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似鲶高原鳅温和气单胞菌的分离鉴定及其感染的病理损伤 被引量:7
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作者 徐敬钧 耿毅 +5 位作者 汪开毓 陈成 周燕 陈德芳 黄小丽 蒲云丹 《四川动物》 CSCD 北大核心 2014年第5期708-714,共7页
2013年9月,四川雅安某似鲶高原鳅养殖场发生以体表出血、皮肤溃疡、内脏器官肿大、出血与坏死为特点的疾病。从自然发病的似鲶高原鳅肝与肾分离到1株G-短杆菌(XJJ130928),其在BHI平板上28℃培养24 h,形成灰白色、表面光滑、边缘整齐... 2013年9月,四川雅安某似鲶高原鳅养殖场发生以体表出血、皮肤溃疡、内脏器官肿大、出血与坏死为特点的疾病。从自然发病的似鲶高原鳅肝与肾分离到1株G-短杆菌(XJJ130928),其在BHI平板上28℃培养24 h,形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、半透明状微隆的圆形菌落,人工感染证实其为本次似鲶高原鳅发病的病原菌。根据分离菌株的形态学和生理生化检测结果初步判定其为温和气单胞菌Aeromonas sobria;进一步的16S rRNA和gyrB基因序列分析表明,分离株的16S rRNA与gyrB基因序列(GenBank登录号:KF761305与KJ139988)在GenBank中进行Blast比对与A.sobria同源性最高。在以分离株16S rRNA和gyrB基因序列及GenBank中同源性较高的序列构建的系统发育树上,分离株与A.sobria聚为一族,其同源性分别为96.0%-99.0%与94.5%-98.0%,结合生理生化特性鉴定分离菌为A.sobria。该菌对头孢西丁、亚胺培南、强力霉素、氟苯尼考和氧氟沙星等敏感,对磺胺甲基异恶唑、洛美沙星、环丙沙星中度敏感,对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素耐药。组织病理学观察发现,A.sobria感染似鲶高原鳅对多组织器官都造成明显的病理损伤,尤其是肝、肾、脾、肠的损伤较为严重,表现为明显的淤血、出血,变性,坏死及炎症细胞浸润。 展开更多
关键词 似鲶高原鳅 温和气单胞菌 16S RRNA GYRB 病理损伤
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齐口裂腹鱼源致病性爱德华菌的鉴定及致病性研究 被引量:3
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作者 刘韬 汪开毓 +7 位作者 耿毅 陈德芳 陈成 余泽辉 蒲云丹 徐敬钧 周燕 王均 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期636-640,共5页
为鉴定一起齐口裂腹鱼突发传染病的病原,本研究从患病濒死鱼中分离到两株致病菌并对其进行常规理化特性、分子生物学、病理学和致病性试验以及药敏性检测。结果显示,两分离株理化特性与迟钝爱德华菌(E.tarda)特征相符,与GenBank中E.tard... 为鉴定一起齐口裂腹鱼突发传染病的病原,本研究从患病濒死鱼中分离到两株致病菌并对其进行常规理化特性、分子生物学、病理学和致病性试验以及药敏性检测。结果显示,两分离株理化特性与迟钝爱德华菌(E.tarda)特征相符,与GenBank中E.tarda的16S rDNA、gyrB基因、fimA毒力基因和gadB毒力基因的序列同源性均达99%以上,在系统发育树中与E.tarda聚为一族,毒力基因双重PCR扩增出443 bp和584 bp两条特异性片段,综合确认分离株为致病性E.tarda,将其命名为Et-1和Et-2。人工感染鱼出现与自然发病相似症状,并能从发病鱼组织中再分离到相同病原菌。分离菌株对20种抗生素中氟苯尼考、左氧氟沙星等10种药物敏感。 展开更多
关键词 迟钝爱德华菌 齐口裂腹鱼 16S RDNA GYRB 病理损伤
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似鲇高原鳅败血症病原菌的分离鉴定与病理学观察 被引量:2
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作者 周燕 耿毅 +5 位作者 汪开毓 阳磊 刘丹 徐敬钧 陈德芳 黄小丽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期863-866,871,共5页
