枇杷外泌体及细胞液基于体外水平的护肤功效研究

探索枇杷(Eriobotrya japonica L.)外泌体及细胞液对体外人皮肤细胞的生物活性,为其在护肤品上的开发提供科学依据。采用超高速离心法和机械破碎法分别获得枇杷外泌体和细胞液,以CCK8法检测不同浓度枇杷叶来源外泌体、枇杷细胞悬浮培养来源的外泌体及其细胞液对人皮肤成纤维细胞(HSF)存活率的影响;对HSF细胞采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理进行炎症造模,选取显著促进细胞存活率的浓度,后续开展添加外泌体或细胞液处理,进行细胞凋亡及迁移能力检测。对黑色素瘤细胞(A375)开展外泌体或细胞液处理,进行黑色素含量及酪氨酸酶活性检测。结果表明:每克枇杷叶含8.54×10^(9)个外泌体颗粒,粒径86.78 nm;每毫升(约1 g)枇杷悬浮细胞上清液中含8.67×10^(8)个外泌体颗粒,粒径80.39 nm。浓度为20μg/mL时,枇杷叶外泌体、枇杷悬浮细胞外泌体、枇杷悬浮细胞液均显著提高体外HSF细胞存活率(P<0.05)。与阳性对照(LPS处理)相比,枇杷叶外泌体浓度为20μg/mL,枇杷悬浮细胞外泌体浓度为20μg/mL和枇杷悬浮细胞液浓度为10μg/mL时,均极显著降低LPS处理引起的细胞凋亡(P<0.01),均显著促进细胞迁移(P<0.05)。浓度为5μg/mL的枇杷悬浮细胞外泌体和枇杷悬浮细胞液均可显著降低体外A375细胞黑色素含量,枇杷细胞液还显著降低酪氨酸酶活性(P<0.05)。

临夏不同产地款冬花有效成分与矿质元素含量的相关性研究

采用超高效液相色谱法分析了临夏州10个产地款冬花中款冬酮、芦丁、绿原酸类(绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C)的含量,采用电感耦合等离子体光谱法和电感耦合等离子体质谱法测定了款冬花的28种矿质元素含量,结果表明:临夏款冬花中绿原酸类成分的含量均值为43.25 mg/g,是含量较高的主要有效成分,样品中存在款冬酮达标而绿原酸类成分较低的现象,建议将绿原酸类成分与款冬酮一起作为检测指标列入药典;有效成分高的样品中N、Na、K、P、Cu、Rb、Mo的含量较高,Ca、Fe、Al、Ti、Li、Cr、Mn的含量较低,而有效成分较低的样品中N、P、K的含量较低,Ca、Al含量较高。根据双变量分析的结果,临夏州的款冬花在种植过程应增施N、P、K肥,同时应避开Ca、Al含量高的土壤。

三角梅属植物的生物学研究进展

三角梅属(Bougainvillea)属于紫茉莉科(Nyctaginaceae),有14个种。该文综述了三角梅属植物的生物学特性,展望了该属植物在增进人类健康、丰富精神生活以及保护环境等方面的应用前景。三角梅属植物因其苞片的形态色彩以及植株形态的变化而具有独特的观赏价值。三角梅属植物不仅作为花卉备受关注,近年来,有关三角梅其它应用价值的研究使人们对其有了新的认识。从三角梅叶片中分离得到具有类胰岛素功能的松醇(D-pinitol)对替代胰岛素治疗糖尿病以及减轻胰岛素疗法带来的副作用具有重要意义。研究还表明,三角梅叶片和根中至少含有2种抗病毒蛋白——BAPI和Bouganin,它们对于多种植物病毒具有不同程度的抑制作用。这些研究结果对于开发低毒高效的生物农药具有十分积极的意义。三角梅还是研究甜菜色素代谢的重要模式植物之一,其甜菜色素的种类和含量之丰富为开发安全的天然食用色素开辟了广阔的前景。这些相关研究展示了三角梅作为资源植物的多元价值,为进一步开发三角梅的观赏、医药、生物农药价值和作为天然食用色素以及发挥环境修复作用提供了充分的科学依据。

