伊藤牡丹‘巴茨拉’内参基因筛选及花瓣衰老相关基因的表达分析

为筛选伊藤牡丹‘巴茨拉’的内参基因,以‘巴茨拉’切花不同发育阶段的花瓣以及不同器官的根、茎、叶柄、叶片、花托、萼片、花瓣、雄蕊和子房为试验材料,结合本课题组已有的‘巴茨拉’转录组数据,参考常规的内参基因,初步筛选出10个表达稳定且表达量高的候选内参基因(GAPDH、ACT、UBQ、β-TUB、PP2A、CYP、EF-1α、F3H、TIP41、UBC)。利用实时荧光定量PCR技术以及geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder 4种软件进行评估。结果表明, UBQ和TIP41是‘巴茨拉’切花不同发育阶段花瓣的最佳内参基因组合;β-TUB、UBQ和ACT可作为‘巴茨拉’不同器官的最佳内参基因组合。以UBQ和TIP41为双内参基因,分析了5个‘巴茨拉’切花衰老相关基因(ACS1、ACO1、ETR1、SAG12、SAG21)的表达模式,发现它们在‘巴茨拉’花瓣衰老过程中发挥重要作用。筛选出的内参基因组合为进一步研究伊藤牡丹功能基因的差异表达奠定了实验基础。