为确定一起似鲇高原鳅败血症疫情的病原,本实验通过无菌操作从病鱼体内分离到一株优势菌(GYQ),以腹腔注射与浸泡的方式进行人工感染试验,证明其为似鲇高原鳅败血症的病原菌。根据分离菌的形态、生理生化特性,结合16S r DNA和gyr B基因... 为确定一起似鲇高原鳅败血症疫情的病原,本实验通过无菌操作从病鱼体内分离到一株优势菌(GYQ),以腹腔注射与浸泡的方式进行人工感染试验,证明其为似鲇高原鳅败血症的病原菌。根据分离菌的形态、生理生化特性,结合16S r DNA和gyr B基因序列测定(KF952599和KJ001821)与系统发育分析,将其鉴定为鮰爱德华氏菌(E.ictaluri)。病鱼组织器官具有典型的败血症病理变化,以全身多组织器官充出血、细胞变性、坏死以及炎性细胞侵润为主要特征,尤其是肝、肾、脾、肠和脑较为严重。药敏结果显示该菌对氟苯尼考、强力霉素等6种药物表现为敏感;对庆大霉素等4种药物表现为不敏感。 展开更多
关键词 似鲇高原鳅 败血症 鮰爱德华氏菌 分离鉴定 病理损伤
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大鳄龟感染蛙病毒的PCR检测及组织病理分析 被引量:3
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作者 余泽辉 耿毅 +6 位作者 汪开毓 周燕 邓梦玲 刘丹 陈成 徐敬钧 范玉蕾 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期68-74,共7页
2013年3月成都市某海洋馆送检2只发病大鳄龟(Macrochelys temminckii),临床特征表现为:精神状态萎靡,爬行无力,对外界刺激反应迟钝;颈部和四肢局部红肿,腹甲溃烂,严重部位甚至穿孔,最后死亡。为明确患病大鳄龟的病因,进行了细菌学、... 2013年3月成都市某海洋馆送检2只发病大鳄龟(Macrochelys temminckii),临床特征表现为:精神状态萎靡,爬行无力,对外界刺激反应迟钝;颈部和四肢局部红肿,腹甲溃烂,严重部位甚至穿孔,最后死亡。为明确患病大鳄龟的病因,进行了细菌学、组织病理学和PCR检查。细菌学检查阴性;病理组织学观察发现,大鳄龟多组织、器官均发生严重病变,尤其是肾、肝、肺和心的损伤最为严重,表现为明显的变性、坏死和炎症细胞浸润,并在一些病变组织细胞浆内见嗜酸性或嗜碱性包涵体。针对蛙病毒(Ranavirus)病毒的特异性PCR检测扩增出蛙病毒主要衣壳蛋白(MCP)基因500 bp目的片段,测序后的DNA序列与Gen Bank中已知核酸序列进行Blast比对,发现其与Gen Bank中的蛙病毒主要衣壳蛋白基因同源性达95%~99%。根据组织病理特点及PCR检测结果推测大鳄龟的死亡是感染蛙病毒所致。 展开更多
关键词 大鳄龟 蛙病毒 组织病理 PCR检测
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大鲵蛙病毒US22家族基因的TaqMan MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:1
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作者 徐敬钧 耿毅 +5 位作者 余泽辉 汪开毓 陈德芳 欧阳萍 牟维豪 黄小丽 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期749-755,共7页
为了进行大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)的早期诊断,以US22家族基因作为靶基因,建立大鲵蛙病毒Taq Man MGB实时荧光定量PCR检测方法,同时对该方法进行特异性、敏感性、重复性评估,并对73份未知大鲵血液样品进行... 为了进行大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)的早期诊断,以US22家族基因作为靶基因,建立大鲵蛙病毒Taq Man MGB实时荧光定量PCR检测方法,同时对该方法进行特异性、敏感性、重复性评估,并对73份未知大鲵血液样品进行检测。结果显示,标准曲线在所选浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.997;该方法对大鲵蛙病毒的检测有高度特异性,与其他8种病毒或细菌之间均无交叉反应;灵敏性良好,能检测到2.00×101copies/L的标准品浓度,比普通PCR高1 000倍;批内和批间重复的变异系数均小于2%,重复性好;在73份未知样品检测中,Taq Man MGB实时荧光定量PCR能够检测到更低浓度的病毒,较常规PCR的敏感性更佳。鉴于该方法快速、特异、敏感、可重复、可定量的优点,对大鲵蛙病毒早期潜伏感染的快速诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 大鲵蛙病毒 US22家族基因 TAQMAN MGB实时荧光定量PCR 大鲵
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