3个三角梅品种中类黄酮的毛细管电泳分析比较研究(英文)

甜菜色素和属于类黄酮的花青素在自然界排斥分布,然而我们在甜菜色素代谢类型植物三角梅中发现积累多种类黄酮。为了进一步证实这一现象,本研究对3种白花三角梅（Bougainvillea sp.,Bougainvillea glabra‘A l-ba,’and Bougainvillea‘White Stripe’）中的5种类黄酮（槲皮素、山奈酚、异鼠李素、杨梅素和芹菜素）采用毛细管电泳分析方法进行了调查。结果表明,只有3种类黄酮：槲皮素、山奈酚、异鼠李素被检测出。3个材料中,被探测出来的总黄酮含量最高的是Bougainvillea glabra‘Alba,’1749μg.g-1,Bougainvillea‘White Stripe’1 241μg.g^-1以及B.sp1312μg.g^-1。被探测出来的3种黄酮中,槲皮素含量最高8521 114μg.g^-1,异鼠李素161-628μg.g^-1,而山奈酚之被检测出微量。本研究对于定性定量可食用的三角梅中的类黄酮组成是十分有意义的。甜菜色素和类黄酮在三角梅中的积累关系以及可能的功能本研究也做了讨论。

不同育性三角梅品种之间的形态、花粉活力、造访昆虫及黄酮醇含量的比较研究（英文）

三角梅高度不育,到目前为止其不育机理仍未理解透彻。本研究通过比较三角梅中可育和不育品种之间的生殖器官特征、花粉的活力、造访昆虫以及花粉中的类黄酮积累差异,为揭示其不育机理提供更多的证据。四个可育和两个不育三角梅品种的花萼管比较结果显示,可育品种的花萼管饱满呈长卵形,而不育品种的花萼管细长管状。可育品种的花粉形态均匀,而不育品种的花粉大小不一。花粉活性结果显示,可育品种的花粉萌发率在11. 1%～46. 5%,不育品种的花粉在相同的培养条件下几乎不萌发。在可育和不育品种间,共有七种昆虫造访,但昆虫的种类没有表现出明显的差异和偏好。类黄酮积累调查结果显示山奈酚/槲皮素糖苷衍生物是花粉中的主要类黄酮组分。利用花粉荧光染料DPBDA对四个可育和两个不育三角梅品种花器官中的黄酮醇含量比较显示,可育材料中的两种黄酮醇的含量显著高于不育材料,花粉管尖端的荧光信号相比花粉管的其他位置更丰富。我们推测黄酮醇含量差异,特别是槲皮素含量可能对三角梅花粉的活力有一定的积极作用。

三角梅7个品种的矿质元素的分析研究(英文)

三角梅在食品保健环保方面的价值日渐引起注意。本研究用电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)对7个三角梅栽培种盛花期的微量元素和大量元素在花和叶中的分布特点作了调查,以期筛选出适合食用和园林环保不同用途的品种。结果表明有益健康的元素和重金属元素积累在品种间存在显著差异。叶中重金属含量最高的品种是B.peruviana‘Thimma’(B.p),其次是B.glabra‘S’(B.g‘S’),重金属积累最少的是B.‘Raspberryice’(B.‘R’)的叶.而花中重金属积累最多的品种是B.peruviana‘Thimma’(B.p),最少的是B.glabra‘Alba’(B.g‘A’).而主要有益元素钙、锌和铁含量最高的品种分别是B.g‘M’和B.b‘C’的花中钙含量最高,B.b‘C’和B.‘Z’的花中以及B.p-n的叶中锌含量最高,B.‘Z’的花和B.'R'的叶中铁含量最高。综合考虑,三角梅品种B.'R'的花比较适合用于在食品保健业的开发而品种B.p更适合于种植在高含量铅、镉、砷等重金属污染的环境用于生物环境修复。

