黑曲霉ZJUQH产α-半乳糖苷酶的固体发酵培养基优化研究

通过响应面方法优化固体发酵培养基,以提高黑曲霉ZJUQH产α-半乳糖苷酶的能力。在前期研究的基础上,通过部分因子试验对蛋白胨、Na2HPO4·12H2O、料液比和接种量进行系统考察,筛选出两个影响较显著的因素料液比和蛋白胨添加量,然后通过中心组合试验进一步优化,建立以α-半乳糖苷酶酶活力为响应值的二次回归方程模型,获得了最优的固体发酵培养基组成:蛋白胨0.6g、Na2HPO4·12H2O 0.08g、料液比1:2.44(m/V)接种量1.5mL/5g。在该优化的培养条件下,固态发酵6d产α-半乳糖苷酶的酶活达到(77.21±2.01)U/g,比优化前(蛋白胨0.4g、Na2HPO4·12H2O 0.08g、料液比1:3、接种量1.5mL/5g)培养得到的酶活力最高值(49.05±2.11)U/g提高57.41%。

精氨酸代谢酶对传统黄酒发酵氨基甲酸乙酯产生的调控作用

通过不同处理方法分析传统黄酒在发酵过程中氨基甲酸乙酯产生的代谢规律以及精氨酸代谢酶对氨基甲酸乙酯产生的调控作用,其中对照组不加任何抑制剂,实验组分别加入0.001、0.01和0.2mol/L L-鸟氨酸盐酸盐及150和750U脲酶作为抑制剂.结果表明:L-鸟氨酸盐酸盐和脲酶抑制剂对氨基甲酸乙酯产生的抑制效果良好;尿素和瓜氨酸是氨基甲酸乙酯产生的主要前体物,在黄酒发酵中胞内鸟氨酸氨甲酰基转移酶活性对氨基甲酸乙酯的产生起着抑制作用,然而其具体的调控机制还有待进一步解析.

在线衍生-双三元高效液相色谱同时检测水产品中的甲醛及双乙酸钠含量

建立采用凯氏定氮仪蒸馏,在线衍生-双三元高效液相色谱同时检测水产品中甲醛及双乙酸钠含量的方法。样品中的甲醛及双乙酸钠经磷酸酸化后采用凯氏定氮仪蒸馏提取,馏出液经双三元高效液相色谱分析,左泵系统直接检测馏出液中双乙酸钠含量,右泵系统以2,4-二硝基苯肼的乙腈-乙酸溶液为衍生液,取样液体积10?μL,衍生液体积10?μL,在线衍生4 min,检测馏出液中的甲醛含量。甲醛及双乙酸钠分别在0.5~20.0、10~200 mg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限分别为0.5、10 mg/kg;批内重复性实验中,甲醛及双乙酸钠回收率分别为81.4%~88.3%、91.4%~102.9%,相对标准偏差分别为1.73%~2.68%、3.08%~4.16%,批间重复性实验中,甲醛及双乙酸钠回收率分别为80.6%~87.9%、90.8%~105.1%,相对标准偏差分别为2.07%~2.72%、3.44%~4.64%,方法快速、高效,适用于大批量水产品中甲醛及双乙酸钠的同时测定。

高效液相色谱测定食品包装纸中三氯生和三氯卡班

建立了食品包装纸中三氯生和三氯卡班的固相萃取结合高效液相色谱检测方法,用于研究食品包装纸中三氯生(TCS)和三氯卡班(TCC)的迁移规律。食品包装纸样品经乙腈提取,C18柱富集净化后,通过Accucore PFP(10 mm×4.6μm,2.6μm)分离,以甲醇和水为流动相进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器定量。在优化条件下,三氯生和三氯卡班分别在0.2~100 mg/L和0.05~100 mg/L范围内线性关系良好,相关系数(r2)均为0.999,方法定量限分别为0.04 mg/kg和0.01 mg/kg。3个水平的平均加标回收率为80.2~90.6%,相对标准偏差为0.5%~4.5%(n=6)。本方法具有良好的灵敏度、回收率和重复性,适合食品包装纸中三氯生和三氯卡班的测定。

固相萃取净化-气相色谱-三重四极杆串联质谱法同时测定奶粉中多氯联苯和邻苯二甲酸酯

建立了固相萃取净化结合气相色谱-三重四极杆串联质谱法同时检测奶粉中15种多氯联苯(PCBs)和16种邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)。通过对提取条件、净化方法、仪器条件等进行优化,样品经乙腈超声提取,固相萃取小柱净化后,由程序升温气化进样口不分流进样,选择反应监测模式检测。结果表明:PCBs和PAEs分别在5~1000μg/L和3~1000μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^2)均不小于0.9922;方法检出限分别为0.5~3.0μg/kg和0.3~1.0μg/kg,定量限分别为1.5~8.0μg/kg和1.0~3.0μg/kg;实际样品的平均加标回收率分别为72.4%~94.8%和82.4%~107.1%,相对标准偏差均不大于9.1%(n=6)。该方法前处理简单、净化效果好、灵敏度和准确度高,可以实现对样品的同时净化和提取,能够满足实验室样品中多氯联苯和邻苯二甲酸酯的日常检测要求。

