空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A壳聚糖佐剂疫苗对小鼠免疫原性和保护性研究

目的:研究空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A壳聚糖佐剂疫苗的免疫原性和保护性。方法:健康雄性昆明小鼠分为实验组和对照组。实验组设pcDNA3.1(-)-peb1A组3个剂量和壳聚糖-pcDNA3.1(-)-peb1A组3个剂量;对照组设空载体pcDNA3.1(-)(100μg/100μl)组和生理盐水(NS)组,各组均采用小鼠股四头肌注射法。在第0、10、20天免疫,于每次免疫后第10天采集各组小鼠血清,以间接ELISA法检测血清中特异性IgM、IgG的含量。分离各组小鼠脾淋巴细胞包被细胞培养板,以细胞ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞CD20、CD21表达水平。设空肠弯曲菌液灌胃攻击免疫后小鼠,检测肠道分泌液细菌培养数量。结果:裸DNA组和壳聚糖-DNA组各组特异性IgG水平均高于两对照组(P<0.05)。裸DNA组和壳聚糖-DNA组小鼠脾淋巴细胞CD20、CD21表达水平均高于两对照组(P<0.05),壳聚糖-DNA组高于裸DNA组(P<0.05)。肠道分泌液细菌培养结果细菌指数裸DNA组的低于两对照组;佐剂DNA组低于裸DNA组。结论:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性和保护作用,壳聚糖能增强pcDNA3.1(-)-peblA的免疫原性,有望成为空肠弯曲菌基因疫苗的候选佐剂。

壳聚糖的理化性及其作为免疫佐剂的研究进展

免疫佐剂是一种免疫调节剂,可增强抗原的免疫原性、提高免疫效果。为增强疫苗的免疫原性在病毒性疫苗、DNA疫苗、多肽疫苗的研制中常加入免疫佐剂。目前批准可用于人体的免疫佐剂是铝佐剂,因只能引起体液免疫,不能有效诱导细胞免疫,因此寻找新的免疫佐剂已成为疫苗研制迫切需要解决的问题。研究表明,壳聚糖具有免疫佐剂效应,具有良好的组织相容性,可生物降解,安全无毒,因此壳聚糖将成为一种很有应用价值的免疫佐剂。本文就壳聚糖的理化性及其免疫佐剂研究做一综述。

空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A诱导的T细胞活化增殖研究

目的探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗免疫昆明种小鼠后T细胞活化增殖状态。方法重组质粒CJ pcDNA3.1(-)-peb1A免疫昆明种小鼠后,取其脾淋巴细胞,应用ELISA法检测其膜表面分子CD3、CD4、CD8、CD25和CD28。结果检测结果显示:CD3检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10天有显著性差异(P<0.05);CD8检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05),裸DNA组也高于两对照组,但仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD25检测,裸DNA组高于NS组,但仅在第10天有显著性差异(P<0.05),佐剂DNA组高于裸DNA组,也仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD4及CD28检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05);在第10、20天各脾淋巴细胞膜表面分子检测,佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论 CJ pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗能够有效地诱导T细胞活化增殖。

空肠弯曲菌DNA疫苗构建及其疫苗免疫程序研究

目的:构建空肠弯曲菌peb1A基因真核表达载体,探讨DNA疫苗不同免疫程序的免疫效果。方法:以重组pET28a(+)-peb1A质粒为模板,将空肠弯曲菌peb1A基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转染COS-7细胞中表达,Western blot鉴定表达蛋白;昆明小鼠随机分组:设空白对照组、空载体对照组、pcDNA3.1(-)-peb1A实验组,用ELISA法检测免疫后的昆明小鼠血清IgG和IgM抗体水平。结果:重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A经双酶切和PCR鉴定,构建正确。peb1A基因测序结果与GenBank中peb1A基因序列一致。重组质粒成功转染COS-7细胞,并能正确表达重组蛋白。裸DNA组IgG水平均高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。同一剂量短时间(0、10、20天)免疫程序优于长时间(0、15、25、35天)免疫程序(P<0.05)。结论:成功构建空肠弯曲菌真核表达重组质粒pcDNA3.1(-)-peb1A,其经肌肉注射免疫小鼠,具有较好的免疫原性,短时间免疫程序免疫效果好。

