13/17染色体易位纯合子猪群随机扩增多态性DNA指纹分析

利用 6 0条随机引物对 13/ 17罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的群体基因组 DNA进行了RAPD分析 ,筛选出 2 2个产生多态性的随机引物 ,计算出 3个群体间及群体内的共有带率 (F)及遗传距离指数 (D) ,并以此绘制出群体的亲缘关系树状图。对群体的遗传多样性进行了研究 ,计算出遗传多样性指数 (Ho) ,并在此基础上进行了 t检验 ,结果表明了该群体的变异情况。该群体的变异主要来源于群体间的变异 ,群体间的变异大于群体内的变异。利用 RAPD技术可快速有效地检测亲缘关系较近的猪群体的 DNA多态性 。

湿疹贴膏剂中冰片、薄荷脑包合工艺探讨

目的优选湿疹贴膏剂中冰片、薄荷脑包合的最优工艺参数。方法以冰片、薄荷脑为评价工艺指标,气相色谱法测定两者的含量。用研磨法进行包合,正交设计实验筛选最佳工艺参数。结果β-环糊精加2倍水量,研磨时间1.0h,35℃下干燥制备的包合物中冰片、薄荷脑的包合量、含量均最高。结论该条件为制备湿疹贴膏剂冰片、薄荷脑β-环糊精包合物的最佳工艺参数。

旋毛虫丝氨酸蛋白酶基因的结构与功能分析

目的 :运用生物信息学原理 ,对由旋毛虫新生幼虫 (NBL)差减文库调取的新生幼虫期特异性基因进行分析。方法 :通过对BLASTn核酸数据库及BLASTp蛋白数据库的相似性检索 ,登陆PROSITE数据库进行蛋白位点和序列模式分析 ,并采用AN THEPROT 4 3软件包对其理化特性进行分析。结果 :相似性检索及序列模式分析显示 ,该基因为胰蛋白酶家族丝氨酸蛋白酶的编码基因 ,并对其编码蛋白的理化特性 ,疏水性、抗原性、信号肽及其二级结构进行了预测。登陆SWISS -MODEL自动蛋白质同源模建服务器 ,搜索、优化后预测了其 3D结构模型。结论 :该期特异性基因为旋毛虫新生幼虫胰蛋白酶家族丝氨酸蛋白酶的编码基因。

旋毛虫新生幼虫期特异性基因糖蛋白表达载体的构建

根据旋毛虫新生幼虫 (NBL)期特异性全长cDNASSC1基因序列 ,PCR扩增目的基因 ,克隆入pMD18T后 ,根据其读码框架 ,克隆入表达载体pET2 8b ,构建其原核表达载体pET2 8b -SSC1。分别用SalI和XhoI、SmaI和HindIII双酶切 ;XbaI单酶切鉴定重组子 ,结果均与预期相符 ,进一步测序结果也表明重组载体读码框架正确 。

关于RAPD技术中几个条件的探讨

本文通过对RAPD反应中模板抽提、模板浓度、Mg2 + 和dNTP浓度、样本选择及取样大小的分析 ,探讨了RAPD的反应条件。高纯度的模板DNA是反应进行的基础 ;模板的用量一般在 2 5～ 10 0ng为佳 ;对每一引物、模板都应反复摸索 ,以获得最佳Mg2 + 与dNTP浓度 ;群体扩增产物出现的多态性比个体的更为丰富明显 ;取样大小对结果的统计分析影响不大。只有在充分优化RAPD反应条件的基础上 。

用微卫星探针的DNA指纹技术分析9个家猪群体的遗传结构

本研究用微卫星探针 (GT) 10 得到了 9个家猪品种的DNA指纹图。 1～ 9品种依次为 :1 3 /1 7罗伯逊易位纯合子猪群体、1 3 /1 7罗伯逊易位杂合子猪群体、1 3 /1 7罗伯逊易位杂合子猪互交所得到的正常核型猪群体(杂交 0号 )、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体、丹系长白猪与 1 3 /1 7易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体 (杂交 1号 )、杜洛克猪与 1 3 /1 7易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体 (杂交 2号 )。根据指纹带型计算了每个群体的相似系数 (F)、平均等位基因频率 (Q)、最低平均杂合率 (H)和遗传距离指数 (D)。 9个品种的相似系数介于 0 .5 82～ 0 .91 1 ,根据各品种之间的遗传距离指数作出矩阵图 。

