信号素蛋白3A通过Notch1信号通路参与糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡

目的 探讨轴索导向分子信号素蛋白3A(SEMA3A)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响及其可能机制。方法 40只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(正常喂养)、模型组[腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病视网膜病变(DR)模型]、si-SEMA3A组(建立DR模型后,双眼玻璃体内注射病毒滴度为1×10^(9)IU/mL的SEMA3A-si RNA慢病毒10μL)、si-SEMA3A+DAPT组[建立DR模型后,双眼玻璃体内注射病毒滴度为1×10^(9)IU/mL的SEMA3A-siRNA慢病毒10μL和浓度为10μmol/L的Notch1通路抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)10μL],每组10只。各组处理12周后取样,采用SEMA3A和RGC标志物POU结构域转录因子3a(Brn3a)双标记免疫荧光染色检测大鼠视网膜组织中SEMA3A蛋白的表达定位;H-E染色检测大鼠RGC密度,TUNEL染色检测大鼠RGC凋亡情况,ELISA法检测大鼠视网膜组织中炎症因子IL-6和TNF-α的表达水平,蛋白质印迹法检测大鼠视网膜组织中SEMA3A、Notch1及caspase 3蛋白的表达水平。结果 双标记免疫荧光染色确定SEMA3A在大鼠RGC中特异性表达。与对照组比较,模型组大鼠的RGC密度较低(P<0.05);si-SEMA3A组大鼠的RGC密度大于模型组和si-SEMA3A+DAPT组(P均<0.05)。对照组大鼠视网膜组织中未检测到TUNEL阳性RGC,模型组大鼠视网膜组织中TUNEL阳性RGC较多,RGC凋亡率为(49.55±7.82)%;与模型组比较,si-SEMA3A组大鼠RGC凋亡率较低(P<0.05),而si-SEMA3A+DAPT组大鼠RGC凋亡率高于si-SEMA3A组(P<0.05)。模型组大鼠视网膜组织中IL-6、TNF-α、SEMA3A和caspase 3的表达水平均高于对照组,Notch1表达水平低于对照组(P均<0.05);与模型组比较,si-SEMA3A组大鼠视网膜组织中IL-6、TNF-α、SEMA3A和caspase 3表达水平均降低,Notch1表达水平升高(P均<0.05);si-SEMA3A+DAPT组大鼠视网膜组织中IL-6、TNF-α、SEMA3A和caspase 3表达水平均高于si-SEMA3A组,Notch1表达水平低于si-SEMA3A组(P均<0.05)。结论 SEMA3A可能通过Notch1信号通路参与糖尿病大鼠RGC凋亡,有望成为DR的治疗靶点。

姜黄素对人视网膜色素上皮细胞增殖和VEGF表达的影响

目的探讨姜黄素对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法(1)采用不同浓度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)的姜黄素干预hRPE细胞1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d,同时设置空白对照组(不给予姜黄素干预)。采用CCK-8法检测各时间点不同浓度姜黄素对hRPE细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测各时间点各组细胞周期时相分布情况。(2)将hRPE细胞分为姜黄素组和对照组,姜黄素组加入10μg/mL的姜黄素,对照组加入等体积培养液,采用实时荧光半定量PCR检测各组hRPE细胞VEGF mRNA的表达水平。结果(1)各浓度姜黄素对hRPE细胞均有抑制作用(均P<0.05),且随着药物浓度的增大、作用时间的延长,其抑制率呈升高趋势,整体呈现剂量和时间依赖性。(2)不同浓度姜黄素干预后,G_(0)/G_(1)期细胞比例均大于空白对照组,S期细胞比例和G_(2)/M期细胞比例均小于空白对照组(均P<0.05)。(3)姜黄素组hRPE细胞VEGF mRNA表达水平低于对照组(P<0.05)。结论姜黄素可以将hRPE细胞周期阻滞于S期从而抑制hRPE细胞的增殖,还可以降低hRPE细胞的VEGF表达水平。

