黄芪总黄酮对特发性肺纤维化miRNA-21、let-7 d及TGF-β/smad信号干预作用

目的：研究黄芪总黄酮对BLM诱导的肺纤维化模型miRNA-21、let-7 d表达水平和TGF-β1/smad信号干预作用。方法：C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪总黄酮组。模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素（10 mg/kg）,假手术组予等量生理盐水,造模后治疗组予黄芪总黄酮（43 mg/kg）灌胃,假手术组和模型组与等量生理盐水灌胃。第28天取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,realtime-PCR分析miRNA-21、let-7 d表达变化,Western-Bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果：BLM诱导肺纤维化miRNA-21明显上调,而let-7 d下调,在此过程中信号蛋白smad7表达增强mad3磷酸化水平减弱,EMT标记蛋白α-SMA表达增高而E-cadherin减少,黄芪总黄酮对上述改变具有逆转作用,但对let-7 d表达无影响。结论：黄芪总黄酮可通过抑制miRNA-21,增加smad7表达,使TGF-β1/smad激活能力下降,抑制肺纤维化EMT作用。

黄芪提取物对肺纤维化小鼠肺泡炎症影响及抗纤维化作用研究

目的:研究黄芪多糖、黄芪总黄酮、和黄芪总皂苷对博莱霉素(BLM)诱导肺纤维化KM小鼠肺泡炎症影响及抗肺纤化的作用。方法:KM小鼠随机分为假手术组、模型组、药物处理组(黄酮组、多糖组、皂苷组、皂苷+黄酮组)共6组,模型组及药物处理组小鼠气管内一次性滴注BLM,假手术组予等量生理盐水,造模后予相应药物或生理盐水灌胃,第28天取材;分别行肺泡灌洗液细胞计数分类,肺组织HE、Masson染色,免疫组化及western blot测TGF?β1、TNF?α表达水平。结果:1与对照组比较,模型组肺泡灌洗液(BALF)单核细胞和巨噬细胞明显增多(P<0.05),黄芪黄酮治疗组改善较明显,且优于其他成份组(P<0.05);2 Masson结果和HE结果具有高度一致性,炎症反应强度和纤维化程度成正比。黄芪总黄酮能明显改善肺纤维化炎症反应,抑制早期纤维化结节出现,黄芪多糖和黄芪皂苷改善作用不如黄芪黄酮;3模型组TNF?α、TGF?β1免疫组化阳性颗粒明显比对照组增多,与模型组比较,黄芪黄酮能有效降低TNF?α、TGF?β1水平,黄芪多糖组和黄芪皂苷组与模型组比较虽有一定改善,但是效果不如黄芪黄酮;黄芪皂苷+黄酮联合应用无协同作用;4蛋白印迹结果与免疫组化结果具有一致性。结论:黄芪黄酮能有效抑制肺纤维化炎症反应及后期的纤维化过程,该抑制作用与抑制TNF?α、TGF?β1表达具有密切关系。

鲍曼不动杆菌的分布特点及耐药性动态观察

目的监测鲍曼不动杆菌在各种标本、各临床科室的分布特点及耐药性，探讨其变化规律，为临床治疗提供帮助。方法对台州市立医院2005年7月～2005年6月期间住院患者送检的临床标本中分离到的细菌使用VITEK-32全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定，并用Oxoid公司提供的药敏纸片进行药敏试验。结果鲍曼不动杆菌大多数分离自痰液，其次是脓液及分泌物，居第三位的是尿液；科室分布以ICU最高；鲍曼不动杆菌的耐药率在这3年中总体呈上升趋势，亚胺培南耐药率最低。结论鲍曼不动杆菌易引起下呼吸道感染，尤其是ICU患者；对大多数抗菌药物的耐药性迅速上升，应加强其耐药性的监测。

老年病人医院深部真菌感染175例临床分析

目的了解老年病人医院深部真菌感染的状况,为临床防治老年病人医院真菌感染提供浓据.方法对台州市立医院2002年1月1日～2004年12月31日期间有医院真菌感染的175例老年病人进行回顾性统计分析.结果在此175例老年病人中,有151例合并慢性基础疾病,有171例1周前使用了广谱抗菌药物;在感染部位中,呼吸道感染占首位;在真菌培养结果中,白念珠菌123株,占首位;早期诊断并给予适当治疗的,病死率为7.0%;晚期诊断的,病死率为55.6%.结论老年病人医院深部真菌感染近年来上升很快,病死率增加.对此,我们必须引起高度重视.

