人胶质瘤自杀基因细胞系的建立及其在胶质瘤治疗研究中的应用

目的构建CD基因工程化人脑胶质瘤细胞并在此基础上进行胶质瘤治疗研究。方法通过In-fusion基因克隆的方法,构建携带CD基因慢病毒载体;通过293T细胞体外包装获得慢病毒,并测定病毒效价;通过慢病毒体外感染细胞获得CD基因工程化人脑胶质瘤细胞;通过流式分选获得基因稳定表达细胞;通过CCK-8评价加入5-FC前药和(或)HSV-1后细胞存活率。结果成功构建p LVX-CD-IRES-Zs Green1慢病毒载体并体外包装获得相应慢病毒;慢病毒感染人脑胶质瘤U87细胞后获得携带CD基因的阳性细胞,并通过体外培养30天后流式分选获得稳定阳性细胞;加入前药5-FC和(或)HSV-1后对携带CD基因的U87细胞杀伤作用明显(P<0.01),其中5-FC联合HSV-1对胶质瘤细胞作用更加高效(P<0.01)。结论成功获得携带CD基因的人脑胶质瘤细胞;前药5-FC联合HSV-1对胶质瘤细胞具有更加高效的杀伤疗效。

基底节区高血压脑出血CT分型及其对手术选择的影响

目的探讨基底节区高血压脑出血CT分型,并分析其对手术选择的影响。方法将我院收治的72例基底节区高血压脑出血患者作为研究对象,依照CT影像中出血部位和累及区域将基底节区脑出血进行分型(前部型、后部型、中间型和混合型),根据CT分型选择手术入路,分析手术治疗效果。结果72例患者CT分型显示前部型比例为9.72%(7/72),后部型比例为48.61%(35/72),中间型比例为27.78%(20/72),混合型比例为13.89%(10/72)。所有患者均顺利完成手术,其中38.89%(28/72)经侧裂-岛叶入路,61.11%(44/72)经中央后回下点-岛叶入路。术后1d脑部CT复查显示血肿清除超过90%者67例,血肿清除为75%-90%者5例,平均住院时间(15.93±1.78)d。所有患者术后均随访6个月以上,GOS评分显示恢复良好比例为23.61%,中度残疾比例为50.00%,重度残疾比例为22.22%,植物生存比例为4.17%,无死亡。结论依照CT影像中侧裂前点和血肿主体关系对基底节区高血压脑出血患者进行分型,可指导手术入路选择,有利于血肿清除,改善预后。

颅内动脉瘤急症介入术后神经系统并发症相关因素探讨

目的探讨颅内动脉瘤急症介入术后发生神经系统并发症的相关因素。方法收集2010年1月至2017年12月采用急症介入术治疗的颅内动脉瘤破裂患者453例临床资料。根据是否发生神经系统并发症分为并发症组和无并发症组。观察分析患者并发症发生情况和发生率,并通过单因素统计分析及多因素logistic回归分析探讨并发症发生原因及独立危险因素。结果 453例患者中共有59例(13.0%)发生神经系统并发症,多为血栓栓塞,其次为术后早期再破裂出血和术中动脉瘤破裂。单因素分析结果显示,有高血压病史、脑梗死病史、Fisher分级Ⅲ～Ⅳ级、WFNS分级Ⅲ～Ⅴ级、Hunt-Hess分级Ⅳ～Ⅴ级以及宽颈动脉瘤、动脉瘤囊有小阜和瘤体形态不规则患者神经系统并发症发生率明显更高(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,有高血压病史、宽颈动脉瘤、动脉瘤囊有小阜、瘤体形态不规则以及Fisher分级Ⅲ～Ⅳ级、WFNS分级Ⅲ～Ⅴ级、Hunt-Hess分级Ⅳ～Ⅴ级为介入术后发生神经系统并发症的独立危险因素(P<0.05)。结论临床治疗急症颅内动脉瘤中对有高血压病史、宽颈动脉瘤、动脉瘤囊有小阜、瘤体形态不规则以及Fisher分级Ⅲ～Ⅳ级、WFNS分级Ⅲ～Ⅴ级、Hunt-Hess分级Ⅳ～Ⅴ级患者应予以重视,给予针对性治疗,以减少神经系统并发症发生。

支链氨基酸氨基转移酶1在恶性胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨不同级别神经胶质瘤中支链氨基酸氨基转移酶1（BCAT1）的表达水平及其与肿瘤增殖的关系.方法 收集首都医科大学附属北京天坛医院神经外科2012至2013年手术切除的54例神经胶质瘤标本,免疫组化检测54例神经胶质瘤中BCAT1和Ki-67的表达水平;实时荧光定量PCR检测BCAT1基因的表达程度.结果 （1）BCAT1表达水平随着病理分级的增高而增多（P＜0.05）;（2）其表达程度与Ki-67表达呈正相关（r=0.825,P＜0.01）;（3）随着胶质瘤恶性程度的增高,BCAT1 mRNA的表达增高,WHO Ⅰ级（0.5587±0.2038）和Ⅱ级（1.3499±0.3964）之间的表达差异具有统计学意义（P＜0.01）,WHOⅡ级和Ⅲ级之间的表达差异具有统计学意义（P＜0.01）,WHOⅢ级（2.0004±0.4025）和Ⅳ级（3.0656±0.4955）之间的表达差异具有统计学意义（P＜0.01）.结论 BCAT1与神经胶质瘤恶性程度呈正相关,恶性程度越高其BCAT1表达水平越高.