用RAPD技术研究9个家猪群体的遗传结构

目的 :利用RAPD技术对 9个家猪群体的遗传多样性进行分析。方法 :采用RAPD技术对 1 3/1 7罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的三个群体、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体及欧洲猪与易位杂合子猪产生的两个杂交后备猪群体的遗传多样性进行分析 ,并分别计算其共有带率F及遗传距离指数D ,采用最小距离法绘制其树状聚类图。结果 :1 9条引物的扩增结果产生多态性 ,共得到 31 6条清晰稳定的多态型片段 ,片段长度在 2 0 0～ 4 0 0 0bp之间 ,由Nei的公式计算获得的遗传距离介于 0 0 1 6～ 0 0 92之间 ,参照系统进化树可将 9个品系划分为 3个组群。结论 :9个品系之间存在着明显的遗传差异 ,可作为进一步育种方案设计的依据。

用RAPD技术研究9个家猪群体的遗传结构

利用 RAPD技术对 9个家猪群体的遗传多样性进行研究 ,包括 1 3 /1 7罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的 3个群体、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体、及欧洲猪与易位杂合子猪产生的 2个杂交后备猪群体。用 1 7条已筛选出的产生多态性的随机引物对模板 DNA进行扩增 ,共得到 3 84条清晰稳定的多态型片段 ,片段长度在 2 0 0～ 40 0 0 bp之间。根据多态性结果计算出群体间的共有带率F及遗传距离指数 D,并以此绘制出群体的亲缘关系树状聚类图 。

登革病毒E蛋白基因表达载体的构建

利用高效表达载体pET系统 ,构建广东地区登革流行株E蛋白基因的高效表达载体 ,表达载体经酶切及测序鉴定表明载体构建正确 ,为探讨E蛋白在登革病毒致病机制中的作用 ,以及针对本地登革病毒高效、特异的单克隆抗体和高效价的特异高免血清的制备奠定了基础。

赭绿青霉Sp1菌株木聚糖酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究

【目的】从土壤中分离筛选获得了一株具有高产木聚糖酶能力的真菌Sp1。【方法】经过28SrDNA测序鉴定为赭绿青霉(Penicillium ochro-chloron)。通过对摇瓶发酵条件优化试验及酶特性研究。【结果】该菌株的最适产酶条件为:2%(W/V)粗制木聚糖+0.5%葡萄糖为碳源,0.44%KNO3+0.06%蛋白胨为氮源,发酵起始pH为5.0,150mL三角瓶装液量为40mL,转速为220r/min,28℃下培养72h木聚糖酶酶活可达387U/mL。将菌株Sp1发酵所得粗酶液经过纯化后研究其酶学特性,酶最适反应pH为4.0,最适反应温度为55℃,在40℃,pH2.2～6.0,酶活性稳定。终浓度为0.01mol/L的Na+、K+和Zn2+对酶活有促进作用。【结论】所筛选的Sp1菌株具有较好的应用前景。

一株木霉菌(Trichoderma sp.)TY2纤维素酶最佳产酶条件及部分酶学特性研究

【目的】筛选高活力纤维素酶产生菌,高效利用纤维素资源。【方法】从朽木和和纸浆样品中分离筛选出一株产纤维素酶活较高的菌株TY2。对其形态和18SrDNA特征序列分析鉴定为木霉菌(Trichodermasp.)。对菌株发酵条件及酶学特性进行研究。【结果】TY2菌株的最佳产酶条件为:1%滤纸+2%麸皮+0.5%葡萄糖为碳源,0.5%蛋白胨为氮源,起始pH5.0,温度28℃,200r/min,5d,其CMCase和FPase活力分别达412.5和100.3U/mL。经分离纯化出TY2菌株内切β-葡聚糖苷酶。内切β-葡聚糖苷酶最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.6,在50℃以下,pH3.0～5.0,酶活性稳定,且在80℃仍具有降解CMC-Na的效果。同时研究发现铜离子、锌离子、钾离子和钠离子对内切β-葡聚糖苷酶的酶活有促进作用,而汞离子有明显的抑制作用。【结论】所筛选的TY2菌株具有潜在的工业应用价值。

