连续多次γ-氨基丁酸和多巴胺特征重复超低频经颅磁刺激对大鼠脑内神经递质功率的影响

目的:动态观察经颅磁刺激仪产生的γ-氨基丁酸(GABA)和多巴胺(DA)两种特征的重复超低频磁场的连续多次经颅刺激对正常大鼠的脑内GABA、DA以及其他递质功率的影响,找出大鼠所能耐受的最长治疗时间,为此项技术应用于治疗性研究提供参考。方法:将大鼠随机分为GABA特征磁刺激组和DA特征磁刺激组,分别给予连续6次的GABA特征磁刺激和DA特征磁刺激。各组大鼠于磁刺激前、每次刺激后进行脑涨落图(EFG)测试,分别比较两组动物磁刺激前及每次磁刺激后脑内递质功率的变化。结果:GABA特征磁刺激组,从刺激前到第3次磁刺激,兴奋递质3、5-HT、Ach、兴奋递质6、NE、DA、抑制递质13的功率逐渐降低,GABA与Glu的功率则逐渐升高;第4次刺激以后,出现无规律的变化。DA特征磁刺激组,从刺激前到第2次磁刺激,全部9种递质的功率逐渐升高,第3次刺激以后,出现无规律的变化。结论:清醒大鼠对50mT的GABA特征磁场超低频经颅磁刺激耐受时长为60min,对50MT的DA特征磁场超低频经颅磁刺激耐受时长为40min。

大鼠脑内多巴胺水平与脑电11mHz超慢波谱系功率的相关性

背景:脑内神经递质的检测是神经科学研究的重要内容,目前缺少在无创状态下检测脑内递质的可靠手段。目的:在脑内递质水平正常和低于正常的情况下,分析11mHz超慢波功率与多巴胺水平是否存在对应关系。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/12在首都医科大学北京神经科学研究所实验室完成。材料:选用体质量200～250g的雌性SD大鼠100只,按随机数字表法分为3组,模型组40只,对照组30只,正常组30只。方法:将模型组和对照组大鼠经腔注射麻醉,置于脑立体定位仪进行开颅手术,分别给予2组动物左侧脑黑质部位注射10g/L6-羟基多巴胺和生理盐水各8μL。正常组不作任何处置。主要观察指标:用脑涨落图仪检测3组大鼠脑内11mHz超慢波谱系的功率,同时用高效液相色谱法检测大鼠脑内多巴胺水平,并将2种方法的检测结果进行相关性分析。结果:与正常组比较,对照组大鼠脑内的多巴胺水平左脑下降26.98%,右脑上升16.92%;11mHz谱系的功率值左脑下降64.69%,右脑下降57.67%。与正常组比较,模型组的多巴胺水平左脑下降83.42%,右脑上升27.48%;11mHz谱系的功率值左脑下降83.39%,右脑下降76.62%。3组大鼠左、右脑多巴胺水平与11mHz谱系的功率值均呈正相关(P<0.05～0.01)。结论:两种方法的检测结果有高度相关性,即11mHz谱系的功率值与多巴胺的生化水平有高度相关性。说明在脑内递质水平正常和低于正常的情况下,11mHz谱系功率与多巴胺水平的对应关系是成立的。脑涨落图仪的检测结果准确可靠,用分析脑电超慢谱系的方法来检测脑内神经递质是可行的。

λ噬菌体DNA的快速提取法

从ｃＤＮＡ文库中筛选目的片段是获得新基因的常用和可靠手段。由于具有能扩增和长期保存不失活的优点，目前一般用λ噬菌体ＤＮＡ来作为ｃＤＮＡ文库载体。因此提取λ噬菌体ＤＮＡ便成为鉴定ｃＤＮＡ文库重组效率和获得目的片段的必由之路。通常提取λ噬菌体ＤＮＡ采用２...

合欢花和合欢米中槲皮苷含量比较

目的建立测定合欢花和合欢米中槲皮苷含量的高效液相色谱法,并对两者的槲皮苷含量进行比较。方法采用Extned-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(25∶75),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为256 nm。结果槲皮苷进样量在0.057 6～1.440μg(r=1.000 0)范围内与峰面积线性关系良好。平均回收率为98.65%,RSD=1.58%(n=9)。结论所建立的方法简便易行。经比较,合欢花和合欢米中槲皮苷的含量相近。

灵芝破壁孢子与不破壁孢子的显微镜观察与生化测定比较研究

首次对灵芝破壁孢子与不破壁孢子进行了初步的比较研究。显微镜下观察，破壁孢子粉与不破壁孢子粉的形态明显不同，采取水提、酸提、水煮三种不同的提取方式，破壁孢子粉提取液中还原糖与多肽含量都明显高于不破壁孢子粉，结果提示经过破壁处理后，灵芝孢子中的化学成分更容易被提取出来。