FASN在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的研究人脑胶质瘤标本中脂肪酸合成酶（FASN）的表达水平及其临床意义。方法体外常规培养人脑胶质瘤细胞系U87和U373，免疫荧光染色检测U87和U373细胞FASN的表达。收集首都医科大学附属北京天坛医院神经外科自2012年3月至2013年3月手术切除的原发性胶质瘤标本67例，其中WHO分级Ⅰ级3例，Ⅱ级29例，Ⅲ级22例，Ⅳ级13例。免疫组化染色检测胶质瘤标本中FASN、增殖因子Ki-67、CD34的表达，比较不同级别胶质瘤标本中FASN、Ki-67的表达水平及微血管密度（MVD）。Spearman相关分析胶质瘤标本FASN与Ki-67表达水平、FASN表达水平与MVD之间的关系。结果免疫荧光染色检测显示U87和U373细胞浆中均表达FASN；免疫组化染色显示人胶质瘤标本中FASN定位于细胞浆，Ki-67定位于细胞核，CD34定位于细胞膜。Ⅰ级胶质瘤标本中FASN的表达（3．3683±0．6549）低于Ⅱ级（4．0512±0．4859），Ⅲ级胶质瘤标本中FASN的表达（4．1881±0．5755）低于Ⅳ级（4．6996±0．5164），差异有统计学意义（P〈0．05）；Ⅱ级胶质瘤标本MVD低于Ⅲ级，Ⅲ级胶质瘤标本MVD低于Ⅳ级，差异有统计学意义（P〈0．05）；11级胶质瘤标本Ki-67的表达低于Ⅲ级，差异有统计学意义（P〈0．05）。Spearman相关分析显示胶质瘤标本中FASN与Ki-67的表达呈正相关关系（r=0．636，P=0．014），且FASN的表达与MVD也呈正相关关系（r=0．606，P=0．030）。结论人脑胶质瘤中FASN的表达水平越高，肿瘤细胞的增殖能力越强，血供趋于越丰富，肿瘤的恶性度趋于增高。

VP22-CD基因工程化载体对胶质瘤细胞体外杀伤作用的研究

目的构建CD以及VP22-CD基因工程化载体，并探讨其在体外对胶质瘤细胞的杀伤作用。方法利用聚合酶链式反应（PCR）得到CD以及VP22基因片段；利用In—fusion基因克隆方法将得到的基因片段插入到pEGFP—N1载体中，构建CD以及VP22-CD基因工程化载体；利用脂质体转染的方法将构建的基因工程化载体转染到胶质瘤细胞c6及U87细胞中，并通过体外光镜及荧光显微镜观察转染率；利用MTT比色法评价加入前药5-氟胞嘧啶后对转染后胶质瘤细胞的杀伤率。结果（1）将CD基因或VP22-CD融合基因插入到pEGFP—CD载体中，构建得到pEGFP—CD以及pEGFP—VP22-CD载体。（2）pEGFP—CD及pEGFP—VP22-CD载体可转染入c6或U87胶质瘤细胞，转染率分别为2．5％和3．7％以及2．0％和4．1％。（3）在c6或U87细胞中转染pEGFP—CD或pEGFP-VP22．CD载体并加入前药5．氟胞嘧啶后，细胞的存活率分别为（30．36±0．63）％和（11．75±1．01）％以及（28．78±3．62）％和（18．26±2．27）％，与转染pEGFP—N1组相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。（4）在C6或U87细胞中加入前药5-氟胞嘧啶后，转染pEGFP—VP22-CD组与转染pEGFP—CD组相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论CD／5-FC系统在体外对恶性胶质瘤细胞具有显著的杀伤作用和旁观者效应；并且穿梭蛋白VP22可进一步促进系统对细胞的杀伤作用。

民航飞行员颅内动脉瘤介入栓塞术后复飞八例分析及航空医学鉴定标准探讨

目的探讨民航飞行员颅内动脉瘤介入栓塞术后的航空医学鉴定标准及随访情况。方法回顾性分析2012年6月至2020年11月8例中国民航飞行员颅内动脉瘤介入栓塞术的临床诊治、特许鉴定和随访情况,并进行国内外文献复习。结果7例动脉瘤患者脑核磁筛查偶然检出8个未破裂动脉瘤,1例因蛛网膜下腔出血检出1个破裂动脉瘤。7例动脉瘤未破裂者术后地面观察1年以上特许鉴定合格,不得履行机长职责和限制飞行小时数(双限制),复飞1年后逐步取消限制,随访4~7年。1例动脉瘤破裂者术后地面观察满2年特许鉴定合格,双限制,复飞1年后因记忆力下降放弃体检鉴定,失访。结论飞行员颅内动脉瘤介入栓塞术后的航空医学鉴定,应充分考虑其主诉、临床特点、影像学表现、脑电图、认知和飞行能力,结合其复飞意愿进行个体化评估,复飞后应长期随访。