三种李斯特菌菌体蛋白提取方法的比较

通过对3种李斯特菌菌体蛋白提取方法主要是破壁方式的比较,找到一种可高效提取李斯特菌菌体蛋白的方法,为该菌的深入研究提供可靠技术。以绵羊李斯特菌新鲜液体培养物为材料,收集菌沉淀,分别选用3种破壁方式破除细胞壁,三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法沉淀破壁液中的菌体蛋白,采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western-blot分析所得菌体蛋白。溶菌酶-超声破壁-TCA-丙酮沉淀法提取得到的李斯特菌菌体蛋白SDS-PAGE条带清晰丰富,Western-blot条带特异。溶菌酶-超声破壁-TCA-丙酮沉淀法可有效提取李斯特菌菌体蛋白,满足常用蛋白分析技术的要求,是一种提取李斯特菌菌体蛋白的可靠方法。

双歧杆菌对2型糖尿病模型大鼠干预效果观察

目的观察双歧杆菌微生态制剂对2型糖尿病模型大鼠糖代谢、脂代谢和肠道菌群结构的干预效果。方法实验大鼠按体重随机分为4组,空白对照组以基础饲料喂养,模型对照组、双歧杆菌低剂量组和高剂量组以高脂高糖饲料喂养,同时低、高剂量组每日灌胃给予双歧杆菌微生态制剂4和12 ml/(kg·d),6周后腹腔注射小剂量链脲佐菌素(20 mg/kg),继续灌胃2周后,进行口服葡萄糖耐量(OGTT)试验,随后处死大鼠,采集血清和粪便,测定胰岛素和血脂含量,T-RFLP技术分析大鼠肠道菌群结构变化。结果低剂量和高剂量微生态制剂组与模型对照组相比,OGTT试验中1 h和2 h血糖明显降低(P<0.01);胰岛素敏感指数显著增加(P<0.05);血清FFA、TG、LDL-C含量均降低(P<0.05),HDL-C含量升高(P<0.01);低剂量组和高剂量组肠道中双歧杆菌含量明显增加(P<0.05),肠道其余5种菌含量均无显著差异。结论双歧杆菌微生态制剂能有效改善2型糖尿病造模过程中大鼠的糖脂代谢紊乱,增加肠道双歧杆菌数量。

真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂产品技术审评要点

真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定试剂盒人血清、血浆样本中真菌(1-3)-β-D葡聚糖浓度,临床上主要用于侵袭性真菌感染的辅助诊断。根据《体外诊断试剂注册与备案管理办法》、标准及指导原则等文件的要求,文章概述了该产品在技术审评过程中应关注的要点,以期帮助注册申请人更好地把握注册申报的要求。