正常大鼠黑质纹状体系统一氧化氮合酶活性的分布

应用ＮＡＤＰＨ脱氢酶反应（ＮＡＤＰＨｄ反应）显示ＳＤ大鼠黑质纹状体系统内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）阳性细胞和末梢，用计算机图像灰度仪测其染色强度。结果：正常大鼠纹状体内存在的阳性神经元和末梢分布位置不同；高密度末梢分布于纹状体腹外侧缘，此区细胞数亦较多；低密度区分布于纹状体背内侧区，阳性细胞数亦较少。苍白球、丘脑和黑质未见ＮＯＳ阳性物质。

Antitumor Activity of the Ganoderma Lucidum Spore Alcohol Extract in Vitro

Several cancer cell lines(epithelioma cells or leukemia cells)from human being or mouse were first used to study the antitumor activity of the Ganoderma lucidum spore alcohol extract(GLSAE)in vitro by the MTT test A comparision was made between the sporodermbroken(SB)and sporoderm nonbroken(SN)GLSAE It was showed that both GLSAE SB and GLSAE SN could inhibit the proliferation of these cancer cells,but the activity of GLSAE SB was much higher than that of GLSAE SN These results suggested that Ganoderma lucidum spore could probably be used for tumor treatment

人颌下腺cDNA文库的构建

本研究从新鲜的人颌下腺组织中提取总ＲＮＡ，从中分离出带ｐｏｌｙ（Ａ）尾的信使ＲＮＡ［ｐｏｌｙ（Ａ）〕ｍＲＮＡ］，并合成带ＮｏｔＩ位点的双链ｃＤＮＡ后，接上ＥｏｃＲＩ接头定向插入λｇｔ１１表达载体，经体外包装后转染Ｙ１０９０宿主菌，遂构建成人颌下腺ｃＤＮＡ文库。该文库有４．１×１０５个噬菌体，重组率为１００％，可供寡核苷酸探针和单克隆抗体两种方法筛选目的基因。

浆纱工艺的优化和控制

应用微机现场检测、显示、采集浆纱生产过程工艺参数，采用ＳＮ比正交试验优化浆纱工艺，并对最佳工艺实施控制和生产工序进行科学管理，从而提高布机织造质量和效率，取得显著经济效益。

一种适用于清醒动物脑电信号采集的固定装置

脑电信号的采集分析是高级脑功能研究最常用的技术方法。很多研究[1-3]在采集实验动物的脑电信号时,先将动物进行全身麻醉,然后记录脑电信号变化。但许多麻醉药物都会对脑的功能活动产生很大影响,因此麻醉状态下的脑电信号与清醒时的脑电信号有很大差异。

灵芝酸性组分的提取分离及抑菌活性研究

探讨灵芝中酸性组分的提取、分离及分析方法 ,并研究其抑菌活性 .结果表明 ,灵芝醇提物经碱处理分离出总酸性组分的产率为 0 .8%～ 1.1% ,当以 n- C6 H1 4/ CH2 Cl2 / CHCl3/ Me OH(体积比为 4 .0∶ 3.0∶ 2 .5∶ 0 .5 )为展开剂时 ,薄层色谱仅显示 Rf 值为 0 .5 4～ 0 .12的 6条主要带 (S1 ～ S6 ) ;抑菌圈法测定结果显示 :该灵芝的酸性组分为2 5 m g/ m L时对金黄色葡萄球菌 (G+ )和大肠杆菌 (G- )均有明显抑制作用 ;粗灵芝酸性组分经硅胶柱层析纯化后 ,CHCl3/ Me OH (V∶ V=98∶ 2 )洗脱部分 (S1 )对大肠杆菌有明显抑制作用 ,而对金黄色葡萄球菌呈明显抑制作用的则集中在 CHCl3/ Me OH(V∶ V=5 0∶ 5 0 )洗脱部分 (S5,S6 ) .上述灵芝酸性组分的提取与分离方法简便易行 ,成分与产率稳定可控 ,且有明显抗菌活性 ,在抗菌制剂应用方面有潜在的药用价值 .

灵芝孢子中抗肿瘤成分的提取与分离

目的 :检测不同破壁率的灵芝孢子的醇提效果并用色谱技术对醇提物中的抗肿瘤成分进行分析。方法 :乙醇为溶剂对灵芝孢子粉进行振荡浸提 ,醇提物依次用硅胶柱和高效液相色谱分析 ,以各部分对Hela细胞的毒性作为其抗肿瘤活性的指标。结果 :未破壁孢子 ,6 0 %～ 80 %及 99%破壁率孢子的醇提率分别为 5 % ,2 5 % ,33%。99%破壁率灵芝孢子的醇提物经硅胶柱分离 ,氯仿洗脱部分对Hela细胞无毒害作用 ;甲醇洗脱部分的抗肿瘤活性约为乙酸乙酯洗脱部分的 34倍 ;甲醇洗脱部分经高效液相色谱分析 ,得到 2种活性较强且组成较为简单的混合物(Ⅱ1和Ⅱ3 )。结论 :灵芝孢子破壁后醇提物含量远高于未破壁孢子 ;甲醇 水洗脱系统可用于灵芝孢子醇提物中抗肿瘤活性成分的RP HPLC分析。