空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A壳聚糖佐剂疫苗的Th免疫应答及作用

目的:探讨以壳聚糖为佐剂的空肠弯曲菌基因疫苗免疫小鼠后的Th细胞免疫应答状态。方法:昆明小鼠随机分组:设空白对照组、空载体组、pcDNA3.1(-)-peb1A组、壳聚糖+pcDNA3.1(-)-peb1A组,各组均采用小鼠股四头肌注射法。在第0、10、20天免疫,于每次免疫后第10天采集各组小鼠血浆,间接ELISA法检测免疫后不同时间小鼠血浆中Th1、Th2细胞因子的含量。结果:Th1类细胞因子IL-2、IFN-γ,在第10、20、30天,裸DNA组、佐剂DNA组、空载体组及NS组两两相比均无显著性差异(P>0.05);Th2类细胞因子IL-4、IL-10:实验组高于两对照组,在IL-4的检测中有显著性差异(P<0.05),在IL-10的检测中裸DNA组高于空白对照组有显著性差异(P<0.05),其裸DNA组高于空载体组,仅在第20天有显著性差异(P<0.05);佐剂DNA组高于裸DNA组,在IL-4的检测中有显著性差异(P<0.05),在IL-10的检测中,仅在第10、20天有显著性差异(P<0.05);佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:以壳聚糖为佐剂的空肠弯曲菌基因疫苗可促进Th2细胞为主的免疫反应。

糖尿病酮症酸中毒的研究进展

糖尿病酮症酸中毒(DKA)在世界范围内仍然是一个重要且严重威胁人类健康的糖尿病并发症之一。对高危糖尿病患者进行及时明确诊断和早期适当干预可以显著降低DKA的临床发生率,而糖尿病患者的治疗目的正是临床上积极改善高危组患者的生活质量,减少患者的死亡率、致残率以及住院接受治疗的时间。

糖尿病皮肤溃疡病损的综合治疗

目的探讨糖尿病皮肤溃疡病损全程综合治疗的效果和临床意义。方法对南京医科大学附属苏州明基医院内分泌科2013年6月至2018年6月经综合系统治疗并随访的21例糖尿病皮肤感染患者的临床资料进行回顾性分析,总结全程综合治疗的效果和临床意义。结果 21例患者中,糖尿病足部溃疡伴感染11例,其中接受足趾截肢6例,5例接受综合清创换药;下肢小腿皮肤感染4例;臀部感染6例。所有患者经院内治疗以及后期门诊随诊进一步治疗后均治愈或显著好转。结论真菌和细菌所致的皮肤感染后溃疡在糖尿病患者中最为常见,临床治疗中实行全程系统综合治疗,同时进行创面彻底清创换药是良好预后的基础。

32例低钾血症的诊治分析

目的：探讨内分泌科低钾血症的常见病因以及合理的临床诊治方法。方法回顾性分析2012年12月至2013年12月在南京医科大学附属苏州明基医院内分泌科进行住院治疗的32例低钾血症患者的临床诊治资料。结果所有患者均存在低钾血症的临床症状，其中确诊为原发性醛固酮增多症10例，甲状腺功能亢进症7例，糖尿病并发低钾血症3例，糖尿病合并慢性心功能衰竭2例，糖尿病合并肺部感染3例，糖尿病合并原发性高血压同时使用利尿剂3例，肾上腺瘤2例，嗜铬细胞瘤1例，最终确诊为甲状腺乳头状癌1例。所有患者均成功纠正低钾血症的同时初步明确导致低钾血症的病因，并针对病因进行合理治疗。结论内分科住院患者中最常见的导致低钾血症的病因为肾失钾性低钾血症，如原发性醛固酮增多症，其次为非肾性失钾性低钾血症，如周期性麻痹；治疗上需要在明确病因的基础上，治疗原发性疾病的同时有针对性地进行补钾治疗。

原发性阑尾印戒细胞癌一例

患者女,82岁,因上腹部胀痛纳差2月余于2009年6月入丹江口市汉江医院内二科诊疗,既往无腹部手术及外伤史。入院时查体腹部稍膨隆,未闻及明显移动性浊音,浅表淋巴结未触及肿大,身高155cm,体重27kg,恶病质体型。

慢性上腹部疼痛的诊疗进展

慢性腹部疼痛是消化科患者常见的就诊症状，引起慢性腹痛的病因复杂，性质不定，体征无特异性，故临床上及时并准确诊断较困难，也容易误诊，甚至误治。本研究就临床上常见的导致慢性上腹部疼痛疾病的临床表现、诊断策略及治疗方式作一综述。