GNB4和Riplet基因甲基化检测在原发性肝癌诊断中的价值研究

目的 探讨GNB4和Riplet基因甲基化单独和联合检测在原发性肝癌诊断中的诊断效能和临床价值。方法 选取313例患者,原发性肝癌患者78例,其他消化系统肿瘤患者41例,非消化系统肿瘤患者17例,肝癌术后20例,肝良性疾病患者157例。采用甲基化荧光定量PCR(qMSP)法检测所有患者血浆中GNB4和Riplet基因甲基化水平,直接化学发光法检测血清甲胎蛋白(AFP)水平。结果 AFP检测诊断灵敏度和特异度为51.3%、94.3%;GNB4基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为83.3%、99.4%;Riplet基因甲基化检测诊断灵敏度和特异度为73.1%、99.4%。GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%;AFP、GNB4和Riplet基因甲基化3项指标联合检测诊断的灵敏度和特异度为92.3%、98.7%,纳入年龄和性别后的联合诊断的灵敏度和特异度为93.6%、97.5%。结论 对于原发性肝癌的诊断,AFP灵敏度和特异度存在局限性,而GNB4和Riplet基因甲基化水平较高,两者联合检测的灵敏度和特异度均高于AFP的诊断效能。AFP、GNB4和Riplet基因甲基化联合检测诊断的灵敏度和特异度显著高于AFP、GNB4和Riplet基因甲基化单独检测。

SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用价值

目的 探讨粪便样本中硫酸类肝素蛋白多糖基因(SDC2)甲基化和组织因子途径抑制物2基因(TFPI2)甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用价值。方法 选取106例结直肠癌患者(结直肠癌组)、75例进展期腺瘤患者(进展期腺瘤组)、35例非进展期腺瘤患者(非进展期腺瘤组)为研究对象,并以同期153例其他消化系统干扰性疾病患者、182例结肠镜检查结果为阴性者作为对照组,采用甲基化荧光定量PCR(qMSP)法对所有受试者的粪便标本进行SDC2和TFPI2基因甲基化检测。以结肠镜检查及病理检查结果为金标准,评估SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌和腺瘤检测的灵敏度和特异度。结果 106例结直肠癌患者中,甲基化联合检测灵敏度为93.4%;75例进展期腺瘤患者中,甲基化联合检测灵敏度为62.7%;35例非进展期腺瘤患者中,甲基化联合检测灵敏度为34.3%;SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌和腺瘤筛查的特异度为94.6%。结论 SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌及其早期病变具有较高的灵敏度,同时保持较高的特异度。

γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除PGC-1α基因对小鼠焦虑抑郁行为的影响

目的:探讨γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除PGC-1α基因对小鼠焦虑抑郁行为的影响。方法:经实验室繁殖及基因型鉴定获得足够数量的PGC-1α基因敲除小鼠(纯合子小鼠),通过垂直开场实验、高架十字迷宫、强迫游泳以及悬尾实验评价条件性敲除PGC-1α基因对小鼠焦虑抑郁行为的影响。结果:垂直型开场行为学结果表明,纯合子小鼠开场行为活动显著高于杂合子(P<0.05)与野生型(P<0.01),运动、活动能力更强;高架十字迷宫实验结果表明,纯合子小鼠进入开放臂频率百分比显著高于杂合子和野生型小鼠(P<0.05),表现出抗焦虑特性;悬尾和强迫游泳实验结果表明,纯合子小鼠静止不动时间显著低于野生型小鼠(P<0.05),表现出抗抑郁特性。结论:γ-氨基丁酸能神经元条件性敲除PGC-1α基因使小鼠表现出抗焦虑和抗抑郁行为。

Poly I:C母鼠免疫刺激及母婴分离对子代精神分裂症样行为的影响

目的:探讨聚肌苷酸胞苷酸(polyinosinic-polycytidylic acid,poly I:C)诱导的妊娠母体免疫刺激和出生后母婴分离双重因素对子代精神分裂症样行为的影响及其机制。方法:于母鼠妊娠第17天时尾静脉注射poly I:C(5 mg/kg)或无菌生理盐水,子代小鼠出生后每窝随机选取一半进行母婴分离,另一半不分离。子代鼠出生第21天断奶分笼,第60天进行行为学实验:开场实验、高架十字迷宫实验、新物体/位置识别实验以及水迷宫实验。行为实验结束后,处死小鼠取海马组织,采用蛋白质印迹法检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表达。结果:高架十字迷宫实验结果显示,poly I:C可导致雄性小鼠出现抗焦虑;新物体识别实验显示,poly I:C可影响雌子代的认知功能;水迷宫实验结果显示poly I:C对雌、雄仔鼠的学习记忆能力有不同程度的影响,雌性仔鼠颠倒学习能力受损;此外,poly I:C导致雌、雄仔鼠海马MBP降低。母婴分离导致雌、雄仔鼠的体重增长速度减缓、雌性后代的颠倒学习能力降低。结论:poly I:C诱导的母体免疫刺激与母婴分离,均能诱导子代出现精神分裂症样行为表现,且对雌、雄子代的影响不尽相同,两种干预因素没有出现协同或拮抗作用;此外,poly I:C导致了子代的海马髓鞘损伤。