灵芝醇溶酸性组分的制备工艺与检测方法研究

目的 :研究灵芝子实体中醇溶酸性组分 (ethanol solubleandacidiccomponents ,ESAC)制备工艺 ,并建立一种定量测定EASC含量的方法。方法 :灵芝精粉用无水乙醇浸泡 ,碱提酸化和氯仿萃取得ESAC组分 ;利用ESAC与浓硫酸的特征性颜色反应进行定量测定。结果 :1 0 g级ESAC较优的制备工艺为 :灵芝精粉与无水乙醇的投料比 1 (g)∶1 5(mL) ,浸提时间 2 4h ,饱和NaHCO3溶液和氯仿萃取量分别为 1 30 0mL ,分 3次萃取。ESAC定量测定条件为 :样品量 1g ,溶剂 1 5mL ,浸泡 0 .5h ,50 %H2 SO4 乙醇溶液 ,1 0 0℃水浴加热 3min ,测定 490nm处光吸收值。结论 :本文提供的ESAC制备的工艺路线 ,具有设计合理、操作简便的特点 。

紫外分光光度法快速测定灵芝样品中三萜类化合物的含量

利用紫外分光光度法建立一种快速检测和定量测定灵芝中三萜类化合物含量的方法.以饱和NaHCO3溶液溶解灵芝三萜单体化合物标准品后,采用紫外分光光度法测定溶液在257nm处具有最大吸光度,标准品在0～200.0μg·mL-1范围内,吸光度与浓度呈良好的线性关系,相关系数r为0.99988.利用紫外分光光度法在提取三萜类化合物工艺的中间阶段,即碱提的NaHCO3层进行检测,根据标准曲线可计算出样品中三萜类化合物的含量.该测定方法简单快速、准确度高、实验误差小、重复性好,可以应用于灵芝及其相关产品的质量评估.

灵芝三萜类化合物高效液相指纹图谱研究

建立灵芝中所含三萜类组分(triterpenoidcomponents,TC)的高效液相指纹图谱.利用Agilent1100高效液相色谱仪对10批次灵芝TC样品进行了分析.色谱条件为:ZORBAX300SBC18分析柱(5μm,250.0mm×4.6mm),流动相为甲醇和质量分数为5%的醋酸(体积比4∶6)混合溶液,检测波长252nm.结果显示,10批次TC样品均出现8个主要特征峰,相对保留时间α分别为0.69,0.78,0.88,0.92,1.00,1.27,1.48和1.61,并且10批次TC样品的8个主峰面积均在70%以上,重叠率均在90%以上.

超声循环提取灵芝中三萜类化合物的研究

目的 研究超声循环技术在灵芝中三萜类化合物提取中的应用。方法 在常规提取方法的基础上 ,增加超声循环的处理步骤。结果 通过试验对比 ,超声循环提取所需各种溶剂用量减少 ,提取时间缩短 ,目的产物提取率提高了 4 0 %。与常规方法提取得到的目的产物之间存在着良好的相关性。结论 超声循环技术用于灵芝中三萜类化合物的提取具有良好的应用前景。

灵芝孢子研究进展

综述了近年来灵芝孢子研究方面的状况，包括成分分析、药理作用、临床应用以及今后的研究趋势。

灵芝醇溶酸性组分的抗肿瘤作用

本文探讨了灵芝醇溶酸性组分 (ethanol solubleandacidiccomponents,ESAC)的抗肿瘤作用。用溶剂提取法从灵芝精粉中提取ESAC并利用高效液相色谱对其主要成分进行分析。利用MTT法检测ESAC对 3种细胞系 (人肝癌系BEL74 0 2、人宫颈上皮癌细胞系HeLa和人脐静脉血管内皮细胞系HUVEC)体外生长的影响。同时通过腹腔注射给药测定ESAC对BEL74 0 2瘤株在裸鼠皮下生长的影响。结果显示 ,ESAC对 3种细胞的毒性有较大差异 ,IC50 值分别为 12 .4 μg/mL(BEL 74 0 2 )、12 9.2 μg/mL(HeLa)和 5 2 6 .6 μg/mL(HU VEC)。动物实验表明 ,2 0mg/kg/dESAC组的肿瘤抑制率为 4 3.9% ,而 5mg/kg/d组的肿瘤抑制率高达 74 .9% ,且毒副作用较小。本文结果提示 ,灵芝ESAC组分对肝癌生长有一定的选择性抑制作用。

内源性神经干细胞的研究进展

内源性神经干细胞（neural stem cells，NSCs）主要来源于神经系统，形成神经组织，具有自我更新能力和多向分化潜能。对NSCs的研究证实，其不仅可以用于治疗脑血管疾病、中枢神经系统慢性退变性等疾病，而且可用于神经细胞的替代疗法．充当基因治疗的载体，对神经畸形学等生命科学的研究也有重要意义。尽管NSCs具有低免疫原性、良好的组织融合性等特性，但目前应用外源性NSCs受到取材、医疗技术及相关法律法规等的限制，使其临床应用受到很大限制。因此，对内源性NSCs的分析和研究对未来科学研究有重要影响。