基于外膜蛋白的鼻气管鸟杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立

【目的】建立鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)血清抗体的ELISA检测方法。【方法】利用原核表达方法克隆表达鼻气管鸟杆菌外膜蛋白OR02,经Western blotting鉴定其免疫原性。以纯化产物作为抗原包被于固相载体,采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度和血清稀释度。同时,优化ELISA反应条件,利用鼻气管鸟杆菌阴性血清确定该检测方法的阴阳临界值判定标准。通过检测其他病原阳性血清评估该方法的特异性,检测不同比例稀释的鼻气管鸟杆菌阳性血清以评估其灵敏性,并与商品化试剂盒进行比较,评估该ELISA方法的符合率。【结果】重组蛋白OR02以包涵体形式表达,分子质量约为58 ku,与预期相符。Western blotting显示,OR02重组蛋白能与鼻气管鸟杆菌阳性血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性。以纯化的OR02蛋白作为包被抗原,确定最佳抗原包被浓度为2 ng/μL,血清样本的稀释度为1∶50,孵育时间为30 min,酶标二抗的稀释度为1∶5000,孵育时间为30 min,最佳底物显色条件为在避光条件下孵育15 min。阴阳临界值的判定标准为:当待检血清D_(450 nm)值≥0.266时判定为阳性,当待检血清D_(450 nm)值<0.266时判定为阴性。用该方法检测副鸡禽杆菌(Apg)、新城疫病毒(NDV)、鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)等单因子阳性鸡血清均无交叉反应。将抗体滴度为1∶64的鼻气管鸟杆菌阳性鸡血清以1∶800稀释仍能检测到阳性结果。与商业试剂盒对相同临床样本的检测结果的符合率为91.25%。【结论】本研究利用重组OR02蛋白建立了一种检测鼻气管鸟杆菌血清抗体的间接ELISA方法,该方法具有良好的特异性和灵敏性,且与商业试剂盒的符合率较高,可作为鸡血清鼻气管鸟杆菌抗体的检测工具。

鼻气管鸟杆菌特点及防制

鼻气管鸟杆菌(Ornithobacterium rhinotracheale,ORT)是一种不具备运动能力,形态多样无法形成芽孢的革兰氏阴性小杆菌。Vandamme等于1994年首次建议将此菌划分为rRNA科并命名为ORT,陈小玲等于2000年首次在我国内地分离鉴定出两株ORT,目前该病在世界各国广泛流行并呈上升趋势。

副鸡禽杆菌lpxM蛋白的原核表达及免疫原性研究

[目的]探究副鸡禽杆菌(Avibacterium paragallinarum)外膜蛋白lpxM的免疫原性,为预防鸡传染性鼻炎提供理论参考。[方法]构建pET-28a-lpxM原核表达载体,经PCR扩增和双酶切鉴定后将阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG进行诱导表达,并对诱导时间和诱导浓度进行优化,用尿素缓冲液纯化重组蛋白lpxM并进行SDS-PAGE分析。利用Western blotting鉴定重组蛋白的特异性。将重组蛋白与MONTANIDEISA 71 VG佐剂制备成疫苗v-lpxM,通过动物试验观察重组蛋白的免疫效果。[结果]重组质粒pET-28a-lpxM转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后成功表达,在37 ku处有目的蛋白特异性条带,在37℃、700 mmol/L IPTG、诱导4 h时蛋白表达量最高;重组蛋白lpxM在上清和沉淀中均有表达,且在沉淀中表达量相对较高;Western blotting结果显示,C型副鸡禽杆菌Modesto株的阳性鸡血清与纯化后的重组蛋白可发生免疫反应。免疫保护试验结果显示,v-lpxM疫苗对A、B和C型副鸡禽杆菌的保护率分别为0、20%和60%。[结论]本研究成功构建了原核表达载体pET-28a-lpxM,实现了lpxM重组蛋白的高效表达,且表现出良好的免疫原性。研究结果为探究副鸡禽杆菌外膜蛋白lpxM的免疫学特性以及为鸡传染性鼻炎的预防和疫苗的研发奠定了基础。

化学实验室动火实验无人值守行为识别方法研究

为实现化学实验室动火实验无人值守行为的智能化识别,提出基于目标检测算法的识别方法。定义动火实验无人值守行为并设计6组场景模拟方案,通过对3种不同行为模式进行模拟,构建模型训练与验证所需图像数据集,并基于目标检测算法构建化学实验室动火实验无人值守行为识别模型。研究结果表明:融合SimAM注意力机制且使用WIoU损失函数的模型识别精确率达0.996,召回率0.996,mAP@0.5为0.996;泛化能力测试精确率为0.891,召回率为0.783,mAP@0.5为0.821,融合SimAM注意力机制且使用WIoU损失函数后的模型的识别能力和泛化能力均得到明显提升。研究结果可为化学实验室动火实验无人值守行为识别与预警提供技术支撑。