白内障伴青光眼血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞的相互关系

目的探讨白内障伴青光眼超声乳化围术期血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞的变化及其相互关系。方法以白内障伴青光眼患者48例为研究对象,患者行超声乳化联合小梁切除术进行治疗。检测比较患者术前、术后3 d、术后1、3个月的最佳矫正视力、血脂比、胰岛素敏感性、眼内压和角膜内皮细胞等,并采用Pearson线性相关分析法分析其血脂比、胰岛素敏感性与最佳矫正视力、眼内压和角膜内皮细胞等的关系。结果与术前比较,患者术后1、3个月的低密度脂蛋白(LDL)/高密度脂蛋白(HDL)、三酰甘油(TG)/HDL、总胆固醇(TC)/HDL等血脂比值、眼内压和内皮细胞密度均降低,最佳矫正视力、胰岛素敏感指数、平均细胞面积和面积变异系数均升高(P<0.05)。Pearson线性相关分析结果显示,患者LDL/HDL、TG/HDL、TC/HDL等血脂比值与其眼内压和内皮细胞密度均呈正相关(P<0.05),与其最佳矫正视力、平均细胞面积和面积变异系数则均呈负相关(P<0.05);患者胰岛素敏感指数与其眼内压和内皮细胞密度均呈负相关(P<0.05),与其最佳矫正视力、平均细胞面积和面积变异系数则均呈正相关(P<0.05)。结论白内障伴青光眼超声乳化联合小梁切除术治疗可有效控制患者眼压,改善视力和角膜内皮细胞完整性,且其血脂比和胰岛素敏感性与其眼内压、视力和角膜内皮细胞等疗效相关指标均相关,可能用于其疗效的辅助评估。

血清VEGF及ICAM-1水平与糖尿病视网膜病变患者微血管损伤的关系

目的探讨血清中血管内皮生长因子(VEGF)及细胞间黏附分子(ICAM)-1水平与糖尿病视网膜病变(DR)患者微血管损伤之间的关系。方法未应用抗凝类药物治疗的2型糖尿病(T2DM)患者120例,根据临床及眼底检查确诊将其分为非DR(NDR)组(n=56)、非增生型DR(NPDR)组(n=30)、增生型DR(PDR)组(n=34)。比较各组微血管病变发生率;采用流式细胞仪检测内皮细胞(ECs)、内皮祖细胞(EPCs)计数百分比;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清中VEGF及ICAM-1水平。结果 PDR组糖尿病肾病(DN)及神经病变的发生率明显高于NDR组和NPDR组(均P<0.05);与未发生微血管病变患者相比,发生微血管病变患者的EPCs水平明显下降,而ECs、VEGF和ICAM-1水平均明显升高(均P<0.05);不管是否发生微血管病变,PDR组的ECs、VEGF和ICAM-1水平均高于NDR组和NPDR组,NPDR组均高于NDR组,PDR组EPCs水平低于NPDR组,NPDR组低于NDR组(均P<0.05);PDR组VEGF、ICAM-1水平与ECs水平呈正相关(r=0.995,0.852,P<0.05),与EPCs水平呈负相关性(r=-0.895,-0.920,P<0.05)。结论 VEGF和ICAM-1在DR患者微血管损伤中高表达,与ECs和EPCs密切相关,提示VEGF和ICAM-1在DR患者微血管损伤形成中与血管内皮功能密切相关。