内嗅皮层γ-氨基丁酸能神经元活动对大鼠感觉运动门控及主动回避学习记忆的影响

目的:探究内嗅皮层神经元功能活动对大鼠感觉运动门控及学习记忆的影响。方法:采用健康清洁级成年雄性SD大鼠,通过手术分别对大鼠脑的内嗅皮层内侧(medial entorhinal cortex,MEC)区域、内嗅皮层外侧(lateral entorhinal cortex,LEC)区域双侧埋入导管,手术恢复后,双侧微注射γ-氨基丁酸能神经元受体α激动剂蝇蕈醇;对照组微注射生理盐水。微注射30 min后进行旷场实验,高架十字迷宫实验,惊反射前脉冲抑制实验以及主动回避实验,观察内嗅皮层神经元功能活动被暂时性抑制后大鼠行为学的改变。结果:旷场实验结果显示,大鼠微注射蝇蕈醇后,MEC组大鼠自发性活动显著高于对照组(P<0.05);高架十字迷宫测试结果显示,微注射蝇蕈醇后,MEC组大鼠进入开放臂频率显著高于对照组(P<0.05);前脉冲抑制测试结果显示,微注射蝇蕈醇后,当声音刺激强度为73 d B时,MEC组大鼠的前脉冲抑制显著低于对照组(P<0.05);双向主动回避测试结果显示,微注射蝇蕈醇后,MEC组大鼠的条件反射潜伏期显著高于对照组(P<0.05)。结论:抑制MEC区域的神经元功能活动将影响大鼠的自发性活动、焦虑度、感觉运动门控以及主动回避学习记忆能力。

全身免疫炎症指数对中度重症和重症急性胰腺炎的预测价值

目的探讨全身免疫炎症指数(SII)评估中度重症急性胰腺炎(MSAP)和重症急性胰腺炎(SAP)的价值。方法回顾性分析2021年1-11月该院高新院区93例确诊急性胰腺炎(AP)患者的临床资料,将患者分为轻症急性胰腺炎(MAP)组(n=40)和非MAP组(MSAP和SAP,n=53),另在该院体检中心选取40例同期健康体检者作为对照组。收集所有受试者血常规相关指标和血清C反应蛋白(CRP)水平,计算SII、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR),比较在各组间的差异。采用Spearman相关系数分析AP患者SII与白细胞计数(WBC)、NLR、LMR及CRP的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析各项指标对MSAP和SAP的预测价值。结果非MAP组住院时间、WBC、SII、NLR和血清CRP水平均明显高于MAP组,而LMR明显低于MAP组(P<0.0167)。Spearman相关性分析显示,AP患者SII与WBC、NLR、血清CRP水平均呈正相关(r=0.797、0.952、0.615,均P<0.001),与LMR呈负相关(r=-0.853,P<0.001)。ROC曲线分析显示,SII在预测MSAP和SAP时的曲线下面积(AUC)为0.717,灵敏度为54.7%,特异度为77.5%,其诊断效能与NLR(AUC=0.728)、LMR(AUC=0.744)及CRP(AUC=0.801)相当。结论SII对MSAP和SAP具有一定的预测价值,其作用与NLR、LMR及CRP相当。

丰富环境对孕早期母体聚肌胞苷酸免疫刺激引起的仔鼠精神分裂样行为的影响

目的 探讨出生后丰富环境刺激对孕早期（第9天）聚肌胞苷酸（polynosinic- polycyti-dylic acid,Poly I ： C）免疫刺激引起的仔鼠精神分裂样行为的影响.方法 怀孕母鼠随机分为实验组、对照组,实验组于怀孕第9天给予尾静脉注射病毒类似物聚肌胞苷酸（Poly I ： C,5 mg/kg）,对照组注射等体积生理盐水（normal saline,NS）.在子代小鼠出生后第21天断奶,将每只母鼠所生同窝子代小鼠按雌雄随机分为丰富环境（enriched environment,EE）组及单调环境（dull environment,DE）组,丰富环境组在鼠笼内放置能够增加子代小鼠身体运动及认知能力的模型玩具,如转轮、爬梯、秋千、滚筒等,每周更换一次,单调环境组即常规饲养环境.在子代小鼠出生后第60天,进行前脉冲抑制（pre-pulse inhibition,PPI）测试,以及旷场、新物体/位置识别、社交、水迷宫等行为学实验,对子代小鼠的学习记忆及认知能力进行评估;行为学实验结束后,处死小鼠取脑,Western blot对海马组织中MBP蛋白表达进行分析.结果 （1）PPI结果显示,孕早期Poly I ： C母体免疫刺激的子代雌、雄性小鼠%PPI均明显低于对照组（雌性子代：F=28.12,P〈0.01;雄性子代：F=14.76,P〈0.01）.（2）旷场实验中,孕早期Poly I ： C免疫刺激的子代雌、雄性小鼠运动的总距离、速度均大于对照组（雌性子代：运动距离,F=5.10,P〈0.05,速度：F=5.19,P〈0.05;雄性子代：运动距离,F=6.76,P〈0.05,速度,F=6.85,P〈0.05）.（3）在社交实验中,出生后丰富环境增加了子代雌、雄性小鼠与陌生小鼠的交流时间[雌性：EE组（101.30±6.83）s,DE组（76.50±5.59）s,F=9.41,P〈0.01;雄性：EE组（98.52±6.82）s,DE组（75.82 ±3.95）s,F=7.95,P〈0.01].（4）在水迷宫实验中,出生后丰富环境使子代小鼠找到平台的时间明显缩短（P〈0.05）.（5）海马MBP蛋白分析结果显示,孕早期Poly I ： C免疫刺激的子代雌、雄小鼠海马MBP蛋白表达均低于生理盐水对照组（均P〈0.05）.结论 出生后丰富环境刺激可以增加Poly I ： C免疫刺激引起的子代小鼠的社交能力及学习记忆能力,且可能改善孕早期母体Poly I ： C免疫刺激所致的子代雄性小鼠的偏执、刻板行为.