中药配位化学研究进展

简要回顾了中药配位化学理论的提出和发展,综述了近5年中药配位化学的研究进展,包括中药金属配合物合成、分离与表征,中药金属配合物的生物活性,以及中药金属配合物在相关方面的应用,并对中药配位化学的进一步发展作出了展望。

首批普罗雌烯国家标准物质标定

目的为满足国内普罗雌烯及相关制剂质量控制的需要,研制并标定首批普罗雌烯国家标准品。方法采用高分辨质谱、核磁共振波谱、红外光谱以及紫外光谱对待标品进行定性及结构确认;对待标品进行了理化分析;根据不同国家药品标准方法分别对待标品进行了纯度分析,通过质量平衡法进行赋值,并通过核磁定量进行验证,并对待标品的均匀性和稳定性进行了考察。结果待标品与普罗雌烯同质,经质量平衡法赋值含量为99.6%;均匀性考察符合要求;本品应在10~30℃保存,遮光、密封。结论本批待标品确认为普罗雌烯,以C_(22)H_(32)O_(2)计,含量为99.6%,可以作为首批普罗雌烯国家标准品,可作为普罗雌烯及相关制剂鉴别和含量测定用对照品。

定量核磁共振氢谱法测定那屈肝素钙中钙离子的含量

目的:建立采用定量核磁共振氢谱法(qHNMR法)测定那屈肝素钙中钙离子含量。方法:采集核磁共振氢谱(1H NMR),zg 30脉冲,弛豫延迟时间为15 s,选择乙二胺四乙酸(EDTA)与钙离子络合物Ca-EDTA的信号峰作为钙离子的定量峰,以马来酸为内标物,对那屈肝素钙中钙离子进行定量分析。结果:Ca-EDTA和马来酸定量峰信号在1H NMR谱上分离度良好,样品与内标物的质量比在0.546~12.238,与其定量峰面积比呈线性关系(r=0.999 9),精密度RSD为0.65%,重复性RSD为0.77%,平均加样回收率为99.7%(RSD为1.3%),采用qHNMR测定9批那屈肝素钙样品中钙离子含量为9.54%~9.99%,测定结果与电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定结果基本一致。结论:建立的qHNMR法操作简便、快速、准确,可用于那屈肝素钙中钙离子含量的测定。

^(1)H核磁共振定量法用于25(R,S)-鲁斯可皂苷元及其光学异构体的含量研究

目的:建立25(R,S)-鲁斯可皂苷元及其光学异构体的^(1)H核磁共振定量法(^(1)H qNMR)含量测定方法。方法:采用外标法,以鲁斯可皂苷元对照品为对照,分别以δ 5.42、3.45和3.79处的信号为25(R,S)-鲁斯可皂苷元、25R鲁斯可皂苷元和25S鲁斯可皂苷元的定量峰,以δ 6.63处的信号为内标富马酸的定量峰进行校准,对25(R,S)-鲁斯可皂苷元及其光学异构体进行定量研究。结果:25(R,S)-鲁斯可皂苷元的含量分别为97.88%(RSD=0.93%,n=5),与外标法(97.88%)、质量平衡法(97.98%),紫外分光光度法(98.40%)基本一致;25R-鲁斯可皂苷元含量为49.63%(RSD=1.5%,n=5)和25S-鲁斯可皂苷元含量为46.47%(RSD=1.5%,n=5),测定结果之和与25(R,S)-鲁斯可皂苷元总量基本一致。结论:^(1)H qNMR方法简便易行,可用于25(R,S)-鲁斯可皂苷元及其光学异构体的含量测定,为光学异构体的含量测定提供了新的技术方法;同时开展了外标法核磁定量测定方法的研究,为今后核磁定量方法的广泛使用进行了新的尝试。

N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸化学对照品稳定性研究

目的考察N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)对照品的稳定性。方法分别采用甲醇和乙腈作为溶剂,考察NMBA对照品溶液在4℃下24 h的稳定性以及25、40℃下1、3、7和10 d的短期稳定性,用高效液相色谱法(HPLC)测定纯度变化进行稳定性评估。利用高分辨质谱和核磁共振波谱对生成产物进行结构鉴定。结果不同溶剂和不同温度变化对NMBA稳定性影响不同,在乙腈溶剂中比较稳定,在甲醇溶剂中4℃下24 h稳定,但其纯度在25、40℃均有不同程度的降低,尤其40℃放置10 d后,生成杂质约92%,经高分辨质谱和核磁共振波谱分析,生成产物为N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸甲酯。结论通过对NMBA稳定性考察,为该对照品研制过程中溶剂的合理选择以及该对照品储存和用户的正确使用提供参考。

