球等鞭金藻多糖的微波萃取工艺

采用微波法,通过单因素试验研究pH值、微波功率、萃取温度和萃取时间对球等鞭金藻多糖提取的影响。在此基础上,通过正交试验进一步优化多糖的微波提取工艺。最后,比较微波提取法和热水浸提法制备的球等鞭金藻多糖样品的红外光谱,并测定样品中蛋白质和多糖含量。单因素试验结果表明,pH值、微波功率、萃取温度和萃取时间均能显著影响球等鞭金藻多糖的提取。正交试验结果表明,微波法提取球等鞭金藻多糖的最佳工艺为pH9、微波功率600W、萃取温度90℃、萃取时间20min。微波提取法和热水浸提法制备的多糖产率分别为96.8mg/g和47.7mg/g。其中,前者蛋白质和多糖含量分别为1.08%和43.6%,后者中蛋白质和多糖含量依次为1.18%和22.1%。微波法与热水浸提法制备的多糖具有相似的红外光谱,表明微波提取法并不会破坏多糖结构。综上所述,在球等鞭金藻多糖提取过程中,微波法明显优于热水浸提法。

球等鞭金藻胞内和胞外多糖的分离纯化及其抑菌活性

采用分级沉淀、Sephadex G-75凝胶柱层析和DEAE-52离子交换柱层析对球等鞭金藻胞内粗多糖(IPS)进行分离;对胞外粗多糖(IEPS)则进行Sephadex G-100凝胶柱层析分离。在此基础上,分析所获多糖组分对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和变形杆菌等细菌的抑菌活性。同时,通过紫外光谱和红外光谱测定,比较IPS和IEPS结构的异同。结果表明:IPS和IEPS均具有抑菌活性,前者抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,后者抑制大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的生长;IPS经DEAE-52纤维素柱层析分离,获得2个多糖组分:IPSⅠ和IPSⅡ。IEPS经Sephadex G-100凝胶柱层析分离,获得3个多糖组分:IEPSA、IEPSB和IEPSC。活性检测表明,IPSⅠ和IPSⅡ抑制枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的生长;IEPSA、IEPSB和IEPSC抑制大肠杆菌的生长;紫外光谱表明,IPS和IEPS均不含核酸、游离或裸露的蛋白质和色素;IPS和IEPS的红外光谱比较相似,以半乳糖为构架,均含有酰氨取代基,但不同之处在于,后者不含硫酸取代基。

金鱼藻对5种水华微藻生长的抑制作用

采用共培养方法,研究了新鲜金鱼藻和其水溶性抽提液对颤藻、水华束丝藻、衣藻、实球藻和纤维藻等5种水华微藻生长的影响。在此基础上,分析了金鱼藻干粉末的甲醇提取物作用下5种水华微藻的生长。同时,研究了金鱼藻种植水的中/酸性-氯仿萃取物对5种微藻生长的影响。结果表明,共生条件下金鱼藻能显著抑制5种水华微藻的生长。第8天,20 g/L的新鲜金鱼藻和金鱼藻水溶性抽提液对5种水华微藻的生长抑制率超过42%。在4.8 g/L时,金鱼藻甲醇提取物对颤藻、水华束丝藻、衣藻、实球藻和纤维藻的生长抑制率分别为54.6%、46.1%、50.3%、52.1%和68.0%。金鱼藻种植水的中/酸性-氯仿萃取物均具有明显的抑藻活性。

浒苔和紫菜等2种海藻干体对3种赤潮微藻生长的抑制作用

在添加浒苔和紫菜干体的条件下,通过测定藻细胞数量,观察藻细胞形态,分析海藻干体对米氏凯伦藻、中肋骨条藻和塔玛亚历山大藻的半抑制和完全抑制浓度以及半抑制和完全抑制浓度有效作用的起始藻细胞数量范围,研究了浒苔和紫菜干体对3种赤潮微藻生长的影响。在此基础上,设定海藻干体的添加量为其完全抑制浓度,通过监测微藻培养液中总氮(硝酸态氮、氨态氮和亚硝酸态氮)和总磷等变化,分析海藻干体添加对培养液营养化程度的影响。结果表明:(1)当浒苔和紫菜干体浓度分别大于0.8g/L和1.0 g/L时,海藻干体能显著抑制3种赤潮微藻的生订,它们对赤潮微藻的生长抑制率超过60%(第12 d)。(2)浒苔和紫菜干体对3种实验微藻的半抑制浓度(IC_(50))接近,在0.71～1.22g/L之间;但完全抑制浓度(IC_(100))差别较大,浒苔干体对3种赤潮微藻的完全抑制浓度在2.4～2.8g/L范围,其数值约为紫菜干体对它们的完全抑制浓度的2倍。(3)3种赤潮微藻起始藻细胞数量不超过40×10~4·mL^(-1)(对于米氏凯伦藻和中肋骨条藻来说,起始藻细胞数量可增大至60×10~4·mL^(-1)),海藻干体对3种实验微藻的半抑制浓度和完全抑制浓度均有效。(4)添加海藻干体的实验组培养液中总氮和总磷含量均明显高于对照培养液中总氮和总磷含量。其中,实验组培养液中总氮浓度为382μg/L,总磷浓度明显低于100μg/L。综上所述,浒苔和紫菜干体具有强烈的抑藻作用,且不会造成培养液营养加剧现象,可尝试应用于赤潮微藻的控制与治理中。