单核细胞增生李斯特氏菌的PCR检测方法

研究比较了裂解法、热煮沸法、试验盒法提取单增李斯特氏菌DNA的效果 ,认为Promega试剂盒法提取的DNA ,得率高、纯度好。同时根据单增李斯特氏菌的毒力相关基因的 5对引物 ,进行了引物的特异性研究 ,结果发现inlA引物、inlB引物、plcA引物特异性好 。

Bt棉棉子中Bt蛋白定量检测方法建立及变化规律研究

应用Envirologix试剂盒测定99B、33B棉子仁中Bt蛋白的含量,分别为4376.4ng·g1和4321.7ng·g1;测定系列稀释的棉子仁提取液,Envirologix试剂盒测得的OD450和Agdia试剂盒测得的OD630间的相关性很好,相关系数接近0.99;而Agdia试剂盒测得的系列稀释液的OD630与其Bt蛋白含量间有很好的相关性,相关系数大于0.99。据此,利用Agdia试剂盒测得99B、33B棉子、棉子仁、棉子壳在12个月的贮存过程中Bt蛋白含量的变化规律,棉子、棉子仁中Bt蛋白含量降低一半,棉子壳中Bt蛋白含量降低四分之一。

转基因棉籽检测中DNA模板提取方法研究

在转基因棉籽的检测中 ,需要得到合适的DNA模板 ,以进行PCR扩增。应用CTAB1、CTAB2、KIT、KIT1、SDS等五种DNA模板提取方法提取转基因棉籽中的DNA模板 ,根据模板DNA的OD2 6 0 OD2 80 值、波长扫描、琼脂糖凝胶电泳、3个基因的PCR扩增结果 ,评价五种DNA模板提取方法的提取效果 ,发现以KIT1方法提取棉籽中DNA模板效果为好 ,可用于实际检测中。

有关杯碟法测定壮观霉素灵敏度的影响因素

通过对菌种、培养基种类及pH、缓冲液种类及pH培养温度、添加葡萄糖和吐温等因素的研究，确定了壮观霉素测定条件，使其测定灵敏度达0．4X10ed。

培养料中棉籽成分对平菇生长的影响

探索了培养料中不同棉籽含量、转基因棉籽和非转基因棉籽对平菇生长的影响 ,结果发现 :培养料中棉籽含量超过 2 0 % ,就会影响平菇的常年栽培 ;超过4 0 % ,会导致不出菇 ;超过 70 % ,会导致菌丝体不生长。棉籽含量超过 30 %的培养料 ,会出现氨味和臭味 ,且菌丝难以在菌棒内部生长 ;低于 30 %的培养料 ,随着棉籽含量的增加 ,前期菌丝的生长速度减慢 ,但不影响菌丝满袋时间、菇蕾形成时间。培养料中含有不同品种转基因棉籽、非转基因棉籽 ,不影响菌丝长势、菌丝满袋时间。

转基因棉子壳中Bt蛋白含量测定方法研究

应用农大试剂盒测定三种转基因棉子仁中 Bt蛋白的含量。以这三种转基因棉子仁为标准参考物 ,确定了 Agdia试剂盒测定棉子仁中 Bt蛋白的回归方程和线性范围。确定了该试剂盒测定棉子壳中 Bt蛋白的线性关系。测定了棉子壳中 Bt蛋白含量 ,中棉所 42、99B、33B棉子壳中 Bt蛋白含量平均值分别为 5 8.6、 6.8、 4.4ng· g-1。

鱼肉鲜度测定生物传感器研究概况

综述用于鱼肉鲜度测定的几类生物传感器，包括胺类测定传感器、细菌传感器、IMP和Hx测定传感器、K1值测定传感器，阐明了生物传感器测定鱼肉鲜度的优越性。

利用等电聚焦电泳研究黄单胞菌分类

对黄单胞菌的4个种及29个致病变种的代表菌株进行了等电聚焦电泳研究,发现所测定的黄单胞菌种间、致病变种间蛋白质图谱差别很大。电泳结果经聚类分析表明,某些致病变种间的差别并不一定比种间的差别小,说明某些致病变种可以上升到种这一分类地位。引起细菌性黑颖病的黄单胞菌禾谷致病变种、小麦致病变种、大麦致病变种间差别很小,仅有6条蛋白质谱带的差别。因此这3个致病变种的分类地位需重新考虑,同时说明等电聚焦电泳对黄单胞菌种下分类具有一定指导意义。

