Eg5蛋白靶向抑制剂S—Trityl—L—Cysteine对神经母细胞瘤增殖和分裂的影响

目的研究驱动蛋白Eg5在神经母细胞瘤中表达及其靶向抑制剂S-三苯甲基-L-半胱氨酸（S-Trityl—L-Cysteine，STLC）对神经母细胞瘤的诱导作用。方法通过免疫荧光及Westernblot检测Eg5蛋白在神经母细胞瘤中的表达水平，通过相差显微镜观察STLC对细胞形态学的影响，采用CCK-8法、流式细胞术检测STLC对细胞增值、凋亡及周期的影响，采用FISH法检测STLC对原癌基因MYCN扩增的影响，并经DAPI细胞核染色实验观察STLC对细胞核形态变化的影响。结果免疫荧光及Western blot结果显示Eg5蛋白在神经母细胞瘤中稳定表达。细胞形态学观察结果表明，细胞经不同浓度的STLC诱导，当浓度≥5μmol／L，诱导时间为72h时，细胞形态变圆，出现大量凋亡样小体。CCK-8细胞增殖能力检测及流式细胞术分析结果显示，STLC具有促进细胞凋亡，抑制细胞分裂与增殖的作用，将细胞周期阻滞在G2／M期，且其诱导作用呈时间剂量依赖性。FISH实验证实STLC对MYCN基困扩增无影响。结论神经母细胞瘤组织及细胞株中均表达Eg5蛋白，STLC通过抑制Eg5，影响神经母细胞瘤细胞的分裂及增值，从而促进细胞凋亡。结果表明Eg5有望作为神经母细胞瘤分子治疗的靶点。