电信网络诈骗涉“两卡”犯罪的特点及侦查研究

抑制当前电信网络诈骗犯罪的高发态势,必然要加强电信网络诈骗涉“两卡”犯罪的打击力度。通过梳理分析2020年1月—2023年3月31046份判决书,发现电信网络诈骗涉“两卡”犯罪存在发案数量大、涉案人员文化程度低以及线上线下交易并存等特征。结合侦查实践,分析侦查此类案件存在的困境,从加强阵地控制、强化大数据应用、全链条打击、全面收集证据四个方面提出侦查机关打击电信网络诈骗涉“两卡”犯罪的对策建议。

MSP-Net:多尺度点云分类网络

针对传统点云分类网络难以充分发挥卷积神经网络优势的问题,提出一种多尺度点云分类网络MSP-Net.首先,基于局部区域划分的完备性、自适应性、重叠性及多尺度特性要求,提出了多尺度局部区域划分算法,并以点云及不同层次的特征为输入,得到多尺度局部区域;然后构建了包含单尺度特征提取、低层次特征聚合及多尺度特征融合等模块的多尺度点云分类网络.该网络充分地模拟了卷积神经网络的作用原理,具备随着网络尺度和深度的增加,局部感受野越来越大,特征抽象程度越来越高的基本特征.最后将该算法应用在标准公开数据集ModelNet10和ModelNet40上,分别取得了94.71%和91.73%的分类准确率,表明该算法在同类工作中处于领先或相当的水平,验证了算法思想的可行性及有效性.

图像增强技术在安检X光图像中的应用

本文针对X射线安检图像,采用多种互补的图像增强方法,提出了一种新的图像增强思路。首先分别使用拉普拉斯算子和Sobel算子得到细节图和梯度图。对梯度图进行平滑处理后利用图像掩膜的概念使用其乘以细节图,最后通过USM锐化和CLAHE得到最终的增强图像。通过与传统算法的对比,本文提出的算法具有图像质量好,图像信息更丰富的优势。

企业原材料订购与运输决策问题探究

着眼于生产企业原材料的订购与运输问题,针对赛题提供的数据进行一致化、标准化处理,并运用熵权法计算各供应商综合评价得分,记录、整理获取综合评价得分高的50家对企业最重要的供应商;以24周订购成本和转运商运输损耗作为目标函数,建立单目标规划模型,确定订购和转运方案;建立企业24周产能总和目标函数,确定在产能上限已获提升后的订购和转运优化方案。

“健康中国”视阈下高校大学生体态评估方法探究

本文通过文献资料法、逻辑分析法、专家访谈法等对大学生体态评估方法进行探究,通过体态测量方法的试探性研究,了解高校大学生体态健康状况,为评估大学生体态提供参考。并对大学生不良体态的现状进行分析,提出相关预防措施,为提高大学生健康教育提供参考。

局部脑组织氧饱和度监测在新生儿生后早期的应用价值

局部脑组织氧饱和度（regional cerebral oxygenation,rSO2）监测的应用范围很广,不受温度和搏动血流影响,是一种监测脑组织氧合状态的新方式,但目前在新生儿方面的研究较少.本文针对不同病理状况对新生儿生后早期rSO2的影响进行综述,阐明新生儿rSO2监测的重要临床意义并对其未来应用范围进行展望.

剖宫产术中行晶胶体目标导向治疗对产妇及新生儿的影响

目的对实施联合阻滞的剖宫产患者进行目标导向液体治疗,以讨论哪种液体对于防治患者围术期低血压更有意义。方法随机选取本院收治的60例择期剖宫产患者(ASAⅠ～Ⅱ)分为胶体组和晶体组,分别采用万汶注射液+乳酸钠林格注射液和单纯乳酸钠林格注射液进行液体治疗,评价产妇低血压的发生率和胎儿娩出前血管活性药物的使用情况以及新生儿血气分析、新生儿Apgar评分和其他不良反应。结果晶体组患者的冲击液体量、液体量及尿量多于胶体组(P <0. 05)。两组患者低血压以及恶心呕吐的发生率比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。两组新生儿Apgar评分及脐动脉血气分析结果差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论对于行联合阻滞的剖宫产患者实施目标导向液体治疗时,胶体与晶体相比并无优势。