肝胃不和型胃脘痛与血浆相关胃肠激素水平的研究

目的:研究肝胃不和型胃脘痛患者空腹血浆胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、生长抑素(SS)、血管活性肠肽(VIP)水平变化。方法:采集临床肝胃不和型胃脘痛病例及健康对照组空腹血液标本,用放免法检测两组血浆中GAS、MTL、SS、VIP含量。结果:肝胃不和型胃脘痛空腹血浆GAS和MTL水平明显下降,而空腹血浆SS及VIP水平无明显变化。结论:推测肝胃不和型胃脘痛可能与空腹血浆GAS和MTL水平下降有相关性,而与SS及VIP无明显相关性。

浅析历代医家对胃脘痛的辨证分型

胃脘痛是以胃脘部疼痛为主症,多伴脘腹痞满,嗳腐吞酸,不思饮食等症状的一种常见病证。其病名起源于内经,以后在历史各个时期被逐渐细化分型,理论日趋完善,为今天胃脘痛辩证提供了理论依据。

急性时相蛋白在重症下呼吸道医院感染中的诊断价值

重症下呼吸道医院感染病情危重，临床上予快速、准确的诊断对治疗十分重要。对于感染性疾病的病原学诊断虽重要，但由于本病病情变化较快，无法等待细菌培养结果，而目前尚无快速且实用的病原学诊断技术。笔者近年来对重症下呼吸道医院感染患者进行了C反应蛋白（CRP）、α1抗胰蛋白酶（α1-AT）、α1-酸性糖蛋白（α1-AG）和触珠蛋白（HP）等急性时相蛋白的定量检测，

补肺汤对肺纤维化小鼠肺组织中自噬相关蛋白的影响

目的:探讨补肺汤对肺纤维化中自噬相关蛋白Smad3、ATG5、p62的影响。方法:C57小鼠分为假手术组,模型组,补肺汤高、中、低剂量组,地塞米松组及补肺汤+地塞米松联合用药组。假手术组气管内滴注生理盐水,其余各组气管内滴注博莱霉素注射液。术后2 d给药,于第56天取肺组织分别进行HE染色、Mssson染色,并以免疫组化法及免疫蛋白印记法检测肺组织Smad3、ATG5、p62蛋白表达变化。结果:与模型组比较,补肺汤高剂量组、地塞米松组和联合用药组肺组织病理学显著改善,补肺汤高剂量组和联合用药组肺组织胶原活性显著降低;免疫组化检测显示补肺汤低剂量组Smad3表达减弱,补肺汤高剂量组及地塞米松组ATG5表达显著增强,补肺汤高、中剂量组和联合用药组p62表达显著增强;免疫蛋白印迹法显示各给药组Smad3、ATG5、p62蛋白表达差异与免疫组化结果基本一致。结论:补肺汤对肺纤维化组织病理学和胶原活性有明显影响,并对自噬相关蛋白Smad3、ATG5、p62有调节作用。

药对桑白皮、百部提取物对小鼠肺纤维化的干预作用

目的:探讨药对桑白皮、百部提取物对小鼠肺纤维化的干预作用。方法:SPF级昆明小鼠分为9组:假手术组、模型组、桑白皮水提物组、百部水提物组、桑白皮+百部水提物组、桑白皮醇提物组、百部醇提物组、桑白皮+百部醇提物组、地塞米松阳性对照组,每组10只。假手术组气管内滴注生理盐水,其余各组气管内滴注博莱霉素造模。术后2 d给药,28 d后取材分别进行HE染色、Mssson染色观察肺组织病理学变化和胶原表达,免疫组化法和免疫蛋白印记法检测TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达量。结果:与模型组比较,HE染色和Masson染色表明,药对桑白皮、百部的水提取物和醇提物均有减轻小鼠肺纤维化炎症和胶原增殖作用;免疫组化法和免疫蛋白印迹法发现桑白皮+百部水提物组、桑白皮醇提物组、百部醇提物组、桑白皮+百部醇提物组TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达量较模型组显著下调。结论:药对桑白皮、百部对肺纤维化有明显干预作用,其机制可能与降低TGF-β_1、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达有关。

脑膜脓毒金黄杆菌的耐药性比较

目的比较与分析ICU与非ICU患者产金属β-内酰胺酶(MBL)、ESBLs的脑膜脓毒金黄杆菌的耐药性的异同,以指导临床正确合理选用抗菌药物。方法用VITEK-32鉴定菌株;双纸片协同试验筛选产MBL菌株;双纸片协同试验筛选产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株;药敏试验使用VITEK GNS 143上机检测和K-B法检测加做的药敏试验。结果ICU患者脑膜脓毒金黄杆菌产MBL为49.0%,远高于非ICU患者的13.8%;ICU患者脑膜脓毒金黄杆菌产ESBLs为37.2%与非ICU患者的30.8%相比,差异无统计学意义;ICU患者脑膜脓毒金黄杆菌对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星6种抗菌药物的耐药率远比非ICU患者的高。结论脑膜脓毒金黄杆菌高耐药性的根本原因是高产酶率(产MBL和ESBLs)。

