及植物提取物的致敏性进行初筛。方法选择12种化学品和7种植物提取物为受试物,把不同受试物分别与两种肽(半胱氨酸肽和赖氨酸肽)共孵育24 h,采用高效液相色谱法分析反应后多肽消耗。同时将不同浓度的受试物与体外培养的人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)共孵育24 h,通过流式细胞仪检测暴露后细胞表面标志物CD86和CD54的变化。再进一步比较DPRA和h-CLAT预测结果的一致性。结果 DPRA方法和h-CLAT方法准确区分了12种化学品的皮肤致敏性,其中2种判定为阴性,10种判定为阳性,两种方法检测结果一致。DPRA对植物提取物致敏性的预测中,除绿茶提取物无法判定外,其余6种均为皮肤致敏疑似物质。h-CLAT预测中,除绿茶提取物、马齿笕提取物和人参果提取物为非致敏物,其余4种植物提取物为致敏物。DPRA与h-CLAT预测的一致性为0.57。结论 DPRA与h-CLAT的简单组合可以实现对单一化合物的准确预测,对于复杂混合物可实现初步预测,确认需要进一步组合其他方法。

《日用化学品安全评价技术创新——替代方法》专题六 利用牛角膜浑浊渗透性方法检测纸质卫生用品对皮肤刺激性研究

利用牛角膜浑浊渗透性方法(BCOP)代替动物实验检测纸质卫生用品的皮肤刺激性。选取进出口检验样品65批,采用标准和改良前处理两种方案的BCOP方法对样品进行测试,并与动物实验比较。结果表明,单次皮肤刺激实验检测的65份纸质产品全部为非刺激性,而多次皮肤刺激实验和BCOP方法检测中56份样品结果为非刺激性,9份产品结果为刺激性。BCOP方法可代替动物实验用于纸质卫生用品皮肤刺激性的检测,模拟人体实际使用情况对样品进行前处理的BCOP方法可提高检测敏感性。

鸡胚尿囊膜模型在化妆品毒性和功效评估中的应用

综述了鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)作为一种独特的测试系统在化妆品原料和产品毒性检测、功效评估和机制研究中的应用。重点介绍了CAM的优缺点,不同CAM测试方案的差异和在眼刺激组合策略中的使用建议。讨论了基于CAM的方法在眼刺激、光毒性、皮肤刺激、急性毒性和遗传毒性检测,以及在血管生成促进和抑制、抗氧化、抗刺激等功效评估中的应用。最后提出基于CAM的测试方法可替代传统动物试验,为化妆品评测提供可靠的数据支持。

牛角膜浑浊渗透试验方法预测眼刺激性的研究

目的建立牛角膜浑浊及渗透试验(BCOP)方法并评价其眼刺激性预测能力。方法采用15种标准眼刺激化学参考物建立BCOP实验方法,并对45种市售个人护理产品进行眼刺激性预测,测定经测试物暴露后的角膜混浊度和荧光素纳渗透性变化,得到体外评分值。同时以体内兔眼试验为对照进行比较。结果经15种已知分类的眼刺激化合物检测表明,BCOP方法可区分无刺激性和严重刺激性物质,与体内实验一致。对未知样品的测试表明BCOP对严重/腐蚀性的预测敏感性为100%(3/3),对中度-轻度刺激性的预测敏感性为95.8%(23/24),对无刺激性的预测特异性为83.3%(15/18)。与体内试验总的分类一致性达到91%(41/45),阳性预测值为89.7%(26/29),阴性预测性为93.8%(15/16)。假阳性率为16.7%(3/18),假阴性率为3.7%(1/27)。结论 BCOP替代方法可用于化学品分类和作为整合策略的主要方法用于个人护理品的眼刺激评价。