针刺干预对VaD大鼠Caspase-3通路相关蛋白的影响

目的 观察针刺对血管性痴呆(vascular dementia,Va D)大鼠学习记忆能力及半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)-3通路相关蛋白的影响及其机制研究,探索针刺防治Va D的新靶点。方法 健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,模型组和针刺组大鼠制备Va D模型,针刺组选取百会和双侧肾俞、丰隆进行针刺干预2周,假手术组和模型组不予其他干预。观察各组大鼠的行为学、海马CA1区形态学改变,检测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax) m RNA及蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01),大鼠海马组织内Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白的表达明显增加(P<0.01),Bcl-2 m RNA及蛋白的表达明显下降(P<0.01)。与模型组比较,针刺组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),大鼠海马区Bax、Caspase-3 m RNA及蛋白表达明显下降(P<0.01),Bcl-2 m RNA及蛋白水平明显增加(P<0.01)。结论 针刺能提高Va D大鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节Caspase-3通路相关蛋白表达、抑制神经元凋亡相关。

工程监理安全责任与刑事责任的扩大化及应对建议

监理单位在施工现场安全工作中,承担了与其权利严重失衡的安全责任;当出现安全责任事故时,又会因种种原因承担刑事责任。从监理安全责任和刑事责任切入,通过具体案例分析监理安全责任和刑事责任扩大化的原因,并提出了应对措施:进一步明确安全监理内容和范围,将责任范围与费用挂钩;在事故认定中应综合考虑各方情况审慎对监理单位进行处罚;提高监理人员的专业技能,加强上岗人员的审核考查等。

基于TLR-4/MyD88/NF-κB通路探讨针刺改善血管性痴呆大鼠认知功能的机制

目的研究针刺通过调控Toll样受体4(TLR-4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路改善血管性痴呆大鼠认知功能的机制。方法将36只SPF级SD雄性大鼠采用随机数表法分成假手术组(A组)、模型组(B组)和针刺组(C组),每组12只。B组和C组采用改良两血管结扎法制备血管性痴呆模型,A组仅手术分离双侧颈总动脉、不结扎。C组采用针刺“百会”“肾俞”“丰隆”穴进行干预,每个疗程6天,共2个疗程;A组、B组正常喂养,不进行干预。每组大鼠进行Morris水迷宫实验,评估其学习记忆能力;ELISA测定大鼠血清IL-1β、TNF-α水平;Real-time PCR测定海马TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA的表达;免疫组化测定大脑Iba1、NF-κB蛋白的阳性表达;Western blot测定海马IL-1β、TNF-α相对表达水平。结果与B组相比,C组大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增多(P<0.05);血清中TNF-α、IL-1β浓度明显降低(P<0.01);海马中TLR-4、MyD88、NF-κB mRNA的表达量明显减少(P<0.01);大脑的Iba1、NF-κB蛋白的阳性表达明显减少(P<0.01);海马中的TNF-α、IL-1β相对表达量明显减少(P<0.01)。结论针刺“百会”“肾俞”“丰隆”穴可以改善血管性痴呆大鼠的认知功能障碍,其机制可能与通过抑制TLR-4/MyD88/NF-κB信号通路活性,从而抑制神经炎性反应有关。

电针对阿尔茨海默病模型大鼠GSK3β信号通路相关蛋白的影响

目的观察电针"百会""肾俞"穴对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区GSK3β信号通路相关蛋白的影响及机制研究。方法30只SPF级SD雄性大鼠随机分成假手术组、模型组和电针组,每组10只。除假手术组外,其余各组大鼠双侧海马区各注射5μLβ淀粉蛋白25-35(Aβ25-35)制备AD模型,假手术组给予同等剂量生理盐水注射。假手术组、模型组正常喂养,不做干预处理,电针组选取百会及肾俞穴(两侧肾俞穴交替选择)进行电针治疗,频率2 Hz,电流1 mA,每日1次。每个疗程6天,共2个疗程,两个疗程间隔1天。治疗结束后第2天上午8点开始Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)检测大鼠学习记忆能力,行为学实验结束后第2天取材。苏木精-伊红染色(Hematoxylin eosin staining,HE)观察海马CA1区病理形态改变。免疫组化法(Immunohistochemical method,IHC)检测大鼠海马区Tau蛋白磷酸化的表达,及糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase3β,GSK3β)信号通路相关蛋白表达。免疫印迹法(Western blot,WB)检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、GSK3β相关蛋白的表达。聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测AKT、GSK3βmRNA的表达。结果与假手术组相比:模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数明显减少(P<0.01),目标象限停留时间明显缩短(P<0.01);模型组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显提高(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显提高(P<0.01);模型组PI3K(P85)、AKT(Ser473)、GSK3β(Ser9)蛋白相对表达量降低(P<0.05);模型组AKT mRNA表达水平明显降低(P<0.01),GSK3βmRNA表达水平明显提高(P<0.01)。与模型组相比:电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),目标象限停留时间明显延长(P<0.01);电针组海马区Tau蛋白磷酸化水平明显降低(P<0.01),GSK3β蛋白表达水平明显降低(P<0.01);电针组PI3K(P85)、AKT(Ser473)、GSK3β(Ser9)蛋白相对表达量增加(P<0.05);电针组AKT mRNA表达水平明显提高(P<0.01),GSK3βmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论电针治疗能够有效改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与影响GSK3β信号通路相关蛋白表达从而抑制Tau蛋白磷酸化有关。

