四川省食品中重要食源性病原菌污染监测与分析

[目的]了解四川省主要食品中弯曲杆菌、单核细胞增生性李斯特菌、O157大肠杆菌、沙门菌、副溶血性弧菌5种食源性致病菌的污染状况,为食品安全预警和预防食物中毒提供科学依据。[方法]在四川省5个地区抽检生畜(禽)肉、水产品、熟肉制品、生食蔬菜、速冻米面5类食物样品共929份,依据国标法和特定新方法,运用API卡和VITEK32全自动微生物分析系统对样品进行病原菌分离、鉴定。[结果]从929份样品中共检出180株病原菌,总检出率为19.4%,其中弯曲杆菌17株,检出率9.0%,单核细胞增生性李斯特菌130株,检出率14.0%,O157大肠杆菌17株,检出率2.5%,沙门菌5株,检出率0.7%,副溶血性弧菌11株,检出率5.7%;5类食品中病原菌阳性率最高的是水产品(35.8%),其次为生畜(禽)肉(26.1%),第3为熟肉制品(9.4%)。[结论]四川地区居民主要消费食品中存在着较为严重的食源性病原菌污染,其中水产品和生畜(禽)肉是主要的污染食品;单核细胞增生性李斯特菌在冷冻(藏)禽肉和水产品中污染严重,分别为47.5%和28.5%,在直接入口的熟肉制品中单核细胞增生性李斯特菌的污染率达到8.8%。应进一步加强食源性病原菌的监测和研究。

2006年四川省部分地区霍乱弧菌毒力基因检测和脉冲场凝胶电泳分型分析

目的分析四川省2006年霍乱弧菌分子特征,分析疫情分离的菌株与监测分离的霍乱弧菌之间的遗传相关性,查找霍乱传染来源,为进一步研究本菌的流行规律和制定防治措施提供依据。方法PCR检测霍乱弧菌毒力基因(ctxAB);脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株进行分子分型,以BioNumericsV4.0软件UPGMA方法进行聚类分析。结果所试18株霍乱弧菌均具有ctxAB,为产毒株。对18株菌以NotⅠ酶切后PFGE可分为4个型别。结论首次从牛蛙中分离到产毒株。甲鱼中分离的霍乱弧菌与霍乱疫情分离菌株之间同源,被污染的甲鱼可能是本年度食源性霍乱暴发的传染来源之一,应进一步加强对各类海、水产品的监测。

猪链球菌选择性培养基研究

目的研制一种对猪链球菌有较强选择作用的选择性培养基,用于污染标本中分离猪链球菌。方法通过药物敏感实验筛选对猪链球菌2型不敏感的抗菌药物,继而用琼脂平板稀释法测定候选抗菌药物的MIC,组方后测定猪链球菌生长率,用模拟标本和猪源标本考核分离效果。结果研制成功含3种抗菌药物的透明指示选择性培养基(简称StS培养基),该培养基对猪链球菌2型的生长率为85.9%～94.7%,对大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯等常见革兰阴性细菌和革兰阳性菌中的葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、粪链球菌抑菌率100%。当模拟杂菌为108cfu/ml时,直接涂抹法检测灵敏度为7×103cfu/ml,较使用萘啶酮酸血平板提高1000倍。通过选择肉汤增菌后,StS培养基可使猪源标本猪链球菌检出率从0提高到14.9%。结论该培养基对猪链球菌具有较强的选择作用,使用该选择性培养基可以提高检测灵敏度,适合猪链球菌的动物源性标本与传染源追踪检测。

2006年四川省菌痢暴发疫情分子流行病学分析

目的了解四川省2006年8起菌痢疫情的传染来源和传播链,为预测疫情和制定防治措施提供依据。方法分析四川省2006年8起菌痢事件病原菌分子特征、菌痢暴发疫情分离的菌株与菌株之间,各疫情分离的菌株之间的遗传相关性;用PCR检测侵袭性质粒H抗原(ipaH基因)、志贺肠毒素1(Shigella enterotoxin1,SET1)、志贺肠毒素2(SET2)、志贺菌增殖和侵袭相关的毒力基因(ial基因);脉冲场凝胶电泳(PFGE)对菌株进行分子分型,以BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析。结果8起菌痢疫情的20株痢疾SET2、ial、ipaH基因均为阳性,所有菌株的SET1基因均为阴性。对20株菌以XbaⅠ酶切后PFGE可分为4个型别。结论同一暴发疫情分离菌株的PFGE型别相同,暴发疫情分离菌株都存在侵袭性致病大质粒;提示不同时间地点暴发的四川2006年8次暴发疫情可能有共同的传染来源;同一疫情来自相同的污染源;具有地区流行株的特性,应该加强监测,以控制进一步的暴发、流行。

