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HP8:增强子结合蛋白家族的一个新基因的cDNA克隆 被引量:1
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作者 徐砺新 万大方 +4 位作者 刘彦仿 李宏年 张萍萍 隋延仿 顾健人 《第四军医大学学报》 1995年第6期423-428,共6页
以大鼠增强子结合蛋白(C/EBP)cDNA为探针,筛选人胎肝cDNA文库,得到一个含有2480碱基命名为HP8的cDNA克隆,其中84~1109位碱基属编码区,经基因数据库(EMBL,95.6版本)查对未发现同源基因... 以大鼠增强子结合蛋白(C/EBP)cDNA为探针,筛选人胎肝cDNA文库,得到一个含有2480碱基命名为HP8的cDNA克隆,其中84~1109位碱基属编码区,经基因数据库(EMBL,95.6版本)查对未发现同源基因。该基因编码的蛋白C-末端含有亮氨酸拉链结构(leucinezipperstructure),和C/EBP功能区(C-末端60个氨基酸)同源性高达97%,而上游编码区则与C/EBP及其已知家族同源性很低,表明该基因属C/EBP基因家族新成员。基因组Southern杂交证实该基因为单拷贝基因,在14种胎儿组织中显示小肠、皮肤高表达,肾上腺中度表达,肝、肺、肾、甲状腺、胆囊低表达。在5例正常成人肝组织中仅2例低表达,而在13对肝癌及癌旁肝组织中显示9例癌组织及7例癌旁组织高表达。以上结果提示该基因可能与细胞增殖有关。它的详尽功能的研究正在进行中。 展开更多
关键词 C/EBP 亮氨酸拉链 CDNA 基因克隆
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增强子结合蛋白家族一个新基因的3′-非编码区序列对肝癌细胞7721生长的影响
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作者 徐砺新 王缨 +3 位作者 万大方 刘彦仿 隋延仿 顾健人 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期1-3,共3页
目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因HP8的3′┐非编码区(3′UTR)对肝癌细胞生长的影响。方法将3′UTR序列亚克隆至真核表达载体pBKCMV中,运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞7721。结果观察到细胞的生长... 目的观察所获得的增强子结合蛋白家族一个新基因HP8的3′┐非编码区(3′UTR)对肝癌细胞生长的影响。方法将3′UTR序列亚克隆至真核表达载体pBKCMV中,运用磷酸钙沉淀法转染肝癌细胞7721。结果观察到细胞的生长受到较明显抑制。结论表明该基因参与真核细胞转录调控,结合以前的实验结果(该基因在肝癌细胞中普遍高表达)。 展开更多
关键词 肝肿瘤 基因 肿瘤细胞 细胞分化
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人正常肝、新生儿肝、肝癌及癌旁肝组织内C/EBPmRNA丰度分析
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作者 徐砺新 顾健人 +1 位作者 隋延仿 李岱宗 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期21-23,共3页
c/EBP(CCAAT/EnhancerBindingProtein)是一种热稳定蛋白,作为肝细胞核富含的转录调控因子,在促进和维持肝细胞分化状态中担负重要功能,本文通过Northern杂交检测3例正常肝组织,1例新... c/EBP(CCAAT/EnhancerBindingProtein)是一种热稳定蛋白,作为肝细胞核富含的转录调控因子,在促进和维持肝细胞分化状态中担负重要功能,本文通过Northern杂交检测3例正常肝组织,1例新生儿肝组织,10例肝癌及8例癌旁肝组织中C/EBPmRNA丰度,结果显示在正常肝、新生儿肝及癌旁肝组织中均有表达,在多数癌组织中的表达明显减弱。瘤旁肝组织和肝癌组织中的表达相差显著(P<0.05).以上结果进一步提示C/EBP在维持肝细胞分化状态中起重要作用,并可能和肝癌的发生存在一定关系。 展开更多
关键词 原发性肝癌 MRNA丰度 分化 增殖 肝肿瘤
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增强子结合蛋白家庭的一个新基因HP8定位于人19号染色体长臂13.1-13.2区带
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作者 徐砺新 刘彦仿 +3 位作者 隋延仿 万大方 汤华 顾健人 《第四军医大学学报》 1997年第1期36-37,共2页
目的:探讨增强子结合蛋白(C/EBP)家族一个新基因HP8的人染色体定位.方法:按常规方法制备分裂期人淋巴细胞切片,用生物素标记HP8基因 3’-端 2.1kb cDNA作探针,进行荧光原位杂交(FISH).对FISH信号及染色体上DAPI结合条带同时拍照,二者重... 目的:探讨增强子结合蛋白(C/EBP)家族一个新基因HP8的人染色体定位.方法:按常规方法制备分裂期人淋巴细胞切片,用生物素标记HP8基因 3’-端 2.1kb cDNA作探针,进行荧光原位杂交(FISH).对FISH信号及染色体上DAPI结合条带同时拍照,二者重迭信号进行计数,结果:100个有丝分裂图中,有72个显示阳性信号位于同一对染色体,并且无其他非特异性杂交带,杂交效率约为70%.参照DAPI结合条带,阳性信号位于人19号染色体长臂13.1-13.2区带.结论:HP8基因定位于人19号染色体长臂 13.1-13.2区带. 展开更多
