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题名家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用
被引量:5
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作者
李伟灿
孟小林
徐进平
王健
鲁伟
徐智圣
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机构
武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室
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出处
《中国病毒学》
CSCD
2006年第6期589-593,共5页
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文摘
通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR得到cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽CecropinD的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到CecropinD肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和XhoI酶切,连接并将CecropinD肽基因插入pET32a表达载体中。用重组质粒pET32a-ecropinD转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-CecropinD以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%。融合蛋白经Ni2+柱纯化后通过肠激酶切割后释放为Trx(18kDa)和CecropinD(5kDa),最后通过超滤管分离得到重组抗菌肽。通过抑菌实验测得重组CecropinD对于革兰氏阴性及阳性菌均有抑菌活性。并将重组CecropinD与家蚕病毒BmNPV作用混合4h后,一起投喂家蚕,发现病毒感染力有明显降低,说明其有抗病毒感染作用。
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关键词
抗菌肽
活性表达
抗BmNPV感染
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Keywords
Antimicrobial peptide
Expression
Anti-infection to BmNPV
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
Q966
[生物学—昆虫学]
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题名克里米亚–刚果出血热病毒受体LDLR的发现
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作者
徐智圣
王延轶
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机构
中国科学院武汉病毒研究所
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出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2024年第3期373-377,共5页
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基金
国家重点研发计划(批准号:2023YFC2306100,2022YFC2303302)
国家自然科学基金联合基金重点项目(批准号:U23A20168)
+1 种基金
中国科学院战略性先导科技专项(批准号:XDB0490000,XDB29010302)
湖北省重大科技专项(批准号:2022ACA005)资助的课题。
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文摘
克里米亚–刚果出血热病毒(Crimean-Congo hemorrhagic fever virus,CCHFV)是一种布尼亚病毒目内罗病毒科正内罗病毒属、蜱虫传播的负链RNA病毒,能引起严重的出血热,病死率约为30%。目前临床上尚无针对CCHFV的疫苗和抗病毒药物,因此,各国普遍将CCHFV列为生物安全风险等级最高的病原之一,世界卫生组织也连续多年将其列入优先研究病原名录。然而,自1956年CCHFV被发现以来,其受体一直未被鉴定。该研究团队根据CCHFV感染细胞的特点进行分析,通过筛选发现低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)是CCHFV的一个入侵受体。该受体的发现,对CCHFV感染致病机制的理解和防控策略的研发具有重要的科学意义和应用价值。
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关键词
CCHFV
LDLR
受体
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Keywords
CCHFV
LDLR
receptor
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分类号
R373.3
[医药卫生—病原生物学]
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