双氢青蒿素通过ERK12和P38途径抑制缝合诱导的大鼠角膜新生血管形成

目的观察局部滴注双氢青蒿素(DHA)对大鼠角膜新生血管(CNV)的抑制作用。方法采用角膜缝合法建立大鼠CNV模型,用5、10、20 mg/L DHA或生理盐水局部处理角膜,每日4次,连续7 d。观察DHA对缝合诱导CNV的抑制作用;用免疫荧光染色法检测20 mg/L DHA组和NS组处理后角膜组织中p-细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、p-P38、CD31表达;Western印迹检测角膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、p-VEGF受体(VEGFR)-2、p-ERK1/2、p-P38蛋白表达。结果与NS组相比,10、20 mg/L DHA组角膜CNV面积显著下降(均P<0.05)。免疫荧光染色显示,20 mg/L DHA可降低缝合诱导CNV p-ERK1/2、p-P38、CD31的表达水平(P<0.05)。Western印迹检测结果,与NS组相比,20 mg/L DHA显著抑制VEGF、p-VEGFR-2的表达(P<0.05),20 mg/L和10 mg/L DHA均能抑制p-ERK1/2、p-P38表达(均P<0.05)。结论20 mg/L和10 mg/L DHA可明显抑制缝合诱导CNV,其机制可能与抑制ERK1/2和P38通路有关。

血清miR⁃146a、miR⁃195水平与糖尿病视网膜病变患者激光治疗效果的相关性

目的观察糖尿病视网膜病变(DR)患者血清微小RNA⁃146a(miR⁃146a)、miR⁃195水平与激光治疗效果的相关性。方法选择我院2018年1月至2020年1月收治的111例DR患者作为研究对象,检测患者血清miR⁃146a、miR⁃195水平,行激光治疗,评估激光治疗效果,分析血清miR⁃146a、miR⁃195水平与DR患者激光治疗效果的相关性。结果223例DR患者行激光治疗后,有181例治疗有效,有42例治疗无效;初步比较激光治疗无效组与治疗有效组资料后,经logistic回归分析结果显示,DR患者高血压、治疗前血清miR⁃146a及miR⁃195水平是激光治疗无效的影响因素(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作曲线(ROC)发现,治疗前血清miR⁃146a及miR⁃195水平单项预测及联合预测激光治疗无效的曲线下面积(AUC)均>0.80,有一定预测性能。结论血清miR⁃146a、miR⁃195可作为DR患者激光治疗效果的有效预测指标。

眼眶绿色瘤一例

绿色瘤（Chloroma）即粒细胞性肉瘤（Granulocyt-icsarcoma）,是一种发展迅速、目前原因不明、主要侵犯造血组织的恶性肿瘤。而眼眶绿色瘤是儿童较常见的眼眶恶性肿瘤,多发于12岁以下儿童,成人也可发生,但多为40岁以上。眼眶绿色瘤是髓样白血病的一种亚型，我院近年收治1例，报道如下：

着色性干皮病一例

着色性干皮病（Xeroderm a pigmentosum,XP）是一种少见的常染色体隐性遗传的皮肤色素萎缩性疾病,该病是一种癌前病变,儿童期始发的持久雀斑状皮疹及疣状物,以后易发展为癌瘤。

雷珠单抗或加减驻景方对形觉剥夺性近视豚鼠眼轴和脉络膜厚度的短期影响

目的:观察形觉剥夺性豚鼠近视模型中给予中药驻景方或雷珠单抗注射液干预后屈光度、眼轴长度和脉络膜厚度的短期变化。方法:取出生2wk的豚鼠60只,右眼戴头套诱导形觉剥夺性近视(FDM)动物模型。2wk后随机分为雷珠单抗组、驻景方组和生理盐水组(各组n=20)。雷珠单抗组第1d玻璃体腔注射雷珠单抗注射液0.02mg 1次,驻景方组给予加减驻景方灌胃3.285g/(kg·d)(1.5mL/d)共7d,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。分别测量记录三组豚鼠给药前和给药后1、3d,1wk的屈光度、眼轴长度和脉络膜厚度。结果:雷珠单抗组给药前后的各值均无差异(P>0.05)。驻景方组和生理盐水组给药后1、3d的屈光度明显降低、眼轴长度缩短、脉络膜厚度增厚(P<0.05),且3d时两组的各值变化最明显,但均在1wk时恢复到给药前的水平。三组间给药1、3d时生理盐水组和驻景方组的屈光度均低于雷珠单抗组,且眼轴长度较短,脉络膜厚度较厚(P<0.05),给药3d时生理盐水组的各值变化最明显(P<0.05)。给药1wk时三组间各指标均无差异(P>0.05)。结论:形觉剥夺性近视恢复期有一个短暂的脉络膜增厚时期,雷珠单抗注射液全程明显抑制了形觉剥夺性近视恢复期脉络膜的增厚,驻景方在3d时开始出现轻微的增厚抑制,均只持续了短暂的1wk时间。