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨电针对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

目的:观察电针“肾俞”“丰隆”穴对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力的影响,并基于Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路探讨其作用机制。方法:60只大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾组、化痰组、补肾化痰组。除假手术组外,其余组双侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ)25-35造模。补肾组、化痰组、补肾化痰组分别电针“肾俞”单穴、“丰隆”单穴及“肾俞”“丰隆”双穴。Morris水迷宫(MWM)检测学习记忆能力;HE染色、尼氏染色观察海马病理形态;ELISA检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6、IL-10浓度;RT-PCR检测海马TLR4、MyD88、NF-κB p65、TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达;Western Blot检测海马TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达。结果:与模型组比较,其余各组大鼠平均逃避潜伏期显著减少(P<0.01),平均穿越平台次数显著增加(P<0.01);海马神经元层次清晰,神经元相对表达显著增加(P<0.01);血清TNF-α、IL-1β、IL-6浓度显著减少(P<0.01),IL-4、IL-10浓度显著增加(P<0.01);海马TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA相对表达量显著减少(P<0.05),海马TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量显著减少(P<0.01)。结论:电针可改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调TLR4/MyD88/NF-κB信号通路抑制炎症反应有关。

平台模式下合同风险全过程管理研究合同签订前阶段

平台模式带给了平台型勘察设计企业更多的业务资源以及签订合同的“捷报”;另一方面,合同数量的陡增导致企业合同风险管控压力加大,合同风险管理问题也逐渐暴露出来。文章聚焦于合同签订前的风险,在对平台型勘察设计企业的合同风险客观识别的基础上,构建相对完善的合同风险管理体系,制定可落地实施的风险管控措施,降低合同风险的发生概率,赋能平台用户,提升品牌形象及用户体验。

《黄帝内经》“异法方宜、杂合以治”临床治疗思想探析

《黄帝内经》作为中医学理论体系之渊薮,其所蕴含的“异法方宜、杂合以治”思想是中医治疗疾病的特色之一。分别从因时、因人、因地、因病、因治制宜角度探讨“异法方宜”治疗的内涵,并提出“杂合以治”是体现“异法方宜”治疗思想的有效措施,即以整体观念与辨证论治相结合为出发点,将药物疗法与非药物疗法联合起来,多途径、多手段内外兼治,以达到治病求本、阴平阳秘的目的。以“异法方宜、杂合以治”指导临床实践,可为临床诊疗提供新思路。

电针通过调节PI3K/AKT信号通路改善AD大鼠学习记忆能力

目的观察补肾化痰电针法对Aβ_(25-35)所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力的影响。方法SPF级SD雄性大鼠40只,随机分为对照组、假手术组、模型组和电针组,每组10只。模型组和电针组大鼠双侧海马各注射Aβ_(25-35)5μl造模,对照组和假手术组给予同等剂量生理盐水。对照组、假手术组、模型组正常喂食,不做干预处理;电针组给予15min的补肾化痰电针法治疗。Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)检测大鼠学习记忆能力;尼氏染色观察大鼠海马区病理改变;免疫组化法(Immunohistochemical method,IHC)检测大鼠海马区PI3K、AKT蛋白的表达;TUNEL法(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)检测大鼠脑内细胞凋亡情况;聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测PI3K、AKT mRNA的表达。结果与对照组、假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.01),穿越平台次数明显减少(P<0.01),目标象限停留时间明显缩短(P<0.01),海马神经元相对表达量明显减少(P<0.01),海马区PI3K、AKT蛋白相对表达量明显减少(P<0.01),凋亡细胞相对表达量明显增多(P<0.01),PI3K、AKT mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。与模型组相比,电针组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01),目标象限停留时间明显延长(P<0.01),海马神经元相对表达量明显增加(P<0.01),海马区PI3K、AKT蛋白相对表达量增加(P<0.05),大鼠脑内凋亡细胞相对表达量明显减少(P<0.01),海马区PI3K、AKT mRNA表达水平提高(P<0.05)。结论补肾化痰电针法可能通过调节PI3K/AKT通路有效改善AD大鼠学习记忆能力。