关键词 基因定位 染色体 新基因 增强子结合蛋白
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应用PCR方法直接从噬菌体原液中扩增目的基因片段
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作者 徐砺新 王凡 +2 位作者 刘彦仿 万大方 顾健人 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期40-40,52,共2页
应用PCR方法直接从噬菌体原液中扩增目的基因片段徐砺新,王凡,刘彦仿(第四军医大学病理学教研室,西京医院眼科,西安710032)万大方,顾健人(上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室,上海200032)当前,... 应用PCR方法直接从噬菌体原液中扩增目的基因片段徐砺新,王凡,刘彦仿(第四军医大学病理学教研室,西京医院眼科,西安710032)万大方,顾健人(上海市肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室,上海200032)当前,基因分子生物学已成为全世界研究的热... 展开更多
关键词 噬菌体 基因 扩增 片段 聚合酶链反应
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增强子结合蛋白和HBVX抗原在肝细胞肝癌及癌旁肝组织中表达的免疫组化研究
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作者 徐砺新 王凡 《第四军医大学学报》 1996年第6期430-430,共1页
增强子结合蛋白和HBVX抗原在肝细胞肝癌及癌旁肝组织中表达的免疫组化研究*徐砺新1王凡2(1第四军医大学病理学教研室西安7100332第四军医大学西京医院眼科)关键词肝细胞肝癌增强子结合蛋白HBVX抗原免疫组化中图号... 增强子结合蛋白和HBVX抗原在肝细胞肝癌及癌旁肝组织中表达的免疫组化研究*徐砺新1王凡2(1第四军医大学病理学教研室西安7100332第四军医大学西京医院眼科)关键词肝细胞肝癌增强子结合蛋白HBVX抗原免疫组化中图号R373.2乙型肝炎病毒X抗原(H... 展开更多
关键词 增强子结合蛋白 HBV 免疫组化 肝肿瘤
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用双脱氧终止法直接测定单链PCR产物的序列
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作者 张荣美 王凡 徐砺新 《第四军医大学学报》 1996年第2期153-154,共2页
用双脱氧终止法直接测定单链PCR产物的序列张荣美,王凡,徐砺新(第四军医大学病理学教研室西安7100332第四军医大学西京医院眼科)关键词单链多聚酶链式反应,序列分析中图号Q74PCR技术的发展日新月异,PCR技术用... 用双脱氧终止法直接测定单链PCR产物的序列张荣美,王凡,徐砺新(第四军医大学病理学教研室西安7100332第四军医大学西京医院眼科)关键词单链多聚酶链式反应,序列分析中图号Q74PCR技术的发展日新月异,PCR技术用于序列分析已为大多数实验室所采用,... 展开更多
关键词 聚合酶链反应 序列分析 双脱氧终止法
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增强子结合蛋白家族的新基因HP8的部分cDNA克隆 被引量:2
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作者 徐砺新 万大方 +4 位作者 刘彦仿 李宏年 张萍萍 隋延仿 顾健人 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期20-23,共4页
探讨人的增强子结合蛋白(C/EBP)相关基因。方法以大鼠C/EBPcDNA为探针,筛选人胎盘cDNA文库。结果得到一个含有1975碱基命名为HP8的cDNA克隆,其中1~604位碱基属编码区。经基因数据库查对未发现同... 探讨人的增强子结合蛋白(C/EBP)相关基因。方法以大鼠C/EBPcDNA为探针,筛选人胎盘cDNA文库。结果得到一个含有1975碱基命名为HP8的cDNA克隆,其中1~604位碱基属编码区。经基因数据库查对未发现同源基因。该基因编码的蛋白C-末端含有亮氨酸拉链结构(leucine zipper struceure)和C/EBP功能区(C-末端60个氨基酸)同源性高达97%,而上游编码区则与C/EBP及其已知家族同源性很低,表明该基因属C/EBP基因家族新成员。基因组Southern杂交证实该基因为单拷贝基因。在14种胎儿组织中显示小肠、皮肤高表达,肾上腺中度表达,肝、肺、肾、甲状腺、胆囊低表达。在3例正常成人肝组织中仅1例低表达,而在5对肝癌及癌旁肝组织中显示2例癌组织及1例癌旁组织高表达。结论以上结果提示该基因可能与细胞增殖有关。 展开更多
关键词 增强子结合蛋白 C/EBP HP8 基因克隆 亮氨酸
原文传递
The determination and significance of C/EBP in cells of liver cancer and different liver tissues
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作者 徐砺新 隋延仿 +4 位作者 王文亮 张荣美 刘彦仿 胡敏 顾建人 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1993年第4期363-367,共5页