三角梅甜菜色素代谢酶4,5-DOPA-dioxygenase基因的分离和表达

甜菜色素在自然界中与花青素排斥分布,主要在石竹目(Caryophyllales)的9个科的植物中合成。虽然甜菜色素的生物合成已经有很多猜测,酶催化的生物合成关键步骤仍然缺少足够的实验数据支持。本研究首先从三角梅属的3个种(B.spectabilis‘Splendens’,B.buttiana‘Mahara’,B.pruviana‘Thimma’)的苞片中分离了甜菜色素合成途径末端的关键酶4,5-DOPA-dioxygenase完整的cDNA,大小分别为902、899、899 bp,分别编码298、297、297个氨基酸,并对这3个同源基因与已经报道的来自B.glabra的该基因进行比较。推测的分子量分别为33 758、33 076、33 233 u,等电点(pI)分别是5.62、5.54和5.94。对分属于4个种(B.spectabilis‘Splendens’,B.buttiana‘Mahara’,B.glabra‘Alba’,B.pruviana‘Thimma’)花的4,5-DOPAdioxygenase的Real-time分析结果表明,该基因在4个种的花中,种间变化较大,总体趋势是开花早期该基因的表达较弱,盛花期表达迅速增强,后期又呈现下降。其中,在红色的B.buttiana‘Mahara’中,该基因的表达最强,在白色的B.glabra‘Alba’中表达最弱。这些结果表明,该基因的表达与花的颜色鲜艳程度直接相关。

向日葵细胞质雄性不育性的机制与利用

向日葵杂种生产采用三系配套系统完成。因此,向日葵细胞质雄性不育性的研究备受关注。其中研究较为清楚的是PET1细胞质,其不育机理是线粒体DNA重组形成嵌合基因,编码新的多肽,导致小孢子的败育。然而,这些基因如何影响小孢子发育的生理机制仍不清楚,有待进一步深入研究。丰富多样的向日葵CMS会大大降低因遗传单一性给大规模生产带来的风险;未发现恢复系的CMS可以用于无花粉观赏向日葵杂交种的生产。

三色(Bougainvillea peruviana ‘Thimma’)在转录水平的甜菜色素和类黄酮积累比较（英文）

Bougainvillea peruviana‘Thimma’属于三角梅属,该属植物积累甜菜色素而不是像绝大多数高等植物一样积累花青素。该材料特征同株出现3种颜色:白色、洋红色和白/洋红相间。本研究首次使用3种花色特征的花序(红色Yp、混合色的Ym、白色Yw)作为研究材料进行高通量测序。并通过real-time PCR方法对探测到的花色代谢基因进行验证。共获得平均长度为616 bp的73 325条基因。3种材料的差异显示基因(DEGs)中有327个被注释到甜菜色素合成基因,308个被注释到类黄酮合成基因,466个被注释到花青素合成基因。我们选出8个基因:4个甜菜色素合成基因(PPO,CYP76AD1,c DOPA-5-GT,DODA)和4个花青素合成基因(FLS,DFR,LDOX,3-GT)进行验证。其中,4个甜菜色素合成基因在3种花色材料中的表达较好的正相关于甜菜色素含量。花青素合成途径末端的3个基因(DFR,LDOX,3-GT)在B.peruviana中首次被验证。real-time PCR的验证结果很好的吻合转录组测序的结果。同时,B.peruviana也提供了一个很好的三角梅属植物的生理、生化和分子生物学研究的工具,有效的摒除其他生物学干扰。

甜菜色素的生物学研究进展

甜菜色素(Betalains)是一类以六碳结构为骨架的水溶性色素,存在于石竹目Caryophyllales的绝大部分科和一类真菌中。目前已知甜菜色素大约有75种,都属于季胺型生物碱,可以分为两类:甜菜黄素(Betaxanthin)和甜菜红素(Betacyanin)。甜菜色素除了赋予花、果、叶着色,吸引昆虫,提高植物本身抗逆能力等外,也具有优良的抗氧化作用。甜菜色素的合成代谢始于酪氨酸,是由4~5个关键酶催化反应和一系列自发反应构成的反应网络。本文结合国内外最新研究进展,对甜菜色素理化性质、生理功能、合成以及应用做较为全面的综述。