微孔杂交快速检测主要黄病毒方法的建立

目的建立特异、敏感、实用的登革病毒Ⅰ-Ⅳ型、流行性乙型脑炎病毒及黄热病毒检测及分型方法。方法在系统分析上述病毒基因组序列基础上,分别设计针对6种病毒的特异性包被探针,扩增、克隆、测序后包被聚乙烯微孔板。随后设计检测用PCR引物,并于引物5′端标记生物素,对待检样品进行扩增后用检测探针进行微孔杂交(PCR-ELISA)反应,并对包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间等反应条件进行优化。结果初步建立了微孔杂交快速检测上述病毒的方法,试验结果直观,阳性标本吸光度(A)值在0.5以上,阴性结果A值在0.1以下,S/N值在10.0以上。结论PCR-ELISA方法敏感、特异,为上述病毒的快速诊断提供了新的方法。

微孔杂交检测登革病毒及其分型方法的建立

目的建立特异、敏感、实用的登革病毒检测及分型方法。方法分析登革1￣4型病毒基因组序列,分别设计针对登革病毒1￣4型的特异性包被探针,扩增、克隆测序后包被聚乙烯微孔板。PCR上游引物5'端标记生物素,对待检样品进行扩增后用作检测探针进行微孔杂交(PCR-ELISA)反应,并通过设定不同的包被DNA浓度、包被时间、杂交温度、杂交时间,对PCR-ELISA反应进行优化。结果建立了快速、特异、敏感的登革病毒快速检测及分型方法,试验结果直观,阳性标本吸光度值在0.5以上,阴性结果吸光度值在0.1以下,S/N值在10以上。结论所建立的方法可用作登革病毒感染的早期诊断及分型。

3种桉树组培苗不定根发生发育过程的解剖学观察

以巨尾桉‘GL9’、尾巨桉‘DH32-29’和尾边桉‘XF35’3种桉树无性系组培生根苗为材料,采用常规石蜡切片技术,对石蜡切片制作过程中的固定环节进行了优化,观察了桉树不定根的发育过程。结果表明:(1)采用FAA固定液固定材料,可获得染色清晰,组织完整的桉树根系切片。(2)‘GL9’和‘DH32-29’在生根诱导8d后生出不定根,生根类型为皮部生根;‘XF35’在生根诱导12d后生出不定根,生根类型为愈伤组织生根;‘GL9’不定根的根尖和根基处均有细胞旺盛分裂,‘DH32-29’不定根只在根尖有细胞旺盛分裂,‘XF35’不定根则只在其根基处有大量旺盛分裂的细胞。

Menger PN-空间中的一类集值算子方程

给出并证明了MengerPN 空间中一类具有 (Φ ,Δ ) 型概率收缩的非线性集值算子方程解的存在性与唯一性定理 ,推广了某些已有的结果 .作为应用 ,本文获得到了两个新的不动点定理 .

浅谈高压XLPE电缆金属护套的选用

扼要介绍了对目前高压XLPE绝缘电力电缆的金属护套的种类、性能特征;总结了各种金属护套的使用场合和使用要求;并对实际工程中电缆金属护套的截面校验计算做了简单介绍。

大型高支点自落式混凝土搅拌机研制技术要点

为满足水利水电工程快速施工、大坝混凝土(尤其是四级配混凝土)生产强度高的要求,需研制出完全自主知识产权的大型自落式混凝土搅拌机。文章依据现有技术和多年国内外水利水电工程建设实践经验,阐述了最新研制的JF5000型混凝土搅拌机的技术要点。