C/EBP is a sequence-specific DNA-binding protein.In order to identify its distribu-tion,localization and function,immunocytochemical technique(ABC method)was done usinganti-C/EBP polypeptide antibodies 1103~#,425~# in... C/EBP is a sequence-specific DNA-binding protein.In order to identify its distribu-tion,localization and function,immunocytochemical technique(ABC method)was done usinganti-C/EBP polypeptide antibodies 1103~#,425~# in liver specimens from 20 normal adult,5neonatal,6 patients with hepatitis,25 patients with liver cirrhosis,80 patients with hepatocellu-lar carcinoma(40 cases were associated with surrounding nontumorous tissues)and 26 patientswith cholangiocarcinoma(15 cases were associated with surrounding nontumorous tissues).Theresults showed that C/EBP was diffusely distributed in nuclei and cytoplasm of differentiated liv-er cells and very low or undetectable in liver cancer cells.The expression of C/EBP was in pro-portion to differentiated degree of tumor cells,and was obviously weaker than that in surround-ing nontumorous tissues.C/EBP positive staining has also been found in regenerating epithelialcells of bile ductules.The results suggested that C/EBP might play an important role in estab-lishing and maintaining the differentiation of liver cells and might exert an inhibiting effect againsttransformation of liver cells and proliferation of neoplastic tissue. 展开更多
关键词 C/EBP HEPATOMA liver CIRRHOSIS IMMUNOCYTOCHEMISTRY differentiation proliferration
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HP8: The cDNA clone of a novel member of C/EBP gene family
10
作者 徐砺新 万大方 +4 位作者 刘彦仿 李宏年 张萍萍 隋延仿 顾健人 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1996年第4期285-289,293,共6页
HP8:ThecDNAcloneofanovelmemberofC/EBPgenefamily¥(徐砺新)(万大方)(刘彦仿)(李宏年)(张萍萍)(隋延仿)(顾健人)XuLixin,WanDafang,LiuYanf... HP8:ThecDNAcloneofanovelmemberofC/EBPgenefamily¥(徐砺新)(万大方)(刘彦仿)(李宏年)(张萍萍)(隋延仿)(顾健人)XuLixin,WanDafang,LiuYanfang,LiHongnian,Zh... 展开更多
关键词 C/EBP family GENES LEUCINE ZIPPER CDNA
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人肝细胞肝癌与正常肝组织内C/EBP的分布及其mRNA丰度分析 被引量:1
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作者 徐砺新 隋延仿 +4 位作者 顾健人 李岱宗 王文亮 刘彦仿 张荣美 《中华病理学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期148-150,T030,共3页
以兔抗增强子结合蛋白(CCAAT/EnhancerBindingProtein,C/EBP)多肽抗体,用ABC法对18例人正常肝组织、5例新生儿肝组织及79例肝细胞肝癌(其中40例带有癌旁肝组织)中C/EBP进行免疫... 以兔抗增强子结合蛋白(CCAAT/EnhancerBindingProtein,C/EBP)多肽抗体,用ABC法对18例人正常肝组织、5例新生儿肝组织及79例肝细胞肝癌(其中40例带有癌旁肝组织)中C/EBP进行免疫组化定位,同时运用C/EBPcDNA探针对3例人正常肝组织、1例新生儿肝组织、10例肝细胞肝癌(其中8例含配对的癌旁肝组织)进行Northern杂交分析。免疫组化结果显示,C/EBP弥漫分布于分化成熟的肝细胞浆及肝细胞核中(胞浆含量更丰富),在肝癌分化差(或分化低)的组织细胞中含量低或检测不到,并和癌的分级存在一定相关性。所有增生的胆管上皮细胞也呈阳性。C/EBPmRNA丰度(表达量)和免疫组化结果基本相符。以上结果进一步证实C/EBP在维持肝细胞分化状态中担负重要作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 免疫组织化学 杂交 MRNA