蝴蝶兰花梗初代培养研究

为建立蝴蝶兰"空港甜心"品种花梗芽的高效诱导体系,对影响其营养芽诱导的主要因子,包括消毒时间、花梗不同位置芽、培养基、外源激素及培养温度进行研究。结果显示:以幼嫩花梗中半木质化的花梗II为诱导材料,用0.1%HgCl2溶液消毒处理10min,接种于添加5mg.L-1的6-BA的Hyponex培养基中,并于25/18℃中培养,营养芽诱导及生长最佳。

不同时期大叶苦丁茶(Ilex latifolia Thunb.)不同器官中咖啡酰奎宁酸类成分的毛细管电泳分析（英文）

大叶苦丁茶(Ilex latifolia Thunb.)含有丰富的咖啡酰奎宁酸。在本研究中,运用胶束电动毛细管色谱法,测定了在不同发育时期的大叶苦丁茶不同器官中的咖啡酰奎宁酸含量。大叶苦丁茶的不同器官在不同发育时期的咖啡酰奎宁酸含量有着显著的变化。在叶片中,10天叶龄的叶的咖啡酰奎宁酸含量是19.78 g/100 g,而当叶龄达到12月时,其中的咖啡酰奎宁酸含量已经降为1.41 g/100 g。随着发育时间的增长,雌花、雄花中的含量变化也有类似的变化。雌花(果)和雄花在发育期为10天时的咖啡酰奎宁酸含量高:分别20.29 g/100 g和18.06 g/100g,随后在雌花发育成的7个月果实中下降到0.16 g/100 g,而在40天期接近脱落的雄花中其含量降为10.36 g/100 g。大叶苦丁茶的器官中,除了嫩叶,雄花由于高含量的咖啡酰奎宁酸和较多的生物量,也是一种好的咖啡酰奎宁酸来源材料。本文首次报道了大叶苦丁茶的花中含有大量的咖啡酰奎宁酸。MEKC方法也是首次被用于苦丁茶中的咖啡酰奎宁酸类成分的测定,使用这种方法,大叶苦丁茶中的6种咖啡酰奎宁酸成分在40分钟内完全分离。相较于以前文献中报道的高效液相色谱法,本文为苦丁茶中的咖啡酰奎宁酸的质量控制提供了一种新的检测方法。

雄性不育系“NEWFREE”的特点及其在观赏向日葵中的利用

雄性不育(male sterility)是向日葵杂种优势利用的重要途径。目前,全世界均是利用细胞质雄性不育性生产商用杂交种,因此,向日葵雄性不育性的发现和利用是育种学家们研究的重要课题。本研究采用了不同地理来源的20份自交系材料作育性试验,结果表明,“NEWFREE”雄性不育系具有与PET1完全不同的恢复系和保持系,很可能是不同于PET1的细胞质类型。“NEWFREE”不育系有多个不同的保持系,然而相应的恢复系仍未找到。这个不育系的育性表现比较稳定,有可能用于无花粉观赏向日葵杂交种的生产。

超声波萃取番橄榄挥发油化学成分的GC-MS分析

采用超声波法萃取番橄榄不同时期的果实和叶片挥发油,用气相色谱-质谱法对挥发油中各种化学成分进行分析和鉴定。共鉴定出48个化合物,其中37个成分为在该植物中首次报道。其果实挥发油主要成分有:1R-α-蒎烯,22,23-二氢豆甾醇,β-蒎烯,2,2'-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚),维生素E;叶片挥发油主要成分有:维生素E,22,23-二氢豆甾醇,1R-α-蒎烯,三十一烷,植醇,β-石竹烯。黄熟的果实中萃取的挥发油的总量明显高于青果,而不同时期的绿叶中萃取的挥发油总量则较为接近。

