重瓣榆叶梅花中蛋白质提取工艺及动态含量研究

重瓣榆叶梅花中蛋白质提取研究表明,最佳提取工艺为采用pH7.0的磷酸氢二钠提取液、液料比为30∶1(mL∶g)、30℃、500 W、超声提取3次(每次120min)。在该提取工艺条件下,测得开花14d花中蛋白质含量最高,为13.237mg·g-1;开花21d花中蛋白质含量最低,仅为5.150mg·g-1。

高效毛细管电泳法研究重瓣榆叶梅花中蛋白质的动态变化

为验证毛细管电泳方法,研究测定重瓣榆叶梅花朵生长过程中的DNA酶、RNA酶和细胞色素C含量及动态变化的有效性,以磷酸氢二钠溶液为提取液,超声提取重瓣榆叶梅花朵中的蛋白质作为待测液,考察缓冲溶液种类、浓度、pH、分离电压、分离温度及进样时间等因素对HPCE分离检测蛋白质的影响。确定了HPCE最佳测定条件为:运行缓冲液为pH为2.5、浓度为30mmol/L的磷酸氢二钠溶液,0.5MPa压力进样5s,分离电压为8kV,电泳温度为25℃,检测波长为254nm。在最佳条件下,样品可在20min内完全分离,线性关系良好。该方法准确、快速、简便,可同时检测样品中的DNA酶、RNA酶和细胞色素C。