电针调控外泌体miR-210对脑缺血再灌注大鼠血管生成的影响

目的探讨电针调控外泌体(EA-EXO)微小核糖核酸-210(miR-210)对脑缺血再灌注大鼠(MCAO)血管新生的作用机制。方法建立MCAO模型,造模成功后5 min针刺大鼠的“人中(Du26)”和“百会(Du20)”穴,并接电针治疗仪,每日1次,每次30 min,共治疗3 d。在第3次治疗后7 h取大鼠血浆,以PKH26试剂标记并提取血浆外泌体。将大鼠分为对照组、MCAO组、EA-EXO组。除对照组外的各组大鼠均进行MCAO造模处理,在造模成功后5 min将电针外泌体在立体定向仪下注入右脑室。于再灌注24 h后,以神经功能缺损评分评价各组大鼠神经功能情况,通过使用2,3,5-三苯四唑氯化染色(TTC)和苏木精-伊红染色(HE)、透射电镜、Western blot和实时荧光定量PCR评价各组大鼠梗死体积、缺血后病理改变和血管生成相关因子的表达水平。结果经EA-EXO处理后,与MCAO组比较,EA-EXO组大鼠的神经功能缺损评分显著降低(P<0.01);脑梗死体积显著下降(P<0.01);神经元病理损伤程度得到缓解与改善;神经元细胞核膜结构缺损较其改善,线粒体、内质网、高尔基体等细胞器肿胀程度好转,空泡减少。Western blot检测显示,与MCAO组比较,EA-EXO组显著上调CD34、HIF-1α、VEGF及Notch1的表达(均P<0.01)。qPCR检测显示,与MCAO组比较,EA-EXO组显著提高了miR-210水平和CD 34、HIF-1α、VEGF、Notch 1 mRNA水平(均P<0.01)。结论电针可通过调控外泌体miR-210介导的血管新生以缓解缺氧缺血后的神经功能损伤。

电针对脑缺血再灌注大鼠自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1表达的影响

目的观察电针对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的改善程度及自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1表达的影响。方法根据随机数字表法,将72只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和电针组,每组24只。采用Longa线栓法建立改良的急性局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,并在缺血1 h后进行再灌注。参照改良的Zea Longa 8级神经功能缺损评分法对3组大鼠脑神经功能损伤程度进行评估。电针组于造模成功后5 min和16 h进行电针干预。于再灌注后24 h取材。TTC染色法观察各组大鼠脑梗死体积;HE染色法观察大鼠脑组织病理学变化;Western blot检测大鼠右侧纹状体脑组织中LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达,qPCR检测Beclin1 mRNA表达。结果对照组无行为学改变,模型组神经功能缺损评分显著高于对照组(P<0.05);与模型组比较,电针组神经功能缺损评分明显低于模型组(P<0.05)。电针组脑梗死体积较模型组明显减少(P<0.05)。与模型组比较,电针组LC3-Ⅱ、Beclin1蛋白表达明显增加(P<0.05),Beclin1 mRNA的表达亦明显增加(P<0.05)。结论电针治疗可能通过促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1的表达,调控自噬的发生,减小大鼠脑梗死体积,改善神经功能缺损,实现对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护效应。

电针血清外泌体促进缺氧诱导的人脐静脉血管内皮细胞血管新生的研究

目的:观察电针血清外泌体对缺氧诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)血管新生的影响,探讨电针血清促进脑缺血后血管新生的作用机制。方法:建立改良的急性局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,在造模成功后5 min大鼠的“人中(Du26)”和“百会(Du20)”穴进行针刺干预。将HUVECs分为对照组、模型组、电针外泌体组、miR-210模拟物组、miR-210抑制剂组与HIF-lα抑制剂组。采用流式细胞术、CCK-8法检测各组细胞凋亡和增殖情况,Matrigel基质胶实验观察血管生成能力,Western bolt和qPCR检测各组HIF-1α、VEGF、Notch 1、CD34和miR-210的表达水平。结果:与模型组比较,电针外泌体和miR-210模拟物均可显著抑制缺血缺氧诱导后的HUVECs细胞凋亡,并促进细胞增殖及细胞迁移,而miR-210抑制剂显著抑制了电针外泌体作用后的细胞增殖和迁移数量。此外,电针外泌体与miR-210模拟物进一步提高了缺氧缺血后HIF-1α、VEGF和Notch 1的水平,miR-210抑制剂与HIF-lα抑制剂逆转电针外泌体诱导的HIF-1α、VEGF和Notch 1的高表达。结论:电针抗脑缺血后的作用机制可能是通过调控外泌体miR-210介导的HIF-1/VEGF/Notch信号通路以促进缺氧缺血后的血管新生。