42个三角梅品种的花粉形态比较分析

采用扫描电镜对三角梅42个品种的花粉形态作观察,参考已发表的三角梅花粉育性的数据,探究花粉形态和花粉育性的联系。采集42个三角梅品种的花粉,人工干燥后进行电镜形态观察,采集3000倍下的近极面观、远极面观、赤道面观、侧面观以及10000倍下的外壁网脊等图片,确定三角梅不同品种花粉的整体外观形态。测定花粉的大小、萌发沟数量,对比不同品种和不同花粉部位的芽突数量。三角梅花粉呈现单侧凹陷、单侧突出的凸饼状结构,三角梅不同品种的花粉粒直径在21.64~31.14μm之间。少数品种的萌发沟有3个,萌发沟少于3个的品种主要集中于花粉育性低的品种中。花粉表面网脊状褶皱,褶皱上芽突数量不等,不同品种有所差别。芽突数量与植株花粉育性关系密切,花粉育性高的品种花粉表面芽突数量多于花粉育性低的品种。花粉粒表面芽突数量减少,降低三角梅花粉的附着能力,这有可能是导致该品种花粉育性极低的原因之一。

藜麦营养学、生态学及种质资源学研究进展

藜麦Chenopodium quinoa (2n=4x=36)属于石竹目藜属Chenopodium,起源于南美洲安第斯山区,在该地区有几千年的栽培历史。近年来,因其营养的全面性和广泛的生态适应性引起世界范围的关注,开始了从印第安主粮到一种战略资源的蜕变之路。本文综述近年来藜麦的营养学、生态学和种质资源学研究进展与亟待解决的问题,并对藜麦的应用前景以及供求现状提出对策和展望。

应用RAPD技术辅助蝴蝶兰辐射育种

应用RAPD技术对蝴蝶兰辐射诱变苗进行分析。结果表明,对蝴蝶兰5种不同形态的诱变苗和对照苗进行PCR扩增,13个引物所产生的RAPD谱带大小为200～3 000bp,共扩增77条带,多态性带61条,多态率79.22%。13个引物平均扩增的带数为5.92,引物S0036最多,为9条带。比较诱变苗与对照苗谱带,两者有差异,表明诱变苗是由基因突变引起。

苦丁茶中绿原酸及其异构体的提取变化分析

以富含绿原酸类成分的苦丁茶(Ilex kaushue)为材料,使用溶剂甲醇、乙醇、丙酮和水,结合超声波提取、水浴提取、回流提取等方法对绿原酸及其异构体的提取效率及提取后各异构体的变化进行分析。应用超高效液相色谱法可使苦丁茶的6种绿原酸类成分及咖啡酸在6 min内实现分离。提取结果表明,丙酮作为提取溶剂,在采用超声波和水浴提取时能获得较高的提取效率,易获得较多总量的绿原酸类成分和高含量异绿原酸A。而最常用的溶剂乙醇并未达到理想的提取效果。在不同溶剂的回流提取中,虽然提取的绿原酸类成分总量接近,但异绿原酸A和异绿原酸C含量有较大差异。醇溶液特别是乙醇溶液的回流提取使异绿原酸C的量大幅增加,而相应的异绿原酸A的量大幅减少,表明在醇加热条件下,异绿原酸A转化为异绿原酸C,这为获得抗氧化性更强的异绿原酸C提供了新思路。

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。

7个品种变叶木过氧化物酶同工酶分析

本试验对7个品种变叶木的形态特征进行比较,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对各品种过氧化物酶同工酶进行分析。结果表明,各品种的过氧化物酶同工酶谱不一;7个品种变叶木共有14条谱带,2号谱带最多为11条,5号谱带最少为6条;其谱带分为3个区(A=0～0.18,B=0.18～0.35,C=0.35～0.5);并对7个品种的亲缘关系进行聚类分析。