PCR检测粪便中志贺菌

目的建立一种粪便样本中快速、特异、敏感的志贺菌检测方法。方法运用PCR对痢疾、福氏、鲍氏和宋内4群志贺菌进行侵袭性质粒H抗原(ipaH)基因的检测,并对该PCR方法进行反应的灵敏度、特异性以及模拟粪便样品的最低检出限测定。结果4群志贺菌均能检出侵袭性质粒H抗原(ipaH)基因,纯菌检测灵敏度达102cfu/ml,特异性实验中志贺菌菌株PCR扩增均为阳性,阴性对照菌株未扩增出特异性条带,混合菌株PCR扩增均为阳性;接种志贺菌到粪便样品中,当粪便样本中菌量达104cfu/ml以上时,不需要增菌,志贺菌均可立即检出。结论PCR方法检测志贺菌灵敏度高、快速、特异性强,可以很好地应用于粪便等临床样本中志贺菌的检测与鉴定。

希望的田野——海门市一批大中专毕业生到农村任职

江苏省海门市位于长江三角洲。改革开放以来,海门市的经济、社会各项事业迅速发展,1998年,全市国内生产总值101亿元,农业总产值30.3亿元,农民人均收入4230元,属于经济较发达的县份。近几年,随着农业基础设施日益加强,农业结构不断优化。

四川省成都市433例婴幼儿腹泻病原微生物监测分析

目的了解导致成都市婴幼儿腹泻疾病的主要病原微生物,获得成都市地区婴幼儿腹泻病原谱,为预防控制疾病提供参考依据。方法对成都市儿童医院<5岁婴幼儿门诊和住院腹泻患儿采集粪便样本,并对样本进行10种细菌、7种病毒和3种寄生虫检测。结果共采集433份腹泻患者粪便标本,共检出各类腹泻病原微生物337株,总检出率为77.83%。其中肠道致病细菌30株,检出率6.93%,腹泻病毒305份,检出率70.44%,寄生虫2份,检出率0.46%。肠道致病细菌中沙门菌最多(25株,6.89%)。腹泻病毒中A组轮状病毒130份,占38.58%;其次为杯状病毒最多(109份),占32.34%,结论成都市<5岁婴幼儿感染性腹泻病例主要集中在0～1岁年龄组,引起成都市婴幼儿腹泻的病原微生物以腹泻病毒和肠道致病菌为主,其中杯状病毒、A组轮状病毒和沙门菌为主要病原微生物。

2009年四川省副溶血性弧菌血清型、致病力及分子分型研究

目的了解四川地区2009年副溶血弧菌食物中毒疫情分离株和监测食品样品分离菌株菌型分布、致病力及分子分型特征,为四川地区副溶血性弧菌疾病防治提供科学依据。方法采用血清玻片凝集试验对2009年从食物中毒疫情和常规监测食品中分离的副溶血孤菌菌株进行血清分型、应用PCR方法进行耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关基因(trh)的检测、小鼠腹腔注射进行致病力实验和进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析等。结果 40株菌分属于5个血清群,疫情分离株分属于O3和O4群,监测分离株主要为O1群占43.75%(7/16),其中2起疫情分离到多个血清型的菌株;所有菌株trh基因均为阴性,其中20株携带tdh毒力基因,携带tdh毒力基因和不携带tdh、tlh毒力基因的菌株均有致病力。40株菌通过PFGE分型,共得到29个带型,同一疫情分离株具有多个PFGE型别。.结论四川省食品分离株和暴发疫情无太多联系,食品分离株血清型和PFGE型别呈多样性。对于从同一起暴发疫情中检出的不同血清型和不同PFGE型别的副溶血性弧菌需要确认各菌株与暴发的关系。

2株与霍乱弧菌O139诊断血清发生凝集的麦氏弧菌鉴定

目的对2株疑似O139群霍乱弧菌进一步鉴定,以排除或确诊霍乱。方法以试管凝集和交叉吸收实验复核玻片凝集结果,用生化实验和BIOFOSUN微生物鉴定系统进行生化鉴定,PCR技术检测O139霍乱弧菌特异性脂多糖基因(LPS)。结果玻片凝集阳性,试管凝集1株菌可达原诊断血清效价的1/4,1株菌达1/2,交叉吸收后均证实为非特异性凝集;未检出LPS基因;系统生化鉴定判定为麦氏弧菌。结论2株菌不是O139霍乱弧菌,而是麦氏弧菌。

2010年四川省市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌监测与分析

目的了解四川省区域内市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染状况,为食品安全预警和预防食源性疾病提供科学依据。方法在四川省区域内采集婴幼儿食品,进行阪崎肠杆菌检测,并对检出菌株运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对进行分子分型,以BioNumerics V5.10软件UPGMA方法进行聚类分析。结果在四川省10个市州共采集94份婴幼儿食品样品,检出13株阪崎肠杆菌,通过PFGE分型,共得到10个带型。结论监测结果表明四川省内市售婴幼儿食品中存在一定的阪崎肠杆菌污染,应进一步加大监测力度。

