贲门癌中染色体8p21-p23杂合性丢失的研究

染色体Sp21-p23区域存在与多种肿瘤相关的抑癌基因。为明确该染色体区域的抑癌基因与贲门癌的关系，我们进行了贲门癌中染色体8p21-p23区域微卫星标记的杂合性丢失研究。首先采用激光捕获显微切割技术从19例贲门癌组织中获得均质的肿瘤细胞及正常的胃粘膜细胞，然后利用多重置换扩增技术扩增捕获细胞的全基因组DNA。选择覆盖染色体8p21-p23区域的13个微卫星标记，利用PCR结合硝酸银染色方法分析了肿瘤细胞中染色体8p21-p23的杂合性丢失情况。结果显示，在贲门癌中染色体8p21-p23的总丢失频率高达63．2％（12／19），单一标记的丢失频率为25％～55．6％。根据不同肿瘤组织中杂合性丢失的情况，我们确定了一个最小缺失区域，即8p22GGAA-8p22ATCT标记间约1．2Mb的范围。研究结果表明，染色体8p22区域抑癌基因在贲门癌发生发展中起重要作用；染色体最小重叠区域的确定对最终鉴定该区域内的抑癌基因有参考价值。

小干扰RNA抑制胃癌细胞肝素酶表达及侵袭的实验研究

目的利用 RNA 干扰(RNAi)技术封闭胃癌细胞系 SGC7901肝素酶表达,观察其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。方法体外转录合成小于扰 RNA(siRNA),经脂质体转染胃癌细胞系;结合逆转录(RT)-PCR,Western 印迹检测类肝素酶 mRNA 及蛋白质表达;通过体外侵袭实验评价肝素酶RNAi 后胃癌细胞系的侵袭能力变化。结果肝素酶 siRNA 分子可以特异性地抑制 SGC7901细胞肝素酶 mRNA,抑制率达(70±6)%;肝素酶 RNAi 后 SGC7901细胞的侵袭抑制率达(61±36)%。结论靶向肝素酶基因的 siRNA 分子能特异性抑制其蛋白表达水平,降低肿瘤细胞的侵袭能力。肝素酶是促进胃癌细胞侵袭转移的关键分子,并可为抑制胃癌侵袭转移提供新策略。