缺血性脑卒中后血管新生及针灸干预机制研究

缺血性脑卒中发生后的血管新生可改善缺血半暗带区域血流量,增加受损带的氧供应,减少梗死面积,并对神经功能的恢复有促进作用。而影响脑缺血后血管新生的机制十分复杂,是近年来研究脑缺血的热点问题。现下,脑缺血后血管新生不仅作为临床评判脑卒中预后的重要指标,同时也是治疗缺血性脑卒中的药物靶点。针灸作为中国传统医学,治疗缺血性脑卒中疗效显著,已受到国内外学者广泛认可。该文综述了脑缺血后血管新生的调控机制及其为针灸治疗脑卒中所提供理论依据。

电针对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障保护机制研究

目的探讨电针人中、百会对脑缺血再灌注大鼠BBB损伤的作用机理,为针刺治疗脑卒中提供科学依据。方法选用健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组和电针组,采用Longa线栓改良法建立大鼠脑缺血再灌注(MCAO)模型,电针组在造模成功后电针刺激人中、百会30 min。采用神经功能缺损评分、CV染色法测定脑水肿肿胀率、免疫组织化学法与Western blot方法检测MCAO大鼠脑组织中ZO-1表达及以透射电镜观察大鼠右侧脑组织纹状体组织超微结构的变化。结果随着缺血再灌注时间的延长,大鼠神经功能缺损及BBB损伤程度均随再灌注时间延长而逐渐加重,而电针组的大鼠神经功能缺损程度明显低于模型组;模型组大鼠在缺血再灌注6 h缺血侧脑半球开始肿胀,并于72 h达到高峰,电针组大鼠在缺血再灌注24 h、48 h、72 h与模型组比较,差异有显著性(P <0.05或P <0.01);随着缺血再灌注时间的延长,模型组ZO-1蛋白表达显著降低,显著低于电针组,在缺血再灌注24 h、48 h和72 h经统计学处理,有显著性差异(P <0.05);电镜图示电针组较模型组脑组织超微结构损伤较小。结论电针人中、百会可减轻脑缺血再灌注造成的神经损伤,下调脑水肿肿胀率,抑制ZO-1蛋白下降,保护脑组织内的超微结构,以抑制脑缺血再灌注后血脑屏障的损伤。

电针抗脑缺血再灌注损伤的机制研究进展

脑卒中是神经系统常见病及多发病,严重威胁人类的健康。针灸治疗脑卒中已获得广泛认可,针灸可有效抑制脑缺血发生后产生的级联反应及神经元损伤。本文探讨电针干预脑缺血再灌注损伤的机制,为电针在临床上治疗该疾病提供理论依据。

miR-210与缺血性脑卒中

脑卒中是神经系统的常见病,其中以缺血性脑卒中更为高发。MicroRNA(miRNA)作为非侵入性生物标志物,在调节细胞因子等诸多方面参与生物学调控过程[1]。而miR-210作为其中一类,具有高度缺氧特异性。缺血性脑卒中发生后,脑组织呈缺血、缺氧状态。而大量研究表明,miR-210的表达在缺氧环境下最为显著。本文将探讨在调控缺血性脑卒中过程中,miR-210在细胞应答反应、血管新生与神经功能等各方面所发挥的效应及作用。

奚肇庆辨治特发性间质性肺炎经验撷要

特发性间质性肺炎是临床上呼吸系统的常见病,然发病机制尚不明确,呈进行性发展,且不可逆,目前西药就抗肺间质性炎症反应及抗肺纤维化之疗效并不乐观。奚肇庆教授将特发性间质性肺炎概括为寒水射肺证、气虚风盛证、肺胃阴虚证及肺肾气虚证4个基本证型,通过四诊合参,辨证用药,以中药延缓肺间质性肺炎炎症反应及肺纤维化进程,提高患者生存质量。附验案1则以佐证。

RNA m6A修饰在脑缺血中的作用及针灸干预机制

检索国内外最新相关文献,探究N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)RNA表观遗传修饰在脑缺血发生发展中的调控机制及基于m6A修饰探究针灸干预脑缺血的现状及展望。主要从调控神经干细胞、炎症反应、细胞凋亡、突触再生等方面,对近年来RNA m6A修饰在脑缺血的相关研究进行综述。针灸被广泛运用于治疗缺血性脑卒中的各个阶段,但目前针灸基于m6A甲基化介导的相关机制研究尚处于初期阶段。从RNA m6A修饰角度探讨针灸抗脑缺血机制研究,以期为针灸学科的发展与临床推广提供新视角、新方向。