D-半乳糖致衰老小鼠高糖、高脂饮食后血糖、血脂及NO水平的研究

目的:研究青年小鼠和衰老模型组小鼠高脂饮食后血糖、血脂及NO水平,预测高脂饮食对衰老机体的影响。方法:用3周龄小鼠进行分组,以D-半乳糖溶液复制衰老小鼠模型,模型组小鼠和青年组小鼠分别用高脂溶液灌胃,检测模型组小鼠和青年血液中血糖(G lu)甘油三脂(TG)和胆固醇(TC)及肝组织中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平。结果:衰老对照组和衰老高脂组比较,衰老高脂组MDA水平增高,TG水平增高,有显著性差异,NO降低,但无明显差异性,衰老高脂组和青年高脂组比较,MDA、TG、TC升高,有极显著性差异,NO水平虽降低但无明显差异性。结论:高脂饮食所导致的健康损害可能有年龄差异性。

糖肾平对糖尿病肾病KK-Ay小鼠肾脏保护作用及对TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路影响的研究

目的:本研究主要探讨糖肾平对糖尿病肾病(DKD)KK-Ay小鼠肾脏保护作用及其对TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路的影响。方法:10只雌性C57BL/6J小鼠作为对照组。雌性10周龄KK-Ay小鼠60只,KK鼠料诱导10周后建立糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按体质量和血糖区组分层随机法分为模型组、厄贝沙坦组与糖肾平小、中、大剂量组。厄贝沙坦组,糖肾平小、中、大剂量组均灌胃给药,正常组、模型组用等体积去离子水灌胃。每4周称体质量和测24 h尿蛋白定量。实验第26周,眼球取血并处死小鼠,称肾脏质量、测血糖,分离血清测BUN、Scr、TG、MDA、NO和SOD;HE染色和Mallory染色观察肾组织病理形态;原位杂交、免疫组化、Western blot检测肾组织TGF-β_1、Samd6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin m RNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,各治疗组体质量、肾质量/体质量、尿蛋白降低,其中糖肾平中、大剂量组有显著性差异(P<0.01);肾脏病理损害明显减轻,FBG、血清BUN、Scr、TG和MDA含量明显降低(P<0.01),NO、SOD含量明显增加(P<0.01),Samd6、BMP7和E-Cadherin m RNA及蛋白的表达量增加,TGF-β_1和α-SMA m RNA及蛋白的表达量减少,其中糖肾平大剂量组有显著性差异(P<0.01),糖肾平的治疗效果呈剂量依赖关系。结论:糖肾平对DKD KK-Ay小鼠肾脏保护及逆转肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与下调氧化应激水平及调节TGF-β_1/Samd6/BMP7信号通路有关,这为DKD"肾痿"学说提供了新的实验依据。

ICU患者脑膜炎败血黄杆菌的耐药性分析和研究

目的检测从ICU患者痰液标本中分离的产MBL、ESBL脑膜炎败血黄杆菌的耐药性状况,指导临床正确合理使用抗生素。方法用VITEK32鉴定菌株;双纸片协同试验筛选产MBL菌株、产ESBL菌株;药敏试验使用VITEK GNS143上机检测和K-B法检测加做的药敏试验。结果ICU患者痰液标本中的脑膜炎败血黄杆菌的产酶率为78.4%,其中产MBL为41.2%,产ESBL为29.4%,有4株同时产MBL和ESBL。美满霉素、万古霉素、力奈唑烷的耐药率分别为19.8%、1.98%、1.98%。结论脑膜炎败血黄杆菌在ICU患者的痰液标本中高耐药性的根本原因是高产酶率(高产MBL和ESBL)。万古霉素、力奈唑烷、美满霉素是治疗ICU患者呼吸道感染的最有效药物。

桐子花对烧伤小鼠影响的实验研究

目的:研究桐子花外用对烧伤小鼠的影响,以说明其疗效。方法:建立小鼠实验性烧伤模型、观察桐子花对小鼠实验性烧伤模型的作用、并以小鼠创面毛细血管通透性、愈合时间、愈合率、病理检查、血清IL-1含量的测定等指标来说明其效果。结果:桐子花能显著降低烧伤小鼠的创面毛细血管通透性,降低血清IL-1,加快小鼠创面的愈合。结论:从降低创面毛细血管通透性,降低血清IL-1含量,结合创面愈合情况可说明桐子花对烧伤小鼠创面有明确的治疗作用。

