敲低RIP140基因的ADSCs通过TLR4/NF-κB信号通路改善心肌肥厚大鼠心功能

目的探讨敲低受体相互作用蛋白140(RIP140)基因的脂肪间充质干细胞(ADSCs)通过TLR4/NF-κB信号通路改善心肌肥厚(MH)大鼠心功能的机制。方法利用慢病毒载体构建敲低RIP140基因的ADSCs。采用连续7 d皮下注射异丙肾上腺素(ISO)(7 mg/kg)建立MH大鼠模型。第8 d时移植ADSCs。具体分组如下:将60只大鼠随机分为sham组(连续7 d注射PBS)、MH组(连续7 d注射ISO)、PBS组(连续7 d注射ISO+第8 d注射PBS)、ADSCs组(连续7 d注射ISO+第8 d注射ADSCs)、LV-shRIP140-ADSCs组(连续7 d注射ISO+第8 d注射LV-shRIP140-ADSCs)和LV-shNC-ADSCs组(连续7 d注射ISO+第8 d注射LV-shNC-ADSCs),每组10只。ADSCs移植28 d后进行指标检测。超声心动图评估大鼠心功能;检测心肌酶水平;HE染色观察心肌组织病理学改变;TUNEL染色检测细胞凋亡;ELISA检测炎症因子的表达;RT-qPCR和Western-blot检测TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达。结果与sham组相比,MH组心肌纤维排列紊乱,心肌细胞肿大、坏死;LVEF、LVFS水平降低,cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、NF-κB p65 mRNA和TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平升高(均P<0.05);与PBS组相比,ADSCs组心肌纤维、细胞损伤明显改善;LVEF、LVFS水平升高,cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、NF-κB p65 mRNA和TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平降低(均P<0.05);与LV-shNC-ADSCs组相比,LV-shRIP140-ADSCs组LVEF、LVFS水平升高,cTnT、CK-MB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65 mRNA和TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白水平降低(均P<0.05)。结论敲低RIP140的ADSCs通过抑制TLR4/NF-κB信号通路减轻心肌肥厚大鼠心肌组织细胞凋亡及炎症反应,促进大鼠心功能恢复。