基于ITS条形码的滇鸡血藤及混伪品分子鉴定

目的:基于内转录间隔区(ITS)序列,运用DNA条形码技术对滇鸡血藤药材及其混伪品进行序列比对分析,根据单核苷酸多态性位点构建滇鸡血藤单倍型数据库,建立快速、准确鉴定滇鸡血藤的分子鉴定方法。方法:以滇鸡血藤及其混伪品为材料,利用DNA提取试剂盒,分别提取滇鸡血藤及其混伪品的总DNA,对ITS序列进行聚合酶链式反应扩增及测序分析,使用DNAMAN软件统计其片段长度及变异位点个数,使用MEGA软件对数据进行分析比对,计算Kimura2-parameter遗传距离,并利用邻接法建立系统发育树进行分析。结果:滇鸡血藤ITS序列片段长度为675 bp,共包括19种单倍型,与其主要混伪品的差异位点为212、223、224 bp,系统发育树显示,ITS序列能够区分滇鸡血藤及其混伪品。结论:ITS条形码可以作为区分鉴定滇鸡血藤及其混伪品的分子条形码,包含19个单倍型的单倍型数据库覆盖了滇鸡血藤全部的单倍型。

甘草种子的基源鉴定及质量评价研究

目的:鉴别甘草种子的真伪及其基源,评价分子条形码对甘草种子的鉴定可行性,并对甘草种子进行质量评价,确定野生甘草种子和栽培甘草种子的质量差异。方法:利用ITS和psbA-trnH条形码,对13批甘草种子进行真伪和基源鉴定,并通过测定甘草种子的长度、宽度、厚度、千粒重、净度及发芽率,评价5批野生甘草种子和5批栽培甘草种子的质量。结果:利用ITS和叶绿体条形码psbA-trnH相结合的方法可以对甘草种子的真伪及基源进行鉴定,在13批甘草种子中有2批为光果甘草,11批为乌拉尔甘草;野生甘草种子的长度、宽度、厚度、千粒重、发芽率、净度及含水量高于栽培甘草种子,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:利用ITS和psbA-trnH条形码可准确鉴别甘草种子的基源,且野生甘草种子在播种品质方面均优于栽培甘草种子。