扩增大片段DNA的PCR方法

本实验通过比较两种缓冲体系对ＰＣＲ扩增产物的影响，提出一种适合扩增大片段ＤＮＡ使用的缓冲体系，它与常规使用的缓冲体系的主要区别在于前者不含ＫＣｌ，使用这种缓冲体系扩增的大片段ＤＮＡ特异性强，且重复性好。

肿瘤基因治疗的最新途径

肿瘤基因治疗的最新途径张敏磊，方福德，左瑾，徐晓石（中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学北京１００００５）长期以来肿瘤研究的一个重要目标就是刺激机体对肿瘤产生免疫排斥作用。由于在对肿瘤的排斥作用中细胞免疫起关键性作用，所以研究使Ｔ细胞活化的途...

蛋白质─核酸紫外交联

蛋白质─核酸紫外交联徐晓石，张敏磊，赵以珏，方福德（中国医学科学院基础医学研究所，北京１００００５）一、基本原理ＤＮＡ结合蛋白与ＤＮＡ结合位点结合后经紫外照射可形成共价键，如果ＤＮＡ预先经过标记，则共价结合的复合物经电泳分离和制作放射自显影图谱，能够...

人铜锌超氧化物歧化酶的基因工程研究 Ⅱ.人铜锌超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达

利用pUC 8为载体质粒,将合成的人Cu/Zn SOD基因置于Lac Z启动子的调控下,构建了含有该基因的表达质粒pCZS Ⅰ。首次成功地在大肠杆菌中表达了合成人Cu/Zn SOD的基因。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳薄层扫描分析证明,SOD基因的表达产物占细胞可溶性蛋白质的13％左右,用光扩增法捡测表达产物的酶活性,每毫克蛋白质为48.6 McCord Fridovich单位。

人铜锌超氧化物歧化酶的基因工程研究——Ⅰ.人铜锌超氧化物歧化酶基因的合成与克隆

本文报道人铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn superoxide Dismutase, SOD)基因的合成与克隆。采用大肠杆菌偏爱密码子,按入Cu/Zu SOD一级结构顺序编码。基因全长495个碱基对,合成时,分成26个基因片段分别合成。采用分级退火的方法,在T4 DNA连接酶作用下,将基因片段组装成完整的基因,经序列分析证明,合成的基因顺序与设计一致。