Renca细胞来源的外泌体活化髓源抑制性细胞对细胞毒性T细胞的抑制效应

目的探讨Renca细胞来源的外泌体(exosomes)活化的髓源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)对肾癌抗原特异性细胞毒性T细胞(cytotoxic lymphocytes, CTLs)体外增殖和杀伤效应的抑制作用。方法超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes,流式细胞术检测exosomes对MDSCs的活化效应。分离并培养小鼠树突状细胞(dendritic cells, DCs)和CD8+T细胞,制备DCs活化的肾癌抗原特异性CTLs。磁珠分选exosomes活化的MDSCs,羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFSE)荧光染色和流式细胞术检测MDSCs对CTLs增殖的抑制作用。将MDSCs、CTLs和Renca细胞体外共培养,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放实验检测exosomes活化的MDSCs对CTLs杀伤效应的抑制作用。结果 Renca细胞来源的exosomes有效地诱导了MDSCs的聚集,成功制备了DCs并获得了DCs诱导的肾癌抗原特异性CTLs。与exosomes活化的MDSCs共培养后的CTLs其增殖指数和杀伤率明显低于与未活化的MDSCs共培养后的CTLs和单独的CTLs(P<0.05)。结论 Renca细胞来源的exosomes活化的MDSCs抑制了肾癌抗原特异性CTLs的体外增殖和杀伤效应,可能在肾癌免疫逃逸中扮演重要作用。

Renca细胞exosomes所诱导的CD8^+T细胞的特异性杀伤作用

目的检测Renca细胞exosomes对CD8^+T细胞的激活效应以及exosomes负载的树突状细胞(DCs)所诱导的CD8^+T细胞对Renca细胞特异性杀伤作用。方法采用超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes并鉴定,体内通过流式和ELISA;体外通过CFSE荧光染色和ELISA检测exosomes对CD8^+T细胞的激活效应。小鼠骨髓分离出DCs并进行体外培养,用exosomes冲击成熟的DCs然后活化CD8^+T细胞,测定其对Renca、4T1、CT26细胞的杀伤率。结果透射电镜下观察exosomes是直径在30~100 nm的盘状囊泡,Western blot检测exosomes高表达MHC-1和HSP70。Exosomes能在体内和体外促进CD8^+T细胞的增殖和激活效应。在体外杀伤实验中,exosomes冲击的DCs所诱导的CD8^+T细胞相对于4T1和CT26细胞,其对Renca细胞具有明显更强的杀伤作用。结论 Renca细胞exosomes对CD8^+T细胞具有明显的激活作用且exosomes负载的DCs所诱导的CD8^+T细胞对自体肿瘤细胞具有强烈的特异性杀伤能力。

Ajust^(TM)吊带和TVT治疗压力性尿失禁近期疗效比较

目的探讨单切口可调节尿道中段悬吊术(Ajust^(TM)吊带)和经耻骨后尿道中段悬吊术(TVT)在治疗女性压力性尿失禁的疗效与安全性。方法回顾性分析该院2011年1月至2015年12月共88例压力性尿失禁患者,其中TVT 62例,Ajust^(TM)吊带26例。根据病史、查体、膀胱镜检查、尿流率测定、诱发试验、尿失禁问卷表简表(ICI-Q-SF)评分等明确诊断及分度。并对所有患者术后6个月随访尿流率、诱发试验、ICI-Q-SF问卷调查。结果 Ajust^(TM)吊带组平均手术时间(10.0±4.2)min少于TVT组(50.0±12.6)min(P<0.01),Ajust^(TM)吊带组术中并发症发生率3.8%低于TVT组6.5%(P<0.05);近期两组的客观治愈率、主观满意度、术中失血量、术后新发OAB、排尿困难、会阴不适、性交不适差异无统计学意义(P>0.05)。结论单切口可调节Ajust^(TM)吊带较TVT在治疗女性压力性尿失禁中更简单、安全、有效。