四川省1起霍乱暴发疫情的调查处置

目的对1起霍乱暴发疫情的调查、处置进行总结,为今后霍乱疫情的防治和处置提供经验和借鉴。方法制定统一的病例诊断标准,开展现场流行病学调查,并对采集标本进行实验室检测。结果此次疫情共发生霍乱病例3例,其中实验室确诊病例2例(O139群),临床病例1例,无死亡病例。病例有相同聚餐史,从聚餐中甲鱼销售点采集的2份样品检测出霍乱弧菌。结论该次疫情为霍乱弧菌O139群引起的暴发疫情,可疑污染来源为聚餐食物中的甲鱼。

一起多病原混合感染腹泻暴发调查

目的调查以腹泻伴腹痛、恶心、呕吐为主要症状的感染性腹泻的病因,查找传染源,分析调查处置过程,为预防控制疫情提供科学依据同时积累应急处置经验。方法采用流行病学调查方法对病例进行调查,采集患者和食堂员工样本、水样品进行分离培养和运用PCR和等方法进行检测。结果对采集样本进行实验室检测,水源水、出厂水、管网末梢水和4份患者样本致泻性大肠埃希菌毒素基因阳性,PCR检测4份患者样本杯状病毒阳性,从水源水、出厂水、管网末梢水和5份患者样本中分离出致泻性大肠埃希菌。结论该校学生是由于水源污染引起的致泻性大肠埃希菌和腹泻病毒混合感染所致的感染性腹泻,水源水被污染,消毒设备损坏而至饮用水未经过消毒处理是引起此次感染性腹泻疫情发生的传染源。

沙门菌在皮蛋中的定量生长状况分析

目的了解不同血清型在皮蛋中生长状况以及定量生长情况,为定量风险评估和预防控制食源性疾病提供基础数据和科学依据。方法通过人工染菌的方法将3种血清型的10^2和10^5CFU的菌量分别注射入鸭蛋中,按照皮蛋的生产制作工艺制成皮蛋,在室温下储存,从存储1-227 d,分10次取出,通过菌落计数分析在皮蛋中生长状况。结果 3种血清型均能在皮蛋中生存和生长,不同浓度菌株进入皮蛋中24 h候后均能迅速生长至10^9。结论不同血清型均能在皮蛋中生长并长期存活。

2010年四川省部分地区肉鸡中沙门菌污染监测

目的对肉鸡养殖和屠宰环节进行沙门菌监测,确定肉鸡在养殖和屠宰环节中沙门菌的污染状况,分析肉鸡中沙门菌的污染来源,为食品安全风险评估提供基础数据,同时也为预防和控制由沙门菌起的食源性疾病提供科学依据。方法在四川省成都市、遂宁市选取肉鸡养殖场和屠宰场作为监测点。采集肉鸡活体肛拭、养殖场环境样本,肉鸡胴体,屠宰场环境样本进行沙门菌分离,并对检出菌株运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型,用微量肉汤稀释法进行14种抗生素药物敏感实验。结果共从2个肉鸡屠宰场和1个肉鸡养殖场采集样本417份,检出沙门菌12株,检出率为2.87%。通过PFGE分型,共得到4个带型。其中遂宁养殖场的1株环境分离株和遂宁屠宰场的3株肉鸡胴体分离株具有相同PFGE型别,成都屠宰场的2株环境分离株和该屠宰场4株肉鸡胴体分离株具有相似PFGE型别。遂宁分离的4株沙门菌对14种抗生素100%敏感。成都分离的8株沙门菌对14抗生素耐药程度各异,其中4株沙门菌能耐受3种以上药物。结论四川省部分地区肉鸡在养殖和屠宰环节存在沙门菌污染,且有多重耐药菌株出现,应进一步加大监测力度。

四川省噬菌体6型霍乱流行病学调查分析

目的分析四川省噬菌体6型霍乱的流行及病原学特征,为制定防控对策提供依据。方法根据1998-2001年省噬菌体6型霍乱流行病学个案调查表、专题调查、实验室检验鉴定结果以及各地霍乱防治工作总结等资料,进行描述流行病学分析和实验室结果分析。结果1998-2008四川省出现首例噬菌体6型霍乱病例,1998-2001年累计报告6b型霍乱2 239例,死亡100例。6b型霍乱年平均发病率为0.66/10万,病死率为4.47%。疫情波及全省5个市(州)的20个县(区)。分子生物学试验:噬菌体分型6型菌株与同期流行的1型菌株完全一致,具有流行株的分子特征。结论噬菌体6型霍乱菌株具有引起霍乱流行的能力,且病死率较高。