获得高效价甲型H1N1流感病毒抗体原料血浆初探

目的探讨从免疫供血浆者获得高效价甲型H1N1流感病毒抗体血浆,为制备人甲型H1N1流感免疫球蛋白和重症患者临床使用提供依据。方法用批签法核准的市场供应甲型H1N1流感疫苗对1947名供血浆者按规定免疫后第2、4、6周收集血浆并采用血凝抑制试验进行检测。结果经检测供血浆者抗体效价≥10以上达到99.2%,其中≥320—10240达到48.4%。结论供血浆者经一次甲型H1N1流感疫苗免疫后收集高效价甲流抗体血浆用于制备特异性免疫球蛋白或供重症患者临床使用是可行的。

STAGO全自动血凝仪在人凝血因子活性测定上的应用

目的探讨STAGO全自动血凝仪在人凝血因子活性测定上的应用。方法对STAGO全自动血凝仪按照GMP要求进行安装确认(installation qualification,IQ):实施信息核查并记录;运行确认(operational qualification,OQ):准确度、精密度(批内精密度及批间精密度)、干扰试验及参考范围的验证确认;性能确认(performance qualification,PQ):按STAGO凝血分析仪相关SOP检测6份人凝血因子Ⅷ样品活性,并计算6份样品检测值间的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)。结果已核实STAGO全自动血凝仪基本信息,安装环境及安装过程均符合要求,并已进行记录。厂家提供的正常及病理值质控血清测定3次的均值均在厂家提供的质控范围内;批内及批间精密性的变异系数(coefficient of variation,CV)均<10%;随机组与对照组相比平均偏差<10%;20份体检样本的均值、标准偏差(standard deviation,SD)及结果在正常参考范围的例数与总标本数的比例(R值)>0.9。6份人凝血因子Ⅷ样品检测值的RSD值为1.95%。结论经全面的设备确认,STAGO全自动血凝仪符合人凝血因子活性测定的要求。

卡介苗生产用菌株全基因组测序

【目的】对我国生产用卡介苗上海D2PB302菌株(简称“卡介苗上海D_(2)株”)全基因组进行测序及部分基因功能预测。【方法】取卡介苗上海D2株(编号D2-JIA12-1)样品DNA,采用第三代测序平台PacBio RSⅡ进行全基因组测序,并结合二代测序数据得到最终的基因组序列。对基因序列分别进行rRNA预测和tRNA预测,对预测的基因进行基本的功能注释,并选取其中肺内表达结核分枝杆菌(MTB)在小鼠体内感染过程中高表达编码(IVE-TB)抗原基因序列、减毒结核分枝杆菌疫苗(MTBVAC)作为目的序列与结核分枝杆菌H37Rv序列(NC_000962.3)比对。【结果】卡介苗上海D2株基因组序列长度为4 045 232 bp,GC含量为65.66%。Glimmer3.02软件共预测出4 259个基因,基因的平均长度为933 bp,其中1 783个基因是假定蛋白,其余2 476个基因具有明确的生物学功能,与毒力基因库比对后得到144个毒力基因,包含29个Ⅶ型分泌系统基因,10个N端具有保守的脯氨酸-谷氨酸(PE)和脯氨酸-脯氨酸-谷氨酸(PPE)序列的蛋白质家族基因。【结论】明确了卡介苗上海D_(2)株全基因序列的背景资料,并为后续开展主要抗原基因的遗传稳定性检测奠定了广泛的基础。