姜黄素对内皮祖细胞功能及内皮型一氧化氮合酶的影响

目的观察姜黄素对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的影响。方法采用贴壁选择法培养人外周EPCs,培养6 d后,收集贴壁细胞并加入姜黄素(0、5、10、15μmol/L)培养一定时间(6、12、24和48 h)。荧光显微镜鉴定EPCs,分别观察EPCs的体外增殖、黏附、迁移、体外血管生成能力。Griess法检测NO分泌量,并RT-PCR半定量测定eNOS基因表达。结果姜黄素增加外周血EPCs的数量,改善EPCs的体外增殖、黏附、迁移、体外血管生成能力(P<0.01)。并上调eNOS基因表达,促进EPCs来源的NO的释放(P<0.01)。结论姜黄素增加体外EPCs数量及改善其功能,上调eNOS基因表达并增加EPCs来源的NO分泌。

姜黄素纳米微粒的制备及其对人视网膜色素上皮细胞周期的影响

目的探讨壳聚糖脱氧胆酸负载姜黄素纳米微粒的制备方法,观察姜黄素纳米微粒对人视网膜色素上皮细胞周期的影响。方法以脱氧胆酸基接枝的壳聚糖为载体,姜黄素为负载药物合成姜黄素纳米微粒,测定纳米微粒的负载率与载药量。观察纳米微粒的外形结构,测定其体外释放量。检测不同浓度的壳聚糖脱氧胆酸纳米粒作用于人视网膜色素上皮细胞24、48 h光密度(OD)值,同时观察其细胞形态。测定姜黄素纳米微粒及姜黄素对人视网膜色素上皮细胞周期时相变化。结果姜黄素与壳聚糖脱氧胆酸混合制成负载药物的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒为淡黄色,未负载药物的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒呈类球形或球形,平均粒径为30~50 nm,负载姜黄素的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒粒径为70~100 nm;载药量为27.5%,负载率为55.0%。96 h后药物从纳米微粒中的释放达到平衡,药物的累积释放量达31.6%。不同浓度的壳聚糖脱氧胆酸纳米微粒作用于人视网膜色素上皮细胞24、48 h后OD值与对照比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各浓度姜黄素纳米微粒与姜黄素分别对体外培养的人视网膜色素上皮细胞作用24 h后,均出现S期细胞百分比下降,G_(0)~G_(1)期细胞百分比上升。结论通过壳聚糖脱氧胆酸包载的姜黄素纳米微粒能持续释放出姜黄素,缓释功能较好。姜黄素纳米微粒可以阻滞人视网膜色素上皮细胞周期于S期。

医用自交联透明质酸钠凝胶在内窥镜下泪囊鼻腔吻合术中的应用

目的:探讨医用自交联透明质酸钠凝胶对鼻内窥镜下泪囊鼻腔吻合术(endonasa l endoscopi c dacryocystorhinostomy,En-DCR)后的影响。方法:将219例单侧慢性泪囊炎(chronic dacryocystitis CD)患者随机分为医用自交联透明质酸钠凝胶组(A组)和对照组(B组)。所有患者行En-DCR。A组将医用自交联透明质酸钠凝胶填充吻合口,B组不做任何处理。随访12个月。比较创面黏膜上皮化、肉芽形成情况、渗血情况及吻合口通畅成功率。结果:A组98例,B组102例。随访2周,A组86例患者鼻腔吻合口黏膜上皮完整,B组77例患者鼻腔吻合口黏膜上皮完整。随访12个月,A组有7例患者存在瘢痕(7.1%),8例患者出现肉芽肿(8.2%),而B组有17例患者存在瘢痕(16.7%),18例患者出现肉芽肿(17.6%)。两组瘢痕形成及出现肉芽肿差异均有统计学意义(P<0.05)。A组的吻合口通畅成功率达到90.8%(89/98),而B组的成功率为78.4%(80/102)(P<0.05)。B组患者术后渗血情况A组相当(P>0.05)。结论:医用自交联透明质酸钠凝胶填充吻合口可通过促进En-DCR术后吻合口黏膜上皮愈合和降低伤口瘢痕及肉芽肿生成率,提高En-DCR治疗CD的成功率。