基于肺与大肠相表里的针灸治疗变应性鼻炎肠道菌群研究进展

变应性鼻炎患病率较高,已成为全球性健康问题。针灸治疗变应性鼻炎具有副作用小、远期疗效好的特点,在临床已广泛应用。基于“肺与大肠相表里”理论综述了变应性鼻炎与肠道菌群及宿主免疫的关系、针灸调节变应性鼻炎相关肠道菌群及免疫的作用,揭示“肠道菌群-宿主免疫”可能成为针灸治疗变应性鼻炎的新靶点,以期为针灸治疗变应性鼻炎的机制研究提供新思路。

浙南美女樱的引种育苗栽培初报

随着生活水平的提高。温州市民已不再满足各类常见的花卉，而追求各种新、奇、特的品种。为了丰富温州地区花卉及地被绿化种类，我们进行了许多新种类观赏植物的适应性栽培观察，并对其进行了生物学特性的研究，从中筛选出适合温州栽培的美女樱（Verbenahybrida）这一新的观赏植物。

周细胞在缺血性脑卒中的作用机制进展

脑周细胞是神经血管单元的重要组成部分,近年来关于脑缺血的研究重点逐渐从神经元转移到神经血管单元。周细胞位于神经血管单元的中心,近年来成为新兴研究领域中的焦点。脑周细胞通过整合、处理邻近细胞的信号产生反应,发挥多种功能,包括调节血脑屏障、调节脑血流、调节免疫炎症反应、参与血管生成、调控干细胞活性以及表观遗传调控等。本文通过检索近年来国内外相关文献,探讨周细胞在缺血性脑卒中的功能和作用机制,为缺血性脑卒中机制研究提供参考,为发现新的治疗靶点提供思路。

电针对急性脑出血患者疗效及血清AQP4含量的影响

目的:在常规西医治疗基础上,观察电针对急性脑出血(ICH)患者神经功能、生活能力、精神状态方面及血清水通道蛋白4(AQP4)含量的影响。方法:将72例急性ICH患者随机分为观察组(36例,脱落4例)及对照组(36例,脱落2例)。对照组予常规西医治疗(包括止血、预防再出血、调控血压、减轻神经水肿、降低颅内压等),观察组在对照组治疗基础上联合电针治疗,穴取水沟,患侧内关、三阴交等,同侧三阴交、内关连接电针正负极,予疏密波,频率2 Hz/100 Hz,强度以患者耐受为度,每次30 min,每天1次,每周6次。两组均治疗2周。于治疗前后,观察两组患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良Barthel指数(MBI)评分、简易智能精神状态检查量表(MMSE)评分,ELISA法检测血清AQP4含量,并比较两组疗效及安全性。结果:治疗后,两组患者NIHSS评分、血清AQP4含量降低(P<0.05),MBI、MMSE评分升高(P<0.05);观察组NIHSS评分、血清AQP4含量低于对照组(P<0.05),MBI、MMSE评分高于对照组(P<0.05)。观察组总有效率为93.8%(30/32),高于对照组的73.5%(25/34,P<0.05)。两组患者均未出现不良反应及不良事件,均较安全。结论:在常规西医治疗基础上,电针治疗可有效改善急性ICH患者神经功能、生活能力、精神状态,降低血清AQP4含量,初步提示电针能有效治疗ICH可能与其调控血清AQP4含量有关。

电针治疗急性缺血性卒中及对血浆IL-17、IL-10水平的影响

目的:比较电针联合西医常规疗法与单纯西医常规疗法治疗急性缺血性卒中(AIS)的临床疗效及对血浆白介素(IL)-17、IL-10水平的影响。方法:将60例AIS患者随机分为观察组(30例,脱落2例)和对照组(30例,脱落4例)。对照组予神经保护、改善脑循环等西医常规治疗,观察组在对照组基础上联合电针治疗,针刺穴取百会、印堂和患侧曲池、足三里、三阴交等,百会-印堂、曲池-合谷、足三里-三阴交连接电针,采用疏密波,频率2 Hz/15 Hz,每日1次,连续治疗10 d。分别于治疗前后观察两组患者美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)和改良Barthel指数(MBI)评分,ELISA法检测两组血浆IL-17、IL-10水平。结果:治疗后,两组患者NIHSS评分较治疗前降低、MBI评分较治疗前升高(P<0.01),观察组患者NIHSS评分低于对照组、MBI评分高于对照组(P<0.05);两组患者血浆IL-17水平较治疗前降低、IL-10水平较治疗前升高(P<0.01),观察组患者血浆IL-17水平低于对照组、IL-10水平高于对照组(P<0.05)。结论:电针联合西医常规治疗可改善AIS患者神经功能和日常生活活动能力,疗效优于单纯西医常规治疗,其作用机制可能与调节IL-17/IL-10失衡,进而减轻神经炎性反应有关。

