载辛伐他汀β-磷酸三钙支架复合脂肪干细胞修复兔颅骨缺损

目的:应用辛伐他汀(simvastatin)作用于脂肪干细胞,研究其对细胞生长、成骨、成血管分化的影响;利用β-磷酸三钙(β-tricalcium phosphate,β-TCP)三维支架材料负载辛伐他汀,与脂肪干细胞复合,构建组织工程骨,用于兔颅骨缺损模型的修复。方法:原代培养兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells,rASCs),分别以含0、0.01、0.1和1μmol/L辛伐他汀的培养液培养,计数法检测细胞数目;以0、0.05、0.1μmol/L浓度辛伐他汀培养ASCs,1、7 d后,实时定量PCR检测成骨、成血管基因的表达(RUNX2、OPN、OCN、VEGF);7 d后行ALP染色;14 d后行茜素红染色。12只新西兰大白兔颅顶双侧8 mm缺损,分别以4组材料修复(A:β-TCP,B:β-TCP/Cell,C:β-TCP/Sim,D:β-TCP/Cell/Sim),每组6例,植入8周后取材,进行组织学观察。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:0.05μmol/L辛伐他汀对脂肪干细胞RUNX2、OCN、OPN和VEGF等成骨、成血管基因的表达具有明显促进作用,碱性磷酸酶染色和von Kossa染色更为明显;植入体内8周后,β-TCP/Cell/Sim组材料的成骨面积显著大于其他3组。结论:0.05μmol/L辛伐他汀在体外对ASCs具有明显的促成骨作用,载辛伐他汀β-TCP复合脂肪干细胞可促进兔颅骨缺损的修复。

人血、尿中富马酸喹硫平的气相色谱分析

目的建立人血、尿中富马酸喹硫平的气相色谱分析方法。方法用乙醚提取血、尿中的富马酸喹硫平，直接对其进行定性、定量分析。以正常人血、尿为空白样本，分别添加标准富马酸喹硫平，确定检材的前处理方法、色谱分析条件、工作曲线、线性范围、方法的精密度、回收率等，并对1例大剂量服用富马酸喹硫平中毒死者的体液浓度进行测定。结果该方法分析血、尿中富马酸喹硫平的线性范围分别为8．0～800．0μg／ml和20．0—800．0μg/ml；最低检测限分别为0．04μg／ml和0．10μg／ml（S／N≥3），日内、日间精密度均小于4％，回收率在97．08％-101．42％之间。结论该分析方法操作便捷、实用、准确度高，适用于富马酸喹硫平的临床血药浓度快速监测和法医毒物鉴定。

固有淋巴样细胞在口腔鳞状细胞癌微环境中的作用探讨

口腔鳞状细胞癌(OSCC)是口腔癌的主要类型,其发病率高,侵袭能力强,易转移,疗效不佳,预后较差,给患者的口颌正常功能、外形、人际交往和心理状态造成巨大负面影响。固有淋巴样细胞(ILC)是驻扎在黏膜屏障中的重要免疫细胞组分,在肿瘤发生、发展、转归等进程中均发挥重要作用,是解码肿瘤微环境调控机制、全景式绘制肿瘤进展的关键细胞。本文简要综述ILC的研究进展,归纳ILC在OSCC免疫微环境中可能的特性及作用,挖掘ILC和OSCC发生、发展的关联,为OSCC免疫治疗提供新的思路。

医患沟通教育在口腔修复教学中的应用与效果评价

目的:探讨医患沟通教育在口腔修复学教学中的应用效果。方法:将口腔修复科实习的五年制口腔医学本科生随机分为2组:实验教学组(n=25)采用医患沟通教育融合常规教学模式;传统教学组(n=25)采用常规教学模式。利用医患沟通行为量表测评,教学效果调查问卷比较两种教学模式的效果。结果:实验教学组医患沟通能力优于传统教学组(P<0.05),医学生也更喜欢融合教育模式(100%)。结论:将医患沟通教育融入口腔修复传统教学中有利于提高医学生医患沟通能力和教学满意度。