应用PCR方法检测转基因棉籽的研究

对5种转基因棉籽和3种非转基因棉籽,应用改良CTAB法和改良KIT法提取DNA模板,对35S、NOS、Bt等基因进行了检测研究,并确定了在检测Bt基因时的灵敏度。

茯苓灵芝营养液的研制

以茯苓灵芝为原料，经过反复提取、过滤、浓缩等工艺后，配制成具有一定保健作用的营养液。营养液具有丰富的营养物质和良好的口感。

大豆异黄酮中转基因大豆成分检测研究

利用含有35S启动子、NOS终止子片段的质粒,确定相应检测方法的灵敏度为15个拷贝和150个拷贝;采用扩增CaMV35S启动子的2对引物、扩增NOS终止子的2对引物、扩增EPSPS目的基因的1对引物,对大豆异黄酮样品中转基因成分进行了检测,结果均扩增出了特异性片段,且测序结果正确。

利用等电聚焦电泳研究黑颖病菌、白叶枯病菌的致病性分化

细菌性黑颖病是一种世界性病害,孙福在等经过生物学测定后,将所测黑颖病菌划分成了个致病型和一个未定类群。水稻白叶枯病是亚洲稻米生产国的一个重要病害。

实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10

食品及饲料中马属动物源性成分的PCR检测研究

采用马和驴mtDNA中特异性片段引物 ,利用聚合酶链反应技术 (polymerasechainreaction ,PCR) ,建立了饲料中马属动物源性动物成分的快速检测方法。通过内切酶HaeⅢ、Sau3A和AluⅠ可对扩增结果进行验证并能够区分马成分和驴成分。扩增产物测序结果表明 :驴扩增产物序列与数据库序列完全一致 ,马样品扩增产物与数据库序列的同源性达 99%。该方法的检测低限分别为 0 5 %(w w)和 0 2 5 %(w w) 。

实时荧光定量PCR技术在转基因玉米检测中的应用研究

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对玉米中的内源基因Invertase和转基因玉米Mon810、Event 176中的外源基因进行了定量检测 ,建立了商业化转基因玉米Mon 810 (YieldGard)和Event 176 (Maximizer)的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度小于 0 .0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10

进出口动物源性产品中牛羊成分的检测方法

加强对进出口动物源性产品,特别是反刍动物源性产品的严格管理是防止疯牛病传播的有效途径。本文详述了饲料、保健品和化妆品等动物源性产品中动物源性成分,特别是牛羊源性成分的检测方法的研究现状,对显微检测、PCR检测、免疫学检测和近红外检测等目前用于检测动物源性成分的主要方法进行了评述,并对进行该类项目检测时检测方法的使用原则提出了建议。

天然橙汁饮料的研制

使检子果肉果皮分离，果肉榨汁，在果肉榨汁后的渣和果皮中提取部分香精、色素和营养成分，将榨汁所得的果汁和提取液合并，配制成具有橙子清香味的天然橙汁饮料。

食品加工工艺对大豆内源基因降解变化规律的影响

本文以转基因大豆和非转基因大豆为试验材料,运用定性PCR技术分析了磨浆、煮浆、调配、均质、点浆、杀菌、喷雾干燥等豆腐、豆奶、豆粉三种豆制品中关键加工工艺对大豆内源基因lectin的影响,探讨了转基因大豆加工食品在不同加工过程中DNA降解程度的变化。研究结果表明,大豆内源基因在三种加工食品中的各个加工过程中都会受到不同程度的破坏。在豆腐、豆奶、豆粉的加工过程中,片段大小为1883bp的lectin基因仅能在原料中检测到;磨浆、煮浆、均质等工艺,使lectin基因降解至1000bp以下;随着进行的点浆、高温杀菌或喷雾干燥等工艺对lectin基因的降解产生更显著的影响,豆腐终产品中lectin基因的片段大小在500bp以下,豆奶、豆粉中lectin基因片段大小仅为200bp左右。