以“阳虚”论治胸痹心痛(冠心病)浅析

冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病),是动脉粥样硬化导致器官病变的最常见类型,其严重危害大众的健康与生命。冠心病就其临床表现与中医学中"胸痹心痛"大致相符。今中医学界普遍认为胸痹心痛病变本位在心,并与肺、肾等多脏腑及寒,虚,痰,瘀等病理因素均相关。然笔者在阅览、整理大量历史文献,结合现代研究后,认为胸痹心痛的主要病因病机为五脏阳虚,故本文主要探析心痹胸痛与五脏阳虚之间的关系。

基于H4K16ac介导的细胞自噬探讨电针血清对脑缺血后神经元的保护机制

目的从组蛋白H4第16位赖氨酸的乙酰化(H4K16ac)对细胞自噬调控的角度,研究电针血清对脑缺血后神经元的保护机制。方法电针血清的制备:建立改良的大鼠急性局灶性脑缺血再灌注模型,在造模成功后5 min和16 h进行电针干预,针刺人中、百会穴,并接电针治疗仪治疗30 min。第2次电针治疗后7 h取大鼠血清备用。细胞实验:将大鼠大脑皮质神经元细胞分为对照组、模型组、电针组、组蛋白乙酰转移酶MOF(hMOF)抑制剂组与细胞沉默调节蛋白1(Sirt1)抑制剂组,除对照组外,其余各组剥夺氧、糖3 h后再复氧、复糖24 h,并于复氧、复糖的同时给予2%电针血清、15 g/L的hMOF siRNA及8 g/L的Sirt1 siRNA处理。CCK-8检测细胞处理48 h后细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞处理48 h后细胞凋亡情况;Western blot检测细胞中hMOF、Sirt1、组蛋白H4第16位赖氨酸的乙酰化(H4K16ac)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、自噬相关蛋白Beclin1表达;qPCR检测hMOF、Sirt1、Beclin1 mRNA表达;染色质免疫沉淀技术(ChIP)检测各组神经元细胞的H4K16ac在自噬靶基因Beclin1启动子区的结合程度。结果与模型组相比,电针干预可使细胞增殖活性提高(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05)。与模型组比较,电针组和hMOF抑制组剂均可降低hMOF和H4K16ac蛋白的表达(P<0.05),升高Sirt1、LC3-II和Beclin1的表达(P<0.05);而与Sirt1抑制剂组差异无统计学意义(P>0.05)。qPCR结果显示,与模型组比较,电针组和hMOF抑制组剂均可抑制hMOF mRNA表达(P<0.05),而Sirt1和Beclin1 mRNA表达上调(P<0.05)。且与模型组相比,电针组在自噬靶基因Beclin1启动子区域中H4K16ac的富集量增加(P<0.05)。结论电针血清对糖-氧剥夺再灌注损伤神经元细胞具有保护作用,其抗脑缺血再灌注损伤的作用可能是电针通过调节组蛋白H4K16ac的表达进而调控细胞自噬,从而减轻脑缺血再灌注损伤,发挥对神经细胞的保护作用。

长链非编码RNA在脑缺血发病机制中的作用研究进展

长链非编码RNA(LncRNA)是一种缺乏完整开放阅读框的非编码RNA,在细胞增殖、分化和凋亡等生物学过程中发挥重要作用。其可通过表观遗传修饰、选择性剪接、转录后调控和翻译调控等多种机制参与调控蛋白编码和表观遗传基因。大量研究显示,LncRNA在神经功能性疾病中表达异常。本文就LncRNA在脑缺血中的机制研究进展做一系统综述。

缺血性脑卒中后血脑屏障损伤机制研究现状

血脑屏障(blood brain barrier,BBB)是大脑和外周循环之间的重要屏障,通过严密调节物质交换在维持中枢系统内环境稳态中起着至关重要的作用。缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)可引起BBB损伤及破坏,进一步促进缺血性脑损伤的发展。本文总结并归纳了IS后引起BBB损伤及功能障碍的相关分子及细胞机制,有望为发现潜在的治疗靶点提供线索,以保护BBB并改善IS患者预后。