核磁共振氢谱法对3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇的定性和定量分析

目的 建立测定达肝素钠、依诺肝素钠、那屈肝素钙3种低相对分子质量肝素中残留溶剂乙醇含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance, qHNMR)。方法 采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振波谱仪,采集3种低相对分子质量肝素的核磁共振氢谱(^(1)H-NMR),以2,2,3,3-d4-3-(三甲基硅基)丙酸钠盐(TSP-d4)作为内标物,重水(D2O)为溶剂,90°脉冲,采样次数(NS)为32次,测试温度25℃采样时间(AQ)为4.59 s,弛豫延迟时间(D1)为40 s,对3种低相对分子质量肝素中的残留溶剂乙醇进行定性和定量分析。结果 样品的^(1)H-NMR谱在化学位移δ 1.18和δ 3.65分别出现甲基和亚甲基质子信号,结合耦合常数可以确定样品中含有残留溶剂乙醇。同时,乙醇和TSP-d4定量峰信号在^(1)H-NMR谱上分离度良好,乙醇在线性范围内线性关系良好(r>0.999 9),方法精密度和重复性良好,平均回收率(n=9)为101.55%,3种低相对分子质量肝素中的乙醇含量为0.025%~0.493%,测定结果与顶空气相色谱法测定结果基本一致。结论 建立的qHNMR方法可以准确识别低相对分子质量肝素样品中是否含有乙醇,同时可以对其进行准确定量,相比于经典的气相色谱方法更加简便快速,并且不破坏样品,拓宽了残留溶剂的检测手段,可为不同低相对分子质量肝素产品中残留溶剂乙醇测定提供参考。

核磁共振波谱法对维莫非尼的定性和定量分析

目的:建立定量核磁共振氢谱法(qHNMR)测定维莫非尼含量的方法。方法:首先采用质谱、核磁共振方法对维莫非尼结构进行确证,然后采用Bruker ANANCE NEO 600型核磁共振波谱仪测定一维定量氢谱,90°脉冲,弛豫时间(D1)15 s,扫描次数(NS)32次,测定温度25℃,以对苯二酚为内标,氘代二甲基亚砜(DMSO-d_(6))为溶剂,对维莫非尼进行定量研究。结果:对维莫非尼核磁共振氢谱和碳谱数据进行归属,利用qHNMR对维莫非尼进行定量分析,测得含量为98.78%,与质量平衡法测得的结果(98.91%)基本一致。结论:建立的qHNMR法操作简单、快速、准确,可用于维莫非尼含量测定。

定量核磁共振氢谱法测定5种N-亚硝胺类化合物的含量

目的:建立了测定N-亚硝基二正丙胺(N-nitrosodipropylamine,NDPA)、N-亚硝基二正丁胺(N-nitrosodibutylamine,NDBA)、N-亚硝基二异丙胺(N-nitrosodiisopropylamine,NDIPA)、N-亚硝基-N-甲基苯胺(N-nitroso-N-methylphenylamine,NMPA)和N-亚硝基-N-乙基苯胺(N-nitroso-N-ethylphenylamine,NEPA)5种N-亚硝胺类化合物含量的定量核磁共振氢谱法(quantitative proton nuclear magnetic resonance,qHNMR)。方法:采用BRUKER ANANCE NEO 600型核磁共振波谱仪采集一维核磁共振定量氢谱,以1,3,5-三甲氧基苯为内标,氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)为溶剂,90°脉冲,采样次数为32次,采样时间为2.75 s,弛豫延迟时间(D1)为30 s,对5种N-亚硝胺类化合物进行定量研究。结果:5种N-亚硝胺类化合物qHNMR法的结果与质量平衡法结果基本一致。结论:本文建立的qHNMR法简单快捷,准确性高,为N-亚硝胺类化合物含量测定提供了新的方法,同时作为该类化学对照品质量平衡法定值结果的有力佐证,使质量平衡法赋值更加准确可靠。

紫草素锌配合物的合成及其对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的:研究紫草素锌配合物的合成过程,并观察其对人宫颈癌He La细胞的抑制作用。方法:通过紫草素与醋酸锌反应得到紫草素锌配合物,并将紫草素和配合物通过紫外-可见分光光度法和红外光谱法进行表征;紫草素和紫草素锌对He La细胞体外的增殖抑制作用采用细胞毒性检测CCK-8法检测。结果:紫草素和紫草素锌配合物和对He La细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为2.72 mg·L-1和8.59 mg·L-1。结论:紫草素和紫草素锌均具有抗宫颈癌肿瘤活性,但紫草素与锌形成配合物后对He La细胞的增殖抑制作用降低。