左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响

目的观察左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响。方法取60只ICR小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺方式建立卵巢早衰模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组及左归丸低、中、高剂量组各12只,另选取12只ICR小鼠作为正常组。左归丸低、中、高剂量组分别给予13.65 g/kg、40.95 g/kg、122.85 g/kg左归丸浸膏灌胃,戊酸雌二醇组给予0.13 mg/kg戊酸雌二醇溶液灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均连续灌胃30 d。观察各组小鼠动情周期情况;ELISA法检测灌胃10 d、20 d血清抗苗勒管激素(AMH)水平和灌胃结束后血清AMH、雌二醇(E_(2))、促卵泡激素(FSH)水平;透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构;Western blot及qRT-PCR法分别检测卵巢组织中自噬相关基因Beclin-1、LC3B、p62蛋白和mRNA表达情况,并通过激光共聚焦显微镜对以上基因进行定位和定量分析。结果与正常组比较,模型组小鼠动情周期紊乱;血清AMH水平呈持续下降趋势(P<0.05),血清E_(2)水平明显降低(P<0.05),血清FSH水平明显升高(P<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体增多;卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度明显减弱(P<0.05)。与模型组比较,左归丸高剂量组及戊酸雌二醇组小鼠动情周期均明显改善;血清AMH、E_(2)水平均明显升高(P均<0.05),血清FSH水平均明显降低(P均<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体减少;卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显减弱(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05)。结论左归丸可以改善卵巢早衰小鼠动情周期紊乱,调节卵巢储备、血清性激素水平以及卵巢组织自噬相关基因的表达,改善卵巢颗粒细胞超微结构并抑制自噬小体的产生,左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢的保护作用与抑制卵巢过度自噬相关。

基于转录组学分析研究左归丸对化疗损伤性颗粒细胞的保护机制

目的:通过RNA-seq技术检测左归丸含药血清治疗磷酰胺氮芥(PM)损伤颗粒细胞(GCs)的基因表达变化,探究左归丸可能的作用机制。方法:对PM损伤后的GCs给予左归丸含药血清干预,采用RNA-seq技术对正常组、模型组、10%左归丸含药血清组进行测序。对获取的基因进行筛选,筛选得到符合标准的差异基因后通过基因本体论(GO)数据库、京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库进行富集分析,通过STRING数据库进行蛋白质相互作用分析,最后对测序结果进行qRT-PCR验证。结果:与正常组比较,模型组GCs总凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,10%左归丸含药血清组GCs总凋亡率明显降低(P<0.05);与正常组比较,模型组共筛选得到1 261个差异表达基因,GO富集显示,差异基因在生物过程注释中与染色体分离等相关,细胞组分注释中与浓缩染色体等相关,分子功能注释中与催化活性等相关;KEGG富集显示,差异基因涉及细胞因子-细胞因子受体互作、细胞周期、IL-17通路等。与模型组比较,左归丸含药血清组共筛选得到734个差异表达基因,GO富集显示,差异基因在生物过程注释中与染色体分离等相关,细胞组分注释中与染色体区域等相关,分子功能注释中与DNA催化活性等相关;KEGG富集显示,差异基因涉及细胞周期、细胞因子-细胞因子受体互作、卵母细胞减数分裂、p53信号通路等。结论:左归丸含药血清对PM损伤后的GCs具有一定挽救作用,其机制可能与细胞周期、细胞因子-细胞因子受体互作、卵母细胞减数分裂、p53信号通路等生物学途径相关。

干细胞源性细胞外囊泡治疗早发性卵巢功能不全的机制研究进展

早发性卵巢功能不全(POI)是育龄期女性不孕的重要原因之一,目前临床治疗方法有限,治疗效果不理想。近年来,干细胞来源的细胞外囊泡作为一种新型的无细胞治疗方式备受关注。多项动物实验研究显示,各种干细胞来源的细胞外囊泡携带微小RNA、长链非编码RNA、脂质、蛋白质等多种生物活性物质,可改善卵巢功能、影响颗粒细胞增殖和凋亡、促进卵巢血管生成及减轻氧化应激反应,从而对POI发挥治疗作用。本文对干细胞来源的细胞外囊泡治疗POI的相关机制研究进行综述,旨在为其早日应用于POI的临床治疗提供依据。

护理本科学生参与“时间银行”志愿养老服务意愿的原因及影响因素分析

目的了解高校护理本科学生参与“时间银行”志愿养老服务的意愿,分析影响护理本科学生参与意愿的原因。方法采用自行设计的“时间银行”志愿养老服务意愿调查问卷,对洛阳市某本科护理院校208名学生进行问卷调查。结果94.71%(197/208)学生愿意参加“时间银行”志愿养老服务,学生在“时间储蓄”志愿养老提供的服务等内容上有不同理解。卡方检验结果分析显示年龄、性别、政治面貌、是否从事医学相关专业对护理本科学生的“时间银行”志愿养老服务意愿有影响(P<0.05)。结论高校护理本科生愿意参与并提供多方面的志愿照护服务,多种因素影响学生的志愿服务意愿。