生物化学PBL教学法的应用与探讨

PBL是"问题式学习"的教学方法,也是我国高等医学教育教学改革的重点内容之一。本文依据现有的PBL教学研究成果和PBL教学体会,剖析了实施PBL教学法的的优势、必要性及意义。

黄芪甲苷对肺纤维化小鼠α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达影响

目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手术组用生理盐水代替。造模后的C57bl/6小鼠随机分成空白组(正常饲养)、模型组(博来霉素造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、假手术组(生理盐水造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、黄芪甲苷组(博来霉素造模+黄芪甲苷灌胃)和阳性对照地塞米松组(博来霉素造模+地塞米松灌胃),分别于第14天和第28天处死小鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察小鼠肺组织肺纤维化程度,碱性水解法检测小鼠肺组织内羟脯氨酸的含量,免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织α-SMA的表达,免疫蛋白印记法检测小鼠肺组织α-SMA、COL1、COL3的表达。结果:与空白组、假手术组相比,模型组肺纤维化分级较高,肺组织炎症反应明显,羟脯氨酸含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组内的羟脯氨酸含量降低(P<0.05),肺组织内α-SMA、COL1、COL3的表达减少(P<0.05),地塞米松组的表达降低不明显(P>0.05)。结论:黄芪甲苷对肺纤维化的干预作用明显,其机制可能与减少成纤维细胞的生成和抑制胶原蛋白的沉积有关。

基于肠道菌群探讨慢性阻塞性肺疾病肺肠同治的科学内涵

慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺失宣降,肠腑气机郁滞,多伴有肠道功能障碍等症。中医学认为“肺与大肠相表里”,中医临床运用肺肠同治法治疗COPD取得显著疗效。大肠为“传导之官”,是脏腑气机升降出入的重要环节;肠道菌群参与人体营养、代谢功能、免疫调节等过程。肠道菌群结构及丰度影响COPD发生发展的病理过程,并通过胆汁酸、短链脂肪酸等代谢产物作用于远端器官,这与肺肠同病等中医理论相吻合。本文从肠道菌群理论的角度揭示了COPD之肺肠同病的病变本质,凸显中医学脏腑相关的理论内涵,使得中医肺肠同治法具有更为前沿的科学内涵,也为COPD等肺系疾病的临床辨治提供新的思路与方法。

黄芪总皂苷对特发性肺纤维化小鼠上皮间质转分化的干预作用

目的:探讨黄芪总皂苷对博莱霉素(Bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)小鼠上皮间质转分化(epithelial-mesenchymal transdifferentiation,EMT)的干预作用。方法:将90只小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、地塞米松组、黄芪总皂苷高剂量组、黄芪总皂苷中剂量组、黄芪总皂苷低剂量组,每组各15只。模型组及黄芪总皂苷各剂量组小鼠气管内一次性滴注博莱霉素(5 mg·kg^(-1)),造模后,黄芪总皂苷各剂量组以120mg·kg^(-1)、60 mg·kg^(-1)、30 mg·kg^(-1)灌胃,地塞米松组予地塞米松0. 0125 mg·kg^(-1)灌胃,模型组每天予等体积生理盐水灌胃。给药28 d后取材,进行HE、Masson染色分析肺组织形态及胶原蛋白表达水平,羟脯氨酸含量测定胶原蛋白含量,免疫组织化学法检测EMT相关蛋白表达,western-bloting检测TGF-β/smad信号及EMT相关蛋白表达。结果:黄芪总皂苷各剂量组小鼠肺质量指数低于模型组,黄芪总皂苷中剂量组降低明显,但均高于空白组,差异具有统计学意义(P <0. 05)。模型组与空白组比较,羟脯氨酸含量明显增加,而黄芪总皂苷各剂量组羟脯氨酸含量明显下降(P <0. 05);与空白组比较,模型组α-SMA表达增多,黄芪总皂苷各剂量组α-SMA表达比模型组明显减少(P <0. 05);与空白组比较,模型组E-caderin表达减少,黄芪总皂苷各剂量组E-caderin表达增多(P <0. 05)。结论:黄芪总皂苷中剂量组对BLM诱导的肺纤维化小鼠模型EMT抑制作用最好,其抗炎作用优于对胶原纤维的抑制作用。