CYP2B6对农药p,p’-DDT的代谢活性及代谢产物解析

目的:本研究选择细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP)2B6介导p,p’-滴滴涕(dichloro-diphenyl-trichloroethane,DDT)生物转化过程进行研究,为该类持久性有机污染物的风险评估和防治提供依据。方法:建立气相色谱/质谱联用仪(GCMS/MS)的检测方法以检测生物样本中的p,p’-DDT;利用重组酶CYP2B6构建体外代谢模型,采用米式方程计算代谢动力学参数;采用抑制剂8-MOP验证CYP2B6对p,p’-DDT的代谢能力;构建SD大鼠体内代谢模型(大鼠CYP2B1是人CYP2B6的同源酶),尾静脉注射p,p’-DDT和CYP2B6的特异性抑制剂KR-Ⅱ,收集血清(0、5、10、20、30 min)以及肝脏微粒体,比较对照组以及抑制剂组大鼠肝脏中CYP2B1活性以及肝脏和血清中p,p’-DDT原形及代谢产物p,p’-DDE、p,p’-DDD水平的变化。结果:成功建立了多种DDT及代谢产物的GC-MS/MS检测方法。体外代谢证实CYP2B6可代谢p,p’-DDT产生以p,p’-DDE为主的代谢产物,动力学参数K_(m)为15.12μmol/L,每纳摩尔P450酶的V_(max)为12.8nmol/min;抑制剂8-MOP可显著抑制CYP2B6活性,代谢产物p,p’-DDE的含量显著下降。CYP2B1表达被抑制后,大鼠肝脏中CYP2B1的酶活性显著下降,肝脏和血清中的代谢产物p,p’-DDE和p,p’-DDD含量也明显降低。结论:CYP2B6可以代谢p,p’-DDT生成以p,p’-DDE为主的代谢产物,是DDT的主要优势代谢酶。考虑到人群中CYP2B6的表达和活性存在差异,本研究可为DDT暴露危害的易感人群筛选及风险评估的优化提供依据。

环境化学物对精母细胞的损伤及其分子机制研究进展

研究表明,许多环境化学物可影响男性精子质量和生殖能力。精母细胞是男性生殖系统中的重要组成细胞,承担着减数分裂等重要任务,具有高度复杂的基因调控网络及表观遗传修饰稳态,可能是环境化学物影响精子质量重要的作用靶点。环境化学物不仅可干扰基因调控网络使精母细胞损伤或减数分裂异常,还可能影响精子中重要蛋白的形成,导致精子质量下降。该文聚焦环境化学物损伤精母细胞及其分子机制的国内外进展,以期为探明精子异常及男性不育的分子机制、降低环境化学物的生殖危害、促进男性生殖健康提供线索。