浓缩生长因子活化AMPK实现拔牙窝早期免疫炎性调节的实验研究

目的:探讨浓缩生长因子(CGF)对拔牙窝早期免疫炎性调节的作用机制。方法:将16只SPF级雄性健康大鼠随机分为4组,C-CON组:空白对照,CGF组:单纯添加CGF,CGF-COMP组:CGF+Compound C,CGF-AICAR组:CGF+Compound C+AICAR,每组4只。制备CGF凝块,拔除上颌第二磨牙,拔牙位点植入上述4组材料。术后3 d处死动物,收集拔牙窝局部组织样本,通过ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10浓度变化,Western blot分析AMPK、NF-κB表达及磷酸化水平。结果:ELISA法显示CGF组中促炎因子IL-1β浓度最低,抑炎因子IL-10浓度最高,使用Compound C抑制AMPK活性后,IL-1β浓度显著增高,IL-10浓度显著降低;而当AICAR重新激活AMPK后,IL-1β浓度再次降低,IL-10浓度再次增高。促炎因子IL-6和TNF-α浓度在4组中的变化模式和IL-1β相似。Western blot分析显示CGF组中AMPK磷酸化水平最高,CGF-COMP组中AMPK磷酸化水平最低,NF-κBp65磷酸化水平最高。与C-CON组比较,CGF组AMPK磷酸化水平显著升高,NF-κBp65磷酸化水平显著降低。使用Compound C抑制AMPK活性后,AMPK磷酸化水平显著降低,NF-κBp65磷酸化水平显著升高。当AICAR重新激活AMPK后,AMPK磷酸化水平再次升高,NF-κBp65磷酸化水平再次降低。结论:CGF可能通过AMPK/NF-κB信号通路实现对拔牙窝早期的免疫炎性调节。

大肠杆菌脂多糖对小鼠骨髓间充质干细胞炎症因子分泌的影响

目的:探讨大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)炎症细胞因子分泌的影响。方法:全骨髓贴壁法提取并培养小鼠BMSCs,CCK-8法检测LPS对BMSCs的毒性作用,用LPS(1μg/mL)激发小鼠BMSCs炎症反应,继续培养1 h,8 h,24 h后,qPCR法检测细胞白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β),白细胞介素10(interleukin-10,IL-10),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA的表达水平;Western Blot法分析细胞内IL-1β,IL-10,TNF-α蛋白的表达情况;ELISA法分析细胞上清中IL-1β,IL-10,TNF-α蛋白的表达情况。结果:CCK-8结果显示1μg/mL LPS处理对BMSCs无毒性作用;qPCR结果显示TNF-α,IL-1β,IL-10的表达均有不同程度增加,其中TNF-αmRNA的表达在诱导1 h后便显著上调,随后逐渐下降,IL-10和IL-1βmRNA的表达在1~8 h内逐渐上调,随后(8~24 h)下降;Western Blot结果显示:TNF-α和IL-1β蛋白的表达在1~8 h内增加,随后减少,IL-10蛋白的表达在24 h内逐渐增加;ELISA结果显示:TNF-α蛋白的表达在1~8 h内均显著增加,随后逐渐减少,IL-1β,IL-10蛋白的表达在24 h内均逐渐增加。结论:LPS刺激上调了BMSCs促炎因子IL-1β,TNF-α,抑炎因子IL-10的表达,不同细胞因子的表达在时间上存在先后顺序,这可能与BMSCs通过自身免疫调节机制(促炎/抑炎轴)分泌细胞因子来调节炎症过程有关。

基因治疗用于骨组织工程的研究进展

基因治疗在骨再生领域得到了广泛应用。各种成骨基因可以结合不同的载体、支架;通过各种投递方式被传递至靶区,调控目的基因的时空表达,最终实现骨的再生。本文就基因增强骨组织工程技术(gene enhanced bone tissue engineering technology)的最新进展进行综述,讨论了现有治疗策略的局限性以及各种基因载体的优缺点,并对未来的发展方向做出展望。