夏天无滴眼液联合消旋山莨菪碱滴眼液对儿童假性近视的疗效观察

目的:探究夏天无滴眼液联合消旋山莨菪碱滴眼液对儿童假性近视的疗效。方法:选取澄迈县人民医院眼科2017年2月—2018年12月治疗的128例假性近视儿童作为观察对象,采用抽签法分为对照组和观察组,各64例。其中,对照组采用消旋山莨菪碱滴眼液治疗;观察组采用夏天无滴眼液联合消旋山莨菪碱滴眼液治疗。对比分析两组的临床疗效、裸眼视力、屈光度和不良反应发生率。结果:经治疗后,观察组临床总有效率为96.88%,高于对照组的87.50%,两组间差异显著(P<0.05);观察组裸眼视力(0.88±0.21)高于对照组(0.74±0.19),其屈光度(-0.72±0.24)D低于对照组(-1.18±0.37)D,差异对比有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:假性近视儿童采用夏天无滴眼液联合消旋山莨菪碱滴眼液治疗能够提高临床疗效,改善患儿的裸眼视力和屈光度,且安全可靠,值得临床推广应用。

基于炎症和氧化应激探讨固本明目颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗白内障超声乳化术后干眼症的疗效及作用机制

目的:基于炎症和氧化应激探讨固本明目颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗白内障超声乳化术后干眼症的疗效及作用机制。方法:根据随机数字表法将2021年3月到2022年8月海南省眼科医院期间收治的150例白内障超声乳化术后干眼症患者分为观察组(固本明目颗粒联合玻璃酸钠滴眼液治疗,75例)、对照组(玻璃酸钠滴眼液治疗,75例)。对比两组疗效、安全性、眼部相关指标、炎症因子、症状评分和氧化应激水平。结果:治疗后,与对照组相比,观察组的临床总有效率更高,泪液分泌试验(SIt)、眼泪膜破裂时间(BUT)更高;干涩感、异物感、视疲劳症状评分和总评分更低;肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)更低;丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)更低,超氧化物歧化酶(SOD)更高(P<0.05)。两组不良反应发生率组间对比未见差异(P>0.05)。结论:在玻璃酸钠滴眼液治疗的基础上联合固本明目颗粒治疗白内障超声乳化术后干眼症,可缓解干眼症状,提高临床总有效率,可能与调节患者体内炎症因子、氧化应激水平有关。

羊膜移植联合低浓度丝裂霉素治疗原发性青光眼的临床疗效

目的：探究羊膜移植联合低浓度丝裂霉素在治疗原发性青光眼的临床疗效。方法：选取2013年6月～2014年1月我院收治的原发性青光眼患者58例（80眼），按照随机数字表法分为观察组（30例，40眼）和对照组（28例，40眼），观察组行小梁切除、羊膜移植联合低浓度丝裂霉素治疗，对照组行小梁切除治疗，比较两组的手术效果及术后并发症情况。结果：观察组术后优良率为97％（38／40），显著优于对照组的75％（28／40），差异有统计学意义（χ2=9．764，P=0．008）；两组术后1、6个月眼压较术前均明显降低（P〈0．05），且观察组较对照组更低（P〈0．05）；观察组功能性滤泡明显多于对照组（χ2=4．943，P=0．026），术后并发症明显低于对照组（χ2=4．501，P=0．034），复发情况明显低于对照组（χ2=914，P=-0．047）。结论：羊膜移植联合低浓度丝裂霉素治疗原发性青光眼能够有效控制眼压，减缓患者视力的丧失，术后并发症及复发率均较低，值得临床推广。