原文传递
C/EBP研究概况
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作者 徐砺新 隋延仿 顾健人 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 1993年第2期58-61,共4页
C/EBP是一种具有“亮氨酸拉链”结构的DNA结合蛋白,作为真核细胞转录调控因子,参与肝细胞、脂肪细胞等富含这种蛋白的细胞的转录调控。它的功能主要是促进和维持细胞的分化状态,并可能具有抗细胞异常增殖的效应,在抗肿瘤形成方面可能担... C/EBP是一种具有“亮氨酸拉链”结构的DNA结合蛋白,作为真核细胞转录调控因子,参与肝细胞、脂肪细胞等富含这种蛋白的细胞的转录调控。它的功能主要是促进和维持细胞的分化状态,并可能具有抗细胞异常增殖的效应,在抗肿瘤形成方面可能担负一定的作用. 展开更多
关键词 C/EBP 增强子 结合蛋白
全文增补中
IMMUNOHISTOCHEMICAL DEMONSTRATION OF CCAAT/ENHANCER BINDING PROTEIN (C/EBP) IN HUMAN LIVER TISSUES OF VARIOUS ORIGIN
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作者 徐砺新 随延仿 +2 位作者 王文亮 刘彦仿 顾建人 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1994年第8期38-41,共4页
C / EBP is a sequence-specific DNA-binding protein. In order to indentify its distribution and localization, immunohistochemical technique (ABC method) was done using anti-C / EBP polypeptide antibodies 1103#, 425# in... C / EBP is a sequence-specific DNA-binding protein. In order to indentify its distribution and localization, immunohistochemical technique (ABC method) was done using anti-C / EBP polypeptide antibodies 1103#, 425# in liver specimens from 20 normal adults, 5 neonates, 6 patients with hepatitis, 25 with liver cirrhosis, 80 with hepatocellular carcinoma (40 cases were associated with surrounding nontumorous tissues) and 26 patients with cholangiocarcinoma (15 cases were associated with surrounding nontumorous tissues). The results showed that C / EBP was diffusely distributed in nuclei and cytoplasm of differentiated liver cells and very low or undetectable in liver cancer cells. The manifestation of C / EBP correlated with degree of differentiation of tumour cells, and was obviously weaker than that in surrounding nontumorous tussues. C / EBP positive staining has also been found in regenerating epithelial cells of bile ductules. The results suggested that C / EBP should play an important role in establishing and maintaining the differentiation of liver cells. 展开更多
关键词 CCAAT IN HUMAN LIVER TISSUES OF VARIOUS ORIGIN IMMUNOHISTOCHEMICAL DEMONSTRATION OF CCAAT/ENHANCER BINDING PROTEIN C/EBP
原文传递
C/EBP在人正常肝,肝癌等各种肝组织内的分布
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作者 徐砺新 隋延仿 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期332-334,共3页
关键词 肝肿瘤 免疫组织化学
原文传递
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