高效液相色谱法测定酱油中组胺的含量

目的建立丹磺酰氯柱前衍生-高效液相色谱法测定酱油中组胺含量的方法。方法样品酱油以1,7-二氨基庚烷作为内标,用正丁醇:三氯甲烷(1:1,V:V)萃取净化,经丹磺酰氯衍生,乙醚萃取后氮气吹干,用乙腈定容,高效液相色谱仪测定,内标法定量。结果组胺含量在1~100 mg/L线性关系良好,线性相关系数r=0.9999,检出限为0.5 mg/kg。在精密度实验中,其相对标准偏差为2.59%~6.48%,在1.0、10.0、50.0 mg/kg的添加水平下,加标回收率为88.0%~104.2%。结论该方法线性关系好、检出限低、稳定性好、回收率高、测定结果准确,适合酱油中组胺的测定。

高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中乳铁蛋白含量

建立一种高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中乳铁蛋白含量的方法,用磷酸盐缓冲液提取,磷酸调pH,除酪蛋白,高效液相色谱法测定,外标法定量。以HiTrapTM Heparin HP(1 mL)肝素亲和柱为色谱柱,磷酸盐缓冲液为流动相,梯度洗脱,检测波长为280 nm。结果表明,平均加标回收率(n=6)在89.9%~101.0%,相对标准偏差(RSD)在1.61%~4.00%,定性检测限(LOD)是0.1 mg/100 g,定量检测限(LOQ)是0.3 mg/100 g。该方法前处理简单,结果准确,精密度高,重现性好,可应用于婴幼儿乳粉中乳铁蛋白的定量分析。

黑曲霉XTY液体深层发酵产阿魏酸酯酶的培养基优化研究

为提高黑曲霉XTY产阿魏酸酯酶的酶活,采用响应面优化方法优化其液体深层发酵培养基。通过部分因子试验得出2个影响较显著的因素,分别为豆渣、蛋白胨添加量,确定其最大响应区域。结合中心组合试验及响应面分析方法,建立以阿魏酸酯酶比酶活为响应值的二次回归方程模型,获得最优的液体深层发酵培养基组成:2.26%豆粕,1.035%蛋白胨,0.3%KH2PO4,0.8%Na2HPO4.7H2O,0.01%NaC1和0.02%MgSO4.7H2O。在此发酵培养基下,黑曲霉XTY液体深层发酵产阿魏酸酯酶的比酶活达944.56 U/g(发酵5 d),较优化前提高了56%。其实验值与预测值基本相符,说明预测模型可靠性高,可用于阿魏酸酯酶液体深层发酵培养基的优化。

糖脂生物表面活性剂——甘露糖赤藓糖醇脂的研究进展

甘露糖赤藓糖醇脂是一种糖脂类生物表面活性剂,主要由霉菌和酵母菌等微生物发酵生产,具有良好表面活性和特殊生物活性,其在食品、医药、化妆品等领域有着潜在的应用前景。近年来,其研究在国外备受关注,而国内却鲜有报道。文中综述了甘露糖赤藓糖醇脂的发酵生产、多样性结构及活性、构效关系、生物合成途径等方面的相关研究,对存在问题进行了分析,并探讨了今后的研究重点。

传统黄酒发酵氨基甲酸乙酯产生的代谢规律及机制初探

为探讨我国传统黄酒发酵过程中氨基甲酸乙酯产生的细胞学和酶学基础,在线分析了对照组和添加L-鸟氨酸盐的抑制组不同发酵时间条件下氨基甲酸乙酯的演变规律,同时分析精氨酸代谢的中间前体物——乙醇和EC前体物质(主要包括尿素和瓜氨酸等)之间的相关性,探明其代谢规律。试验结果表明,瓜氨酸是导致黄酒EC产生的关键前体物质。研究表明乙醇与EC合成不存在正相关性,同时L-鸟氨酸盐酸盐通过OTC酶的激发来达到抑制EC合成的目的。

酒精酵母生物合成1,6-二磷酸果糖的条件优化研究

为优化酒精酵母F15菌株转化合成1,6-二磷酸果糖(FDP)的条件,在单因素试验基础上,采用Box-Benhnken设计响应面中心组合试验,建立FDP生物合成量随反应液初始pH值、葡萄糖浓度和磷酸二氢钠浓度变化的二次回归方程。结果表明:最适的转化条件为初始pH8、葡萄糖11%、磷酸二氢钠7%,在此转化条件下,获得的最大FDP生物合成量为3.74g/L。

牛奶中6种黄曲霉毒素的3种液相色谱法比较

比较了牛奶中黄曲霉毒素测定的3种液相色谱分析方法。样品经直接稀释、免疫亲和柱净化,以乙腈-甲醇-水体积比（22︰22︰46）为流动相,分别经柱后光化学衍生化、未衍生化及碘衍生化-液相色谱-荧光法进行测定。柱后光化学衍生化,黄曲霉毒素M2,M1线性范围为0.02-20μg/L,G2,B2 0.005-20μg/L,G1,B1 0.01-20μg/L,相关系数≥0.999,定量限为0.000 5-0.002μg/kg,加标回收率79%-116%;柱后碘衍生化,M2,M1线性范围分别为0.02-20,0.05-20μg/L,其余4种均为0.01-20μg/L,相关系数≥0.999,定量限0.001-0.005μg/kg,回收率74-121%;未经衍生化直接进样,G2,B2线性范围0.005-20μg/L,其余4种为0.02-20μg/L,相关系数≥0.998,定量限0.000 5-0.003μg/kg,回收率82%-121%。结果表明,柱后光化学衍生测定6种黄曲霉毒素在线性范围、灵敏度和定量限等方面均具有优势。