鹿筋的常温浸提工艺与化学成分分析及提取物抗炎镇痛活性研究

目的优化鹿筋的提取工艺,深入分析鹿筋提取物的化学成分,同时考察鹿筋提取物的抗炎镇痛活性,以期为其实践应用提供科学依据。方法以鹿筋浸膏得率为指标,料液比、提取时间、鹿筋大小为优化因素,利用单因素实验获得鹿筋提取的最佳工艺;利用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析鹿筋提取物各萃取层的化学成分;利用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的RAW264.7炎症模型研究鹿筋提取物的体外抗炎活性,利用醋酸致小鼠扭体实验、二甲苯致小鼠耳肿胀实验研究鹿筋提取物的体内抗炎镇痛活性。结果鹿筋提取最佳工艺为料液比1∶40、提取时间6 d、鹿筋大小60目,该条件下浸膏得率为12.05%;通过数据库对比,推测鹿筋各萃取层中包含异香兰素、α-亚麻酸、胞嘧啶等38种化学成分,结合网络药理学结果,推测其中石斛碱、异阿魏酸、姜黄醇、辣椒素、金丝桃苷、山楂酸等具有抗炎镇痛作用;鹿筋提取物可以显著抑制LPS诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病RAW264.7细胞中炎症因子一氧化氮(nitric oxide,NO)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的分泌,可以显著抑制醋酸引起的小鼠扭体和二甲苯引起的小鼠耳肿胀。结论优化的鹿筋提取工艺、利用UPLC-MS/MS测得的鹿筋化学成分及相关抗炎镇痛实验为鹿筋抗炎镇痛等保健方面的进一步应用提供了重要的数据支持,为我国东北等地丰富的鹿筋资源提供了新的发展路线。