酶解羊毛粉替代鱼粉并添加胆汁酸对大口黑鲈幼鱼生长性能及脂质代谢的影响

本试验旨在研究酶解羊毛粉(EWM)替代鱼粉并添加胆汁酸(BA)对大口黑鲈幼鱼生长性能及脂质代谢的影响。试验选择180尾大小均匀、初始体重为(10.00±0.02)g的大口黑鲈幼鱼,随机分为3组,每组3个重复,每个重复20尾鱼。对照组(CON组)饲喂以鱼粉和豆粕为蛋白质源的基础饲料,酶解羊毛粉组(EWM组)饲喂在基础饲料中用酶解羊毛粉替代25%鱼粉的试验饲料,酶解羊毛粉+胆汁酸组(EWM+BA组)饲喂在基础饲料中用酶解羊毛粉替代25%鱼粉并添加0.6 g/kg胆汁酸的试验饲料。试验期56 d。结果表明:1)EWM+BA组的末重(FBW)、增重率(WGR)、特定增长率(SGR)均显著高于CON组和EWM组(P<0.05)。2)EWM组的血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量和肝脏中总胆固醇(TC)、总胆汁酸(TBA)含量均显著高于CON组(P<0.05)。EWM+BA组的肝脏TG、TC、TBA含量和血清TBA含量均显著低于EWM组(P<0.05)。3)EWM组的肝脏乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸结合蛋白(FABP)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)的mRNA相对表达水平显著高于CON组(P<0.05)。EWM+BA组的肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、ACC1、SCD、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、过氧化物酶体增殖激活受体α(PPARα)、脂蛋白脂酶(LPL)和瘦素(LEP)的mRNA相对表达水平显著高于CON组和EWM组(P<0.05)。4)EWM组和EWM+BA组的肝脏法尼醇X受体(FXR)、类视黄醇X受体(RXR)的mRNA相对表达水平显著低于CON组(P<0.05)。EWM组的肝脏小异二聚体伴侣(SHP)的mRNA相对表达水平显著高于CON组和EWM+BA组(P<0.05)。EWM+BA组的肝脏胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)和成纤维细胞生长因子19(FGF19)的mRNA相对表达水平显著高于CON组和EWM组(P<0.05)。由此可见,酶解羊毛粉替代部分鱼粉并添加外源胆汁酸可缓解酶解羊毛粉对大口黑鲈的生长性能、脂质代谢和胆固醇代谢产生的不利影响。

新农科与专创融合背景下农业高校《生物信息学》课程建设研究

生物信息学是一门专业性、实践性强的交叉学科,多为农业高校的专业选修课程。在中华民族伟大复兴战略全局和大众创业、万众创新大背景下,农业高校亟需通过开展创新创业教育,培养知农爱农的新型人才。本文基于新农科建设和专创融合的教育背景,分析河北农业大学海洋学院《生物信息学》课程目前存在的问题,围绕生物信息学课程的教学内容、教学理念、师资力量、教学手段等方面,将“新农科”的专业培养模式、创新创业教育与生物信息学知识有效融合,提出建设性意见和建议,以期为提升生物信息学教学质量提供参考。

黄颡鱼Wnt/β-catenin信号通路5个重要基因的识别及其在卵巢中的表达对铜暴露的响应

采用RT-PCR和RACE技术获取了黄颡鱼Wnt/β-catenin信号通路5个重要基因wnt2、wnt2bb、wnt3a、wnt8a和ctnnb1的全长cDNA序列,分别为1 743、2 133、1 379、1 508和2 636 bp,其中ORF长度分别为1 052、1 115、872、1 160和2 372 bp,分别编码351、372、291、387和791个氨基酸。氨基酸序列比对和系统发育树分析显示,上述基因十分保守,黄颡鱼与墨西哥丽脂鲤亲缘关系最近。组织表达分析显示,上述基因的mRNA在脑、脾脏、肾脏、鳃、心脏、肌肉、肠系膜脂肪、肝脏及卵巢等组织中都有表达,但表达水平不尽相同。这些基因在黄颡鱼卵巢中的表达水平对铜暴露的响应结果显示,在暴露28 d时,wnt3a mRNA水平随着铜浓度的增加而降低,而wnt8a趋势则相反,wnt2、wnt2bb和ctnnb1基因表达各个处理组间无显著性差异;在56 d时,wnt2、wnt2bb、wnt3a、wnt8a和ctnnb1基因表达各个处理组间均无显著差异。研究表明,Wnt/β-catenin信号通路基因的功能发生了分化,部分成员可能介导了铜影响黄颡鱼卵巢发育的调控。

黄颡鱼Wnt家族4个基因的克隆、组织表达及对铜的响应

为探究Wnt家族成员在黄颡鱼卵巢发育中的作用,研究首先采用RT-PCR和RACE技术获取了黄颡鱼Wnt5a、Wnt5b、Wnt7a和Wnt9b基因的全长c DNA序列,即1984、2905、2158和1622 bp,其中ORF长度分别为1124、1124、1049和1073 bp,编码375、375、350和358个氨基酸。氨基酸序列比对和系统树分析显示,这些基因十分保守,黄颡鱼WNT与墨西哥丽脂鲤和斑马鱼比较接近。组织表达分析表明,这些基因的m RNA在脑、脾脏、肾脏、鳃、心脏、肌肉、脂肪、肝脏及卵巢等组织中都有表达,但表达水平不尽相同。Wnt家族基因对铜的响应研究表明:在暴露28d时,Wnt7a m RNA水平随着铜浓度先上升后下降,但是Wnt5a、Wnt5b和Wnt9b基因表达各个处理组无显著性差异;在56d,Wnt5b在60μg Cu/L组最低,其他2个组差异不显著,Wnt9b m RNA水平随着铜浓度先上升后下降,但是Wnt5a和Wnt7a基因表达各个处理组无显著性差异,表明Wnt家族这些基因的功能发生了分化,部分成员介导了铜影响黄颡鱼卵巢发育的调控。研究首次揭示了黄颡鱼Wnt家族部分成员的基因结构和功能,为深入探讨他们在卵巢发育中的作用奠定了基础。

黄颡鱼bmp2a与bmp4基因启动子的克隆及分析

为研究黄颡鱼bmp2a与bmp4基因的功能及其相关转录因子的调控网络,采用RLM-5′RACE方法确定bmp2a与bmp4基因的转录起始位点,通过hiTAIL-PCR方法克隆bmp2a与bmp4基因启动子序列并运用生物信息学方法预测启动子序列上的关键转录因子结合位点。结果显示,bmp2a与bmp4基因的转录起始位点分别位于bmp2a与bmp4基因编码区上游的391bp与351bp处。克隆bmp2a与bmp4的1 830bp、1 962bp启动子序列,在启动子序列的基础上预测出AP1、SP1、E-box、GATA1、CREB、PPARγ、SOX5、SOX6和SOX9等转录因子的结合位点,提示这些转录因子对bmp2a与bmp4